《有机化学》课程授课教案（讲义）第十九章 氨基酸 蛋白质、核酸

第十九章氨基酸蛋白质核酸蛋白质和核酸都是天然高分子化合物，是生命物质的基础。我们知道，生命活动的基本特征就是蛋白质的不断自我更新。蛋白质是一切活细胞的组织物质，也是酶、抗体和许多激素中的主要物质。所有蛋白质都是-由氨基酸构成的，因此，-由氨基酸是建筑蛋白质的砖石。要讨论蛋白质的结构和性质，首先要研究-由氨基酸的化学。320~1氨基酸一、分类、命名和构型组成蛋白质的氨基酸（天然产氨基酸）都是α-氨基酸，即在α-碳原子上有一个氨基，可用下式表示：H天然产的各种不同的α-由氨基酸只R不同而已。R-C-COOH氨基酸目前已知的已超过100种以上，但在生物体NH2内作为合成蛋白质的原料只有二十种（见P450表19-1）。1.分类：按烃基类型可分为脂肪族氨基酸，芳香族氨基酸，含杂环氨基酸。按分子中氨基和羧基的数目分为中性氨基酸，酸性氨基酸，碱性氨基酸。按氨基和羧基的相对位置分为a-氨基酸，β-氨基酸，-氨基酸等。2.命名：多按其来源或性质而命名。国际上有通用的符号（见P450表19-1）。可按系统命名法，以羧酸为母体，氨基为取代基来命名。3.构型：月用D/L体系表示一一在费歇尔投影式中氨基位于横键右边的为D型，位于左边的为L型。例如：COOHCOOH-C-HH-CNH2NH2-RRL-氨基酸D-氨基酸天然氨基酸（出甘氨酸外）其他所有A-碳原子都是手性的，都有旋光性，而且发现主要是L型的（也有D型的，但很少）。二、氨基酸的性质α-氨基酸都是无色晶体，易溶于水而难溶于无水乙醇、乙醚等有机溶剂。具有较高的熔点，大多数溶化的同时发生分解，也记录为分解点。1.氨基酸的酸-碱性一一两性与等电点氨基酸分子中的氨基是碱性的，而羧基是酸性的，因而氨基酸既能与酸反应，也能与碱反应，是一个两性化合物。（1）两性OHR-CH-COOH_H R-CH-COOH R-CH-COO*NH3NH2NH2氨基酸在一般情况下不是以游离的羧基或氨基存在的，而是两性电离，在固态或水溶液中形成内盐。R-CH-COOHR-CH-COONH2*NH3（2）等电点在氨基酸水溶液中加入酸或碱，至使羧基和氨基的离子化程度相等（即氨基酸分子所1

1 第十九章 氨基酸 蛋白质 核酸 蛋白质和核酸都是天然高分子化合物，是生命物质的基础。我们知道，生命活动的基 本特征就是蛋白质的不断自我更新。蛋白质是一切活细胞的组织物质，也是酶、抗体和许多 激素中的主要物质。所有蛋白质都是α-由氨基酸构成的，因此，α-由氨基酸是建筑蛋白质 的砖石。要讨论蛋白质的结构和性质，首先要研究α-由氨基酸的化学。 §20~1 氨基酸 一、分类、命名和构型 组成蛋白质的氨基酸（天然产氨基酸）都是α-氨基酸，即在α-碳原子上有一个氨基， 可用下式表示： 天然产的各种不同的α-由氨基酸只 R 不同而已。 氨基酸目前已知的已超过 100 种以上，但在生物体 内作为合成蛋白质的原料只有二十种（见 P450 表 19-1）。 1．分类： 按烃基类型可分为脂肪族氨基酸，芳香族氨基酸，含杂环氨基酸。 按分子中氨基和羧基的数目分为中性氨基酸，酸性氨基酸，碱性氨基酸。 按氨基和羧基的相对位置分为α-氨基酸，β-氨基酸，γ-氨基酸等。 2．命名： 多按其来源或性质而命名。国际上有通用的符号（见 P450 表 19-1）。 可按系统命名法，以羧酸为母体，氨基为取代基来命名。 3．构型： 用 D/ L 体系表示——在费歇尔投影式中氨基位于横键右边的为 D 型，位于 左边的为 L 型。例如： D-氨基酸 L-氨基酸 天然氨基酸（出甘氨酸外）其他所有α-碳原子都是手性的，都有旋光性，而且发现主 要是 L 型的（也有 D 型的，但很少）。 二、氨基酸的性质 α-氨基酸都是无色晶体，易溶于水而难溶于无水乙醇、乙醚等有机溶剂。具有较高的 熔点，大多数溶化的同时发生分解，也记录为分解点。 1．氨基酸的酸-碱性——两性与等电点 氨基酸分子中的氨基是碱性的，而羧基是酸性的，因而氨基酸既能与酸反应，也能与 碱反应，是一个两性化合物。 （1）两性 R CH COOH NH2 R CH COO NH2 R CH COOH NH3 H OH 氨基酸在一般情况下不是以游离的羧基或氨基存在的，而是两性电离，在固态或水溶 液中形成内盐。 R CH COOH NH2 R CH COO NH3 （2）等电点 在氨基酸水溶液中加入酸或碱，至使羧基和氨基的离子化程度相等（即氨基酸分子所 R C NH2 H COOH H C NH2 COOH R C H COOH R NH2

