华南师范大学:《植物生理学》课程教学资源(实验指导)实验3 植物细胞水势

实验3植物细胞水势(或渗透势)的测定(质壁分离法)一、目的学会用质壁分离法测量植物细胞水势。二、材料用具及仪器药品大红花、洋葱、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、移液管(10ml)2支、培养皿、蔗糖溶液(1mol/L)三、原理植物细胞是一个渗透系统,若将植物细胞放在各种不同浓度的蔗糖溶液中时,由于细胞液的浓度与外界溶液的浓度(或水势)的差异。两者便会发生水分的交换。当细胞液的浓度高于外溶液的浓度(或者说Φ:cell中:sl即cell>sl)时,细胞液中的水分则往外渗透,严重时则引起质壁分离;当细胞液的浓度与外界溶液的浓度相等时,(或者说中ce=中,即,=,a),细胞内外水分交换处于动态平衡。此时细胞既不紧张也不引起质壁分离,这时外溶液的浓度即为等渗浓度(即细胞内外,或中,相等的浓度)。本实验是以细胞的初始质壁分离(即一视野中有半数细胞产生初始质壁分离)确定为等渗浓度。根据公式,即可计算出外溶液的。,即中,=一CiRT[i:离解系数,蔗糖等于1c:等渗浓度:R:气体常数,0.0083MPa·L/mo1·K:T表示绝对温度,即273+t(实验时溶液的温度)]。因为Φ,sol=Φ,sol,又因为细胞初始质壁分离时,Φ,cell=0,即Φ,celi=Φscell,所以Φ,cell(或,cell)=Φsol(或Φssol).四、方法步骤1.按十字交叉法把1mo1/L蔗糖溶液(母液)分别配成0.1、0.2、0.3、0.5、0.6mo1/L煎糖溶液各10ml。置于培养血中,摇匀加盖。2:撕取带有色素的植物组织(如花瓣、洋葱鳞片等)表皮,分别投入各种浓度的煎糖液中,(每浓度约放5片),使其完全浸入。3.20分钟之后依次取出表皮放在载玻片上,滴上同样浓度的溶液1滴,盖上盖玻片,在显微镜下观察细胞产生质壁分离的情况,确定等渗浓度C。4.测量液温5.根据公式中,=-CiRT,计算出所测材料的,()五、实验报告试比较洋葱和大红花花瓣水势的高低
实验 3 植物细胞水势(或渗透势)的测定 (质壁分离法) 一、目的 学会用质壁分离法测量植物细胞水势。 二、材料用具及仪器药品 大红花、洋葱、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、移液管(10ml)2 支、培养 皿、蔗糖溶液(1mol/L) 三、原理 植物细胞是一个渗透系统,若将植物细胞放在各种不同浓度的蔗糖溶液中时,由于细 胞液的浓度与外界溶液的浓度(或水势)的差异。两者便会发生水分的交换。当细胞液的浓 度高于外溶液的浓度(或者说ψs cellψs sol 即ψw cell>ψw sol)时,细胞液中的水分则往外渗透,严重时则引起质壁分离;当细胞液的浓度与外界溶液 的浓度相等时,(或者说 ψs cell= ψs sol 即ψw cell=ψw sol).细胞内外水分交换处于动态平衡。 此时细胞既不紧张也不引起质壁分离,这时外溶液的浓度即为等渗浓度(即细胞内外ψs 或 ψw 相等的浓度)。本实验是以细胞的初始质壁分离(即一视野中有半数细胞产生初始质壁分 离)确定为等渗浓度。根据公式,即可计算出外溶液的ψs ,即ψs= - CiRT[i:离解系