带电荷呈中性一一处于等电状态）时溶液的pH值称为氨基酸的等电点。常以pI表示。R-CH-COOHNH2IhOHOHOR-CH-COO"R-CH-COOR-CH-COOHHOOHONH*NHsNH2等电点(pl)溶液pH>等电点溶液pH<等电点注：1°等电点为电中性而不是中性（即pH-7），在溶液中加入电极时其电荷迁移为零。中性氨基酸pl = 5.6(4.8)~6.3酸性氨基酸pl = 2.8~3.2碱性氨基酸pl=7.6~10.82°等电点时，偶极离子在水中的溶解度最小，易结晶析出。2.氨基酸氨基的反应(1)氨基的酰基化氨基酸分子中的氨基能酰基化成酰胺。RRR'-COCI + NH2-CH-COOH -R'-C-NH-CH-COOH +HCI0乙酰氯、醋酸酐、苯甲酰氯邻苯二甲酸酐等都可用作酰化剂。在蛋白质的合成过程中为了保护氨基则用苄氧甲酰氯（氯甲酸酯）作为酰化剂。oRR0-CH2-O-C-NH-CH-COOH<)-CH2-O-C-CI + NH2-CH-COOH 选用芊氧甲酰氯这一特殊试剂，是因为这样的酰基易引入，对以后应用的种种试剂较稳定，同时还能用多种方法把它脱下来。（2）氨基的烃基化氨基酸与RX作用则烃基化成N-烃基氨基酸：NO2RNO2R-F +NH2-CH-COOH+NO2-NH-CH-COOHNO2氟代二硝基苯在多肽结构分析中用作测定N端的试剂。（3）与亚硝酸反应R-CH-COOH + N21+ H20R-CH-COOH + HNO2OHNH2反应是定量完成的，测定N2的体积便可计算出氨基酸只氨基的含量。4）与三酮反应α-氢基酸在碱性溶液中与三酮作用，生成显蓝色或紫红色的有色物质，是鉴别-氨基酸的灵敏的方法。"O20-H20.OH=0OHO水合三酮节三酮CRCHO.OHRCHCOOHcOOHNH23H20OOHO2

2 带电荷呈中性——处于等电状态）时溶液的 pH 值称为氨基酸的等电点。常以 pI 表示。 R CH COOH NH3 R CH COO NH3 R CH COO NH2 R CH COOH NH2 OH OH H H 溶液 pH>等电点 等电点(pI) 溶液 pH<等电点 注：1°等电点为电中性而不是中性（即 pH=7），在溶液中加入电极时其电荷迁移为零。 中性氨基酸 pI = 5.6(4.8)~6.3 酸性氨基酸 pI = 2.8~3.2 碱性氨基酸 pI = 7.6~10.8 2°等电点时，偶极离子在水中的溶解度最小，易结晶析出。 2．氨基酸氨基的反应 （1） 氨基的酰基化 氨基酸分子中的氨基能酰基化成酰胺。 R' COCl NH2 CH R COOH R' C NH O CH R + COOH + HCl 乙酰氯、醋酸酐、苯甲酰氯邻苯二甲酸酐等都可用作酰化剂。在蛋白质的合成过程中为 了保护氨基则用苄氧甲酰氯(氯甲酸苄酯)作为酰化剂。 NH2 CH R COOH C NH O CH R CH2 O C Cl + COOH O CH2 O 选用苄氧甲酰氯这一特殊试剂，是因为这样的酰基易引入，对以后应用的种种试剂较 稳定，同时还能用多种方法把它脱下来。 （2）氨基的烃基化 氨基酸与 RX 作用则烃基化成 N-烃基氨基酸： NH2 CH R COOH NH CH R + COOH NO2 F NO2 NO2 NO2 氟代二硝基苯在多肽结构分析中用作测定 N 端的试剂。 （3）与亚硝酸反应 R CH COOH + HNO2 R CH COOH NH2 OH + N2 + H2O 反应是定量完成的，测定 N2 的体积便可计算出氨基酸只氨基的含量。 4）与茚三酮反应 α-氨基酸在碱性溶液中与茚三酮作用，生成显蓝色或紫红色的有色物质，是鉴别α- 氨基酸的灵敏的方法。 C C C O O O C C C O O OH H2O OH 茚三酮 水合茚三酮 C C C O O OH OH RCHCOOH NH2 C C C O O C C C O N HO + + RCHO CO 3H2O

3.氨基酸羧基的反应氨基酸分子中羧基的反应主要利用它能成酯、成酐、成酰胺的性质。这里值得特别提出的是将氨基酸转化为叠氮化合物的方法（氨基酸酯与肼作用生成酰肼，酰耕与亚硝酸作用则生成叠氮化合物）。叠氮化合物与另一氨基酸酯作用即能缩合成二肽（用此法能合成光学纯度的肽）P618。4.受热后的反应α-氨基酸受热后，能在两分子间发生脱水反应，生成环状的交酰胺β-氨基酸受热后，分子内脱一分子氨，生成α，β一不饱和羧酸。一或8一氨基酸受热后，分子内脱一分子水生成环状的内酰胺。分子中更远的，受热后分子间脱水生成聚酰胺。三、氨基酸的制备氨基酸的制取主要有三条途径：即蛋白质水解、有机合成和发酵法。氨基酸的合成方法主要有三种：1.由醛制备醛在氨存在下加氢氰酸生成α-氨基腈，后者水解生成α-氨基酸。例如：NH3, HCN(1) NaOH, H20CgHsCH2CHCNCoHsCH2CHOCgHsCH2CHCO2(2) H0++NH3NH2苯丙氨酸74%2.α-卤代酸的氨解R-CH-COOH + NH3R-CH-COOH+HXxNH2此法有副产物仲胺和叔胺生成，不易纯化。因此，常用盖伯瑞尔法代替上法。O"C0RRCNH + X-CH-COOR'N-CH-COOR'T00RH3O+COOH+ NH2-CH-COOH + R'OHCOOH3

3 3．氨基酸羧基的反应 氨基酸分子中羧基的反应主要利用它能成酯、成酐、成酰胺的性质。这里值得特别提 出的是将氨基酸转化为叠氮化合物的方法（氨基酸酯与肼作用生成酰肼，酰肼与亚硝酸作用 则生成叠氮化合物）。 叠氮化合物与另一氨基酸酯作用即能缩合成二肽（用此法能合成光学纯度的肽）P618。 4．受热后的反应 α-氨基酸受热后，能在两分子间发生脱水反应，生成环状的交酰胺 β-氨基酸受热后，分子内脱一分子氨，生成α，β－不饱和羧酸。 γ－或δ－氨基酸受热后，分子内脱一分子水生成环状的内酰胺。 分子中更远的，受热后分子间脱水生成聚酰胺。 三、氨基酸的制备 氨基酸的制取主要有三条途径：即蛋白质水解、有机合成和发酵法。 氨基酸的合成方法主要有三种： 1．由醛制备 醛在氨存在下加氢氰酸生成α-氨基腈，后者水解生成α-氨基酸。 例如： C6H5CH2CHO NH3 , HCN C6H5CH2CHCN NaOH, H2O H3O (1) (2) NH2 C6H5CH2CHCO2 NH3 苯丙氨酸 74% 2．α- 卤代酸的氨解 R CH COOH + NH3 X R CH COOH + HX NH2 此法有副产物仲胺和叔胺生成，不易纯化。因此，常用盖伯瑞尔法代替上法。 C NH O O X CH R COOR' C N O O CH R + COOR' H3O COOH COOH CH R + NH2 COOH + R'OH

盖伯瑞尔法生成的产物较纯，适用于实验室合成氨基酸。3.由丙二酸酯法合成此法应用的方式多种多样，其基本合成路线是：.0C-0COOC2HsCOOC2H5,COOC2HsBr2NKN-CHCH2Br-CH-OCCl4CO0C2H5COOC2HsCOOC2HsOCO0OC2H50-0(1)C2H5ONa(1) H3O+-COOC2H5NCH-COOH(2)PhCH,Br(2) CO2CH2PhOOCH2Ph.0NH2NH2NHNH2-CH-COOH-NHCH2Ph"0D，L-苯丙氨酸合成法合成的氨基酸是外消旋体，拆分后才能得到D-和L-氨基酸。氨基酸的化学合成1850年就已实现，但氨基酸的发酵法生产在一百年后的1957年才得以实现用糖类（淀粉）发酵生产谷氨酸。19.2多肽一、多肽的组成和命名1.肽和肽键一分子氨基酸中的羧基与另一分子氨基酸分子的氨基脱水而形成的酰胺叫做肽，其形成的酰胺键称为肽键。ROR':RR :o-H2ONH2-CH-C-OH + NH2-CH-COOHNH2-CHiC-NHCH-COOH肽键由n个α-氨基酸缩合而成的肽称为n肽，由多个a-氨基酸缩合而成的肽称为多肽。一般把含100个以上氨基酸的多肽（有时是含50个以上）称为蛋白质。无论肽链有多长，在链的两端一端有游离的氨基（-NH2），称为N端：链的另一端有游离的羧基（-COOH)，称为C端。RorR 0.P-NH-CH-COOH: NH2iCH-CNH-CH-C-JnC端N端2.肽的命名根据组成肽的氨基酸的顺序称为某氨酰某氨酰某氨酸（简写为某、某、某）。例如：CH3CH2OHCH2CsHsNH2-CH-C-NH-CH-C-NH-CH-COOH100丙氨酰丝氨酰苯丙氨酸（丙-丝苯丙）很多多肽都采用俗名，如催产素、胰岛素等。4

4 盖伯瑞尔法生成的产物较纯，适用于实验室合成氨基酸。 3．由丙二酸酯法合成 此法应用的方式多种多样，其基本合成路线是： CH2 COOC2H5 COOC2H5 Br2 CCl4 CH COOC2H5 COOC2H5 Br C NK C O O C N C O O CH COOC2H5 COOC2H5 C2H5ONa PhCH2Br (1) (2) C N C O O C COOC2H5 COOC2H5 CH2Ph H3O CO2 (1) (2) C N C O O CH CH2Ph COOH NH2NH2 C C O O CH CH2Ph NH2 COOH NH NH + D，L-苯丙氨酸 合成法合成的氨基酸是外消旋体，拆分后才能得到 D-和 L-氨基酸。 氨基酸的化学合成 1850 年就已实现，但氨基酸的发酵法生产在一百年后的 1957 年 才得以实现用糖类（淀粉）发酵生产谷氨酸。 19．2 多 肽 一、多肽的组成和命名 1． 肽和肽键 一分子氨基酸中的羧基与另一分子氨基酸分子的氨基脱水而形成的酰胺叫做肽，其形 成的酰胺键称为肽键。 NH2 CH R C O OH NH2 CH R' + COOH - H2O NH2 CH R C O NH CH R' COOH 肽键 由 n 个α-氨基酸缩合而成的肽称为 n 肽，由多个α-氨基酸缩合而成的肽称为多肽。 一般把含 100 个以上氨基酸的多肽（有时是含 50 个以上）称为蛋白质。 无论肽链有多长，在链的两端一端有游离的氨基（-NH2），称为 N 端；链的另一端有游 离的羧基（-COOH），称为 C 端。 NH2 CH R C O NH CH R' C O NH CH R'' COOH n N 端 C 端 2．肽的命名 根据组成肽的氨基酸的顺序称为某氨酰某氨酰.某氨酸（简写为某、某、某）。 例如： NH2 CH CH3 C O NH C O NH CH CH2C6H5 CH COOH CH2OH 丙氨酰丝氨酰苯丙氨酸 （丙 丝 苯丙） 很多多肽都采用俗名，如催产素、胰岛素等

二、多肽结构的测定由氨基酸组成的多肽数目惊人，情况十分复杂。假定100个氨基酸聚合成线形分子，可能具有20100种多肽。例如：由甘氨酸、氨酸、亮氨酸三种氨基酸就可组成六种三肽。甘-缬-亮；甘-亮-；缬-亮-甘：-甘-亮：亮-甘-；亮--甘。多肽结构的测定主要是作如下工作：①了解某一多肽是由哪些氨基酸组成的。②各种氨基酸的相对比例。③确定各氨基酸的排列顺序。多肽结构测定工作步骤如下：1.测定分子量2.氨基酸的定量分析HCI层析法分离各种氨基酸多肽各种氨基酸的含量氨基酸H20现代方法是将水解后的氨基酸混和液用氨基酸分析仪进行分离和测定。3.端基分析（测定N端和C端）（1）测定N端（有两种方法）a2,4-=硝基氟苯法一一桑格尔(Sanger-英国人)法2,4-=硝基氟苯与氨基酸的N端氨基反应后，再水解，分离除N-二硝基苯基氨基酸用色谱法分析，即可知道N端为何氨基酸。Na2CO3-F + H2N-CH-CONH-CH-CONH-O2N-RRNO2HCIO,NHN-CH-CONH-CH-CONH-..R:NO2RO2N-HN-CH-COOH + H2N·CH-COOH +R:NO2R此法的缺点是所有的肽键都被水解掉了。b异硫氰酸苯酯(Ph-N=C=S)法-艾德曼（Edman）降解法OpH>7C-NH-多肽CHsN=C=S + NH2CHCONH-CoHsNHC多肽CHRNH-RHS.NpH<7CH-R多肽NC6H5O测定咪唑衍生物的R，即可知是哪种氨基酸。异硫氰酸苯酯法的特点是，除多肽N端的氨基酸外，其余多肽链会保留下来。这样就可以继续不断的测定其N端。（2）测定C端a多肽与肼反应5

5 二、多肽结构的测定 由氨基酸组成的多肽数目惊人，情况十分复杂。假定 100 个氨基酸聚合成线形分子， 可能具有 20100 种多肽。 例如：由甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸三种氨基酸就可组成六种三肽。 甘-缬-亮； 甘-亮-缬； 缬-亮-甘； 缬-甘-亮； 亮-甘-缬； 亮-缬-甘。 多肽结构的测定主要是作如下工作： ① 了解某一多肽是由哪些氨基酸组成的。 ② 各种氨基酸的相对比例。 ③ 确定各氨基酸的排列顺序。 多肽结构测定工作步骤如下： 1．测定分子量 2．氨基酸的定量分析 HCl H2O 多肽 氨基酸 层析法分离 各种氨基酸 各种氨基酸的含量 现代方法是将水解后的氨基酸混和液用氨基酸分析仪进行分离和测定。° 3．端基分析（测定 N 端和 C 端） （1）测定 N 端（有两种方法） a 2,4- = 硝基氟苯法——桑格尔(Sanger-英国人)法 2,4- = 硝基氟苯与氨基酸的 N 端氨基反应后，再水解，分离除 N-二硝基苯基氨基酸， 用色谱法分析，即可知道 N 端为何氨基酸。 O2N F H2N CH R CONH CH R' CONH . + . O2N HN CH R CONH CH R' CONH . NO2 NO2 Na2CO3 HCl O2N HN CH R COOH NO2 CH R' + H2N COOH + 此法的缺点是所有的肽键都被水解掉了。 b 异硫氰酸苯酯(Ph-N=C=S)法——艾德曼(Edman)降解法。 C6H5N=C=S NH2CHCONH R + 多肽 C6H5NHC 多肽 S NH CH R C O NH 7 pH 7 C N C CH H N C6H5 O R S + 多肽 测定咪唑衍生物的 R，即可知是哪种氨基酸。 异硫氰酸苯酯法的特点是，除多肽 N 端的氨基酸外，其余多肽链会保留下来。这样就 可以继续不断的测定其 N 端。 （2）测定 C 端 a 多肽与肼反应

所有的肽键（酰胺）都与肼反应而断裂成酰，只有C端的氨基酸有游离的羧基，不会与肼反应成酰肼。这就是说与肼反应后仍具有游离羧基的氨基酸就是多肽C端的氨基酸。b羧肽酶水解法在羧肽酶催化下，多肽链中只有C端的氨基酸能逐个断裂下来。4.肽链的选择性断裂及鉴定上述测定多肽结构顺序的方法，对于分子量大的多肽是不适用的。对于大分子量多肽顺序的测定，是将其多肽用不同的蛋白酶进行部分水解，使之生成二肽、三肽等碎片，再用端基分析法分析个碎片的结构，最后将各碎片在排列顺序上比较并合并，即可推出多肽中氨基酸的顺序。部分水解法常用的蛋白酶有：胰蛋白酶一一只水解羰基属于赖氨酸、精氨酸的肽键。糜蛋白酶一一水解炭基属于苯内氨酸、酪氨酸、色氨酸的肽键。溴化氰一——只能断裂羰基属于蛋氨酸的肽键。F.Sanger及其他工作者化了约10年时间与1953年（35岁）首先测定出牛胰岛素的氨基酸顺序，由此Sanger获得了1958年（41岁）的诺贝尔化学奖。此后，有几百种多肽和蛋白质的氨基酸顺序被测定出来，其中包括含333个氨基酸单位的甘油醛-3-磷酸酯脱氢酶以后F.Sanger又测定了DNA核苷酸顺序，因而他第二次（1980年62岁）获得了诺贝尔奖（同美国人伯格、吉尔伯特共享）。两次获得诺贝尔奖的化学家是很少见的，所以说，F.Sanger是一个伟大的化学家。三、多肽的合成要使各种氨基酸按一定的顺序连接起来形成多肽是一项十分复杂的化学工程，需要解决许多难题，最主要的是要解决四大问题。1.保护-NH2或-COOH氨基酸是多官能团化合物，在按要求形成肽键时，必须将两个官能团中的一个保护起来，留下一个去进行指定的反应，才能达到合成的自的。对保护基的要求是：易引入，之后又易除去。我们把保护-NH2称为代帽子，保护羧基称为穿靴子。2.活化反应基团（活化-NH2或-COOH）通常是保护-NH2及-OH、-SH等，活化-COOH（具体方法-略）3.生物活性合成多肽必须保证氨基酸的排列顺序与天然多肽相同，并与天然多肽不论在物理、化学性质和生物活力各方面都一样，才具有意义。我国1965年6月发表合成成功牛胰岛素的文章，生物活性1.2~70%西德·月..羊.......0.5~10%-美国1967年发表文章（胰岛素合成方法的改进）前苏联1972年发表文章（胰岛素合成方法的改进）胰岛素是一种激素，可用于治疗糖尿病，但只能用和人体结构相近的胰岛素，如猪胰岛素，其它的则不起疗效。6

6 所有的肽键（酰胺）都与肼反应而断裂成酰肼，只有 C 端的氨基酸有游离的羧基，不 会与肼反应成酰肼。这就是说与肼反应后仍具有游离羧基的氨基酸就是多肽 C 端的氨基酸。 b 羧肽酶水解法 在羧肽酶催化下，多肽链中只有 C 端的氨基酸能逐个断裂下来。 4．肽链的选择性断裂及鉴定 上述测定多肽结构顺序的方法，对于分子量大的多肽是不适用的。对于大分子量多肽 顺序的测定，是将其多肽用不同的蛋白酶进行部分水解，使之生成二肽、三肽等碎片，再用 端基分析法分析个碎片的结构，最后将各碎片在排列顺序上比较并合并，即可推出多肽中氨 基酸的顺序。 部分水解法常用的蛋白酶有： 胰蛋白酶——只水解羰基属于赖氨酸、精氨酸的肽键。 糜蛋白酶——水解羰基属于苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸的肽键。 溴化氰———只能断裂羰基属于蛋氨酸的肽键。 F.Sanger 及其他工作者化了约 10 年时间与 1953 年（35 岁）首先测定出牛胰岛素的氨 基酸顺序，由此 Sanger 获得了 1958 年（41 岁）的诺贝尔化学奖。此后，有几百种多肽和蛋 白质的氨基酸顺序被测定出来，其中包括含 333 个氨基酸单位的甘油醛-3-磷酸酯脱氢酶。 以后 F.Sanger 又测定了 DNA 核苷酸顺序，因而他第二次（1980 年 62 岁）获得了诺贝 尔奖（同美国人伯格、 吉尔伯特共享）。两次获得诺贝尔奖的化学家是很少见的，所以说， F.Sanger 是一个伟大的化学家。 三、多肽的合成 要使各种氨基酸按一定的顺序连接起来形成多肽是一项十分复杂的化学工程，需要解 决许多难题，最主要的是要解决四大问题。 1．保护-NH2 或-COOH 氨基酸是多官能团化合物，在按要求形成肽键时，必须将两个官能团中的一个保护起来， 留下一个去进行指定的反应，才能达到合成的目的。 对保护基的要求是：易引入，之后又易除去。 我们把保护-NH2 称为代帽子，保护羧基称为穿靴子。 2．活化反应基团（活化-NH2 或-COOH） 通常是保护-NH2 及-OH、-SH 等，活化-COOH（具体方法-略） 3．生物活性 合成多肽必须保证氨基酸的排列顺序与天然多肽相同，并与天然多肽不论在物理、化 学性质和生物活力各方面都一样，才具有意义。 我国 1965 年 6 月发表合成成功牛胰岛素的文章，生物活性 1.2~70% 西德.7 月.羊.，.0.5~10% 美国 1967 年发表文章 （胰岛素合成方法的改进） 前苏联 1972 年发表文章 （胰岛素合成方法的改进） 胰岛素是一种激素，可用于治疗糖尿病，但只能用和人体结构相近的胰岛素，如猪胰 岛素，其它的则不起疗效

19~3蛋白质分子量在1000以上，构型复杂的多肽称为蛋白质一、蛋白质的分类1．根据蛋白质的形状分为：（1）纤维蛋白质如丝蛋白、角蛋白等；（2）球状蛋白质如蛋清蛋白、酪蛋白、血红蛋白、Y-球代表蛋白（感冒抗体）等。2.根据组成分：（1）单纯蛋白质-一一其水解最终产物是α-氨基酸。（2）结合蛋白质一一α-氨基酸+非蛋白质（辅基）辅基为糖时称为糖蛋白：辅基为核酸时称为核蛋白：辅基为血红素时称为血红素蛋白等。3.根据蛋白质的功能分；（1）活性蛋白按生理作用不同又可分为：酶、激素、抗体、收缩蛋白、运输蛋白等。（2）非活性蛋白担任生物的保护或支持作用的蛋白，但本身不具有生物活性的物质。例如：贮存蛋白（清蛋白、酪蛋白等），结构蛋白（角蛋白、弹性蛋白胶原等）等等。二、蛋自质的性质1.两性及等电点多肽链中有游离的氨基和羧基等酸碱基团，具有两性。H+H*-COO-COOH-COO-P-IP-P-1+P = ProtinOH-OH-NH3'NH2NH3蛋白质pHpHpI2.胶体性质与沉淀作用蛋白质是大分子化合物，分子颗粒的直径在胶粒幅度之内（0.1~0.001μ）呈胶体性质。蛋白质颗粒表面都带电荷，在酸性溶液中带正电荷，在碱性溶液中带负电荷，达到帮助带有同性电荷就于周围电性相反的的离子构成稳定的双电层。由于同性电荷相斥，颗粒互相隔绝而不粘合，形成稳定的胶体体系。蛋白质与水形成的亲水胶体，也和其它胶体一样不是十分稳定，在各种因素的影响之下，蛋白质容易析出沉淀。（1）可逆沉淀（盐析）H20碱金属盐或铵盐沉淀溶解蛋白质溶液（蛋白质）（2）不可逆沉淀蛋白质与重金属盐作用，或在蛋白质溶液中加入有机溶剂（如丙酮、乙醇等）则发生不可逆沉淀。如70-75%的酒精可破坏细菌的水化膜，使细菌发生沉淀和变性，从而起到消毒的作用。3.蛋白质的变性作用蛋白质在一定条件下，共价键不变，但构象发生变化而丧失生物活性的过程成为蛋白质的变性作用。变性条件：7

7 19~3 蛋 白 质 分子量在 1000 以上，构型复杂的多肽称为蛋白质 一、蛋白质的分类 1． 根据蛋白质的形状分为： （1）纤维蛋白质 如丝蛋白、角蛋白等； （2）球状蛋白质 如蛋清蛋白、酪蛋白、血红蛋白、γ-球代表蛋白（感冒抗体）等。 2．根据组成分： （1） 单纯蛋白质——其水解最终产物是α- 氨基酸。 （2） 结合蛋白质——α- 氨基酸 + 非蛋白质（辅基） 辅基为糖时称为糖蛋白；辅基为核酸时称为核蛋白；辅基为血红素时称为血红素蛋白 等。 3． 根据蛋白质的功能分； （1） 活性蛋白 按生理作用不同又可分为；酶、激素、抗体、收缩蛋白、运输蛋白等。 （2）非活性蛋白 担任生物的保护或支持作用的蛋白，但本身不具有生物活性的物质。例 如：贮存蛋白（清蛋白、酪蛋白等），结构蛋白（角蛋白、弹性蛋白胶原等）等等。 二、蛋白质的性质 1．两性及等电点 多肽链中有游离的氨基和羧基等酸碱基团，具有两性。 P COO NH2 H OH P COO NH3 P COOH NH3 H P = Protin OH pH >pI pH pH < pI 蛋白质 2．胶体性质与沉淀作用 蛋白质是大分子化合物，分子颗粒的直径在胶粒幅度之内（0.1~0.001μ）呈胶体性质。 蛋白质颗粒表面都带电荷，在酸性溶液中带正电荷，在碱性溶液中带负电荷，达到帮助带有 同性电荷就于周围电性相反的的离子构成稳定的双电层。由于同性电荷相斥，颗粒互相隔绝 而不粘合，形成稳定的胶体体系。 蛋白质与水形成的亲水胶体，也和其它胶体一样不是十分稳定，在各种因素的影响之 下，蛋白质容易析出沉淀。 （1）可逆沉淀（盐析） 蛋白质溶液 碱金属盐或铵盐 沉淀 溶解 （蛋白质） H2O （2）不可逆沉淀 蛋白质与重金属盐作用，或在蛋白质溶液中加入有机溶剂（如丙酮、乙醇等）则发生 不可逆沉淀。如 70-75%的酒精可破坏细菌的水化膜，使细菌发生沉淀和变性，从而起到消 毒的作用。 3．蛋白质的变性作用 蛋白质在一定条件下，共价键不变，但构象发生变化而丧失生物活性的过程成为蛋白 质的变性作用。 变性条件：

物理因素：干燥、加热、高压、振荡或搅拌、紫外线、X射线、超声等等。化学因素：强酸、强碱、尿素、重金属盐、生物碱试剂（三氯乙酸、乙醇等等）。变性后的特点：①丧失生物活性『二、三级结构的结合力遭破坏②溶解度降低③易被水解（对水解酶的抵抗力减弱）。变性作用的利用：①消毒、杀菌、点豆腐等；②排毒（重金属盐中毒的急救）；③肿瘤的治疗（放疗杀死癌细胞）；变性作用的防治：①种子的贮存：②人体衰老（缓慢变性）；③防止紫外光灼伤皮肤。4.蛋白质的颜色反应（1）缩二脲反应蛋白质与新配置的碱性硫酸铜溶液反应，呈紫色，称为缩二脲反应。（2）蛋白黄反应蛋白质中含有苯环的氨基酸，遇浓硝酸发生硝化反应而生成黄色硝基化合物的反应称为蛋白黄反应。（3）米勒反应蛋白质中酪氨酸的酚基遇到硝酸汞的硝酸溶液（4）三酮反应蛋白质与稀的三酮溶液共热，即呈现蓝色。三、蛋白质的结构各种蛋白质的特定结构，决定了各种蛋白质的特定生理功能。蛋白质种类繁多，结构极其复杂。通过长期研究确定，蛋白质的结构可分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。1.蛋白质的一级结构由各氨基酸按一定的排列顺序结合而形成的多肽链（50个以上氨基酸）称为蛋白质的一级结构。对某一蛋白质，若结构顺序发生改变，则可引起疾病或死亡。例如，血红蛋白是由两条A-肽链（各为141肽）和两条β-肽链（各为146肽）四条肽链（共574肽）组成的在β链，N-6为谷氨酸，若换为缬氨酸，则造成红血球附聚，即由球状变成镶刀状，若得了这种病（镰刀形贫血症）不到十年就会死亡。2.蛋白质的二级结构多肽链中互相靠近的氨基酸通过氢键的作用而形成的多肽在空间排列（构象）称为蛋白质的二级结构。蛋白质的二级结构主要有三中形式：。1°α-螺旋——右螺旋P629。肽链的构象（二级结构）见P631图20-72°β-折叠和β-转角P630。3°无规则卷曲一一没有确定规律性。3.蛋白质的三级结构由蛋白质的二级结构在空间盘绕、折叠、卷曲而形成的更为复杂的空间构象称为蛋白质的三级结构。维持三级结构的作用力有：共价键（-S-S-）静电键（盐键）总称为副键氢键8

8 物理因素： 干燥、加热、高压、振荡或搅拌、紫外线、X 射线、超声等等。 化学因素： 强酸、强碱、尿素、重金属盐、生物碱试剂（三氯乙酸、乙醇等等）。 变性后的特点： ① 丧失生物活性 ② 溶解度降低 ③ 易被水解（对水解酶的抵抗力减弱）。 变性作用的利用：① 消毒、杀菌、点豆腐等； ② 排毒（重金属盐中毒的急救）； ③ 肿瘤的治疗（放疗杀死癌细胞）； 变性作用的防治：① 种子的贮存； ② 人体衰老（缓慢变性）； ③ 防止紫外光灼伤皮肤。 4．蛋白质的颜色反应 （1）缩二脲反应 蛋白质与新配置的碱性硫酸铜溶液反应，呈紫色，称为缩二脲反 应。 （2）蛋白黄反应 蛋白质中含有苯环的氨基酸，遇浓硝酸发生硝化反应而生成黄色硝 基化合物的反应称为蛋白黄反应。 （3）米勒反应 蛋白质中酪氨酸的酚基遇到硝酸汞的硝酸溶液 （4）茚三酮反应 蛋白质与稀的茚三酮溶液共热，即呈现蓝色。 三、 蛋白质的结构 各种蛋白质的特定结构，决定了各种蛋白质的特定生理功能。蛋白质种类繁多，结构极 其复杂。通过长期研究确定，蛋白质的结构可分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结 构。 1．蛋白质的一级结构 由各氨基酸按一定的排列顺序结合而形成的多肽链（50 个以上氨基酸）称为蛋白质的 一级结构。 对某一蛋白质，若结构顺序发生改变，则可引起疾病或死亡。例如，血红蛋白是由两条 α-肽链（各为 141 肽）和两条β-肽链（各为 146 肽）四条肽链（共 574 肽）组成的。 在β链，N-6 为谷氨酸，若换为缬氨酸，则造成红血球附聚，即由球状变成镰刀状，若 得了这种病（镰刀形贫血症）不到十年就会死亡。 2．蛋白质的二级结构 多肽链中互相靠近的氨基酸通过氢键的作用而形成的多肽在空间排列（构象）称为蛋白 质的二级结构。 蛋白质的二级结构主要有三中形式；° 1°α-螺旋——右螺旋 P629。 2°β-折叠和β-转角 P630。 肽链的构象（二级结构）见 P631 图 20-7 3°无规则卷曲——没有确定规律性。 3．蛋白质的三级结构 由蛋白质的二级结构在空间盘绕、折叠、卷曲而形成的更为复杂的空间构象称为蛋白质 的三级结构。 维持三级结构的作用力有：共价键（-S-S-） 静电键（盐键） 氢键 总称为副键 二、三级结构的结合力遭破坏

增水基（烃基等）形成三级结构后，亲水基团在结构外，憎水基团在结构内，故球状蛋白溶于水。4.蛋白质的四级结构由一条或几条多肽链构成蛋白质的最小单位称为蛋白质亚基，由几个亚基借助各种副键的作用而构成的一定空间结构称为蛋白质的四级结构。19.4核酸简介核酸是控制生物遗传和支配蛋白质合成的模型。没有核酸，就没有蛋白质。因此，核酸是最根本的生命的物质基础。对核酸的研究是现代科学研究领域最吸引人的课题。、核酸的组成蛋白质核蛋白磷酸S胰酶肠酶碱基核酸核苷酸核苷核糖（脱氧核糖）核酸和蛋白质一样，是由许多核苷酸结合而成的高分子化合物。核苷酸是由磷酸、核糖、及碱基组成的。1.核糖和2-脱氧核糖CHOCHOCH,OHCH2OHOHH--OHH--OHOH0HOHH-OHHH/IHHH-OHH--OHOH HCH2OHCH2OHOH OHβ-D-2-脱氧呋喃核糖β-D-喃核糖2.碱基核苷酸中的碱基主要有五种，都是嘧啶或嘌呤的衍生物。它们是：胞嘧啶，脲嘧啶，胸腺嘧啶，腺嘌呤，鸟嘌呤。其结构式见P639：cUTAG3.核苷核苷是核糖的β-苷羟基与碱基氮原子上的氢脱水而形成的苷，根据核糖的不同，核苷有两类：（1）核苷（由RNA水解而得）核糖核苷核苷名称碱基CH,OH脲嘧啶核苷【脲苷（U）】B= UCH2OHOH2O、BA腺嘌呤核苷腺苷（A）]HHc胞嘧啶核苷【胞苷（C）]GOH OHOH OH鸟嘌岭核苷|鸟苷（G）)（2）2-脱氧核苷（由DAN水解而得）9

9 憎水基（烃基等） 形成三级结构后，亲水基团在结构外，憎水基团在结构内，故球状蛋白溶于水。 4．蛋白质的四级结构 由一条或几条多肽链构成蛋白质的最小单位称为蛋白质亚基，由几个亚基借助各种副键 的作用而构成的一定空间结构称为蛋白质的四级结构。 19.4 核 酸 简 介 核酸是控制生物遗传和支配蛋白质合成的模型。没有核酸，就没有蛋白质。因此，核 酸是最根本的生命的物质基础。对核酸的研究是现代科学研究领域最吸引人的课题。 一、核酸的组成 核蛋白 蛋白质 核酸 胰酶 核苷酸 肠酶 核苷 碱基 核糖 （脱氧核糖） 磷酸 核酸和蛋白质一样，是由许多核苷酸结合而成的高分子化合物。核苷酸是由磷酸、核 糖、及碱基组成的。 1． 核糖和 2-脱氧核糖 β H CHO OH H OH CH2OH H OH H CHO OH H OH CH2OH H OH O CH2OH H OH H H OH O CH2OH H OH H OH OH D 呋喃核糖 β D 2 脱氧呋喃核糖 2．碱基 核苷酸中的碱基主要有五种，都是嘧啶或嘌呤的衍生物。它们是： 胞嘧啶，脲嘧啶，胸腺嘧啶，腺嘌呤，鸟嘌呤。其结构式见 P639： C U T A G 3．核苷 核苷是核糖的β-苷羟基与碱基氮原子上的氢脱水而形成的苷，根据核糖的不同，核苷 有两类： （1）核苷——（由 RNA 水解而得） O CH2OH H OH H OH OH O CH2OH H OH H OH B B = U A C G 脲嘧啶核苷 脲苷（ ） 腺嘌呤核苷 腺苷（ ） 胞嘧啶核苷 胞苷（ ） 鸟嘌呤核苷 鸟苷（ ） U A C G 核 糖 核 苷 碱 基 核 苷 名 称 （2） 2-脱氧核苷——（由 DAN 水解而得）

2-脱氧核糖核苷碱基核苷名称CH,OHCH,OH2-脱氧胸腺苷（dT）B= TOHBL0.0A2-脱氧腺苷（dA）HH/HHc2-脱氧胞苷（dC)GOH HOH H2-脱氧鸟苷（dG)4.核苷酸核糖Cs上的羟基与磷酸酯化便得到核苷酸。0011HO-P-O-CH2HO-P-O-CH2B.0.0.OHOHHHMHOH OHOH HRNA中的核苷酸单体DNA中的核苷酸单体二、核酸的结构核酸是核苷酸单体中核糖的3位羟基和5位上的磷酸基酯化而成的高分子化合物。核酸和蛋白质一样，也有单体排列顺序和空间关系问题，因此，核酸也有一级结构、二级结构和三级结构的问题。1.核酸一级结构核苷酸的顺序组成了核酸的一级结构。RNA中的多核苷酸链如下图：NH21N-oN5'°端腺苷酸AO=P-0-CH20NNHOHHNH2H-N胞苷酸CCOHO=F0-CH20NHOHHou-KN.OH0NH鸟苷酸G1O=P-0CH20ANH2OHHHouH上QOHNH脲苷酸UO=P0CHOOHHHOH3端RNA或DNA中的多核苷酸链，都按上图方式表示，显然太繁复了，所以现在都用简化了的示意法来表示。如上图可简化如下：ACGUR3RN22FOHFOHFOHFOHH卡33neRNA链简化图DNA链简化图10

10 2 脱氧核糖 O CH2OH H OH H H OH O CH2OH H OH H H B B = T A C G dT 核 苷 碱 基 核 苷 名 称 2 脱氧胸腺苷 dA dC dG （ ） （ ） （ ） 2 脱氧鸟苷（ ） 2 脱氧胞苷 2 脱氧腺苷 4．核苷酸 核糖 C5 上的羟基与磷酸酯化便得到核苷酸。 中的核苷酸单体 O CH2 H OH H H B P O OH O HO O CH2 H OH H OH B P O OH O HO RNA DNA 中的核苷酸单体 二、核酸的结构 核酸是核苷酸单体中核糖的 3ˊ位羟基和 5ˊ位上的磷酸基酯化而成的高分子化合物。 核酸和蛋白质一样，也有单体排列顺序和空间关系问题，因此，核酸也有一级结构、 二级结构和三级结构的问题。 1．核酸一级结构 核苷酸的顺序组成了核酸的一级结构。RNA 中的多核苷酸链如下图： CH2 H H OH H H O CH2 H H OH H H O CH2 H H OH H H O CH2 H H OH H H O O P O O OH ~ O P O O OH O P O O OH O P O O OH ~ N N N N NH2 N N NH2 O NH N N N O NH2 NH N O O 5' 3' 端 端 腺苷酸 胞苷酸 鸟苷酸 脲苷酸 A C G U RNA 或 DNA 中的多核苷酸链，都按上图方式表示，显然太繁复了，所以现在都用简 化了的示意法来表示。如上图可简化如下： P P OH P OH P OH P OH A C G U 5' 3' 2' 5' 3' P P H P H P H P H 5' 3' 2' 5' 3' R1 R2 R3 R4 RNA 链简化图 DNA 链简化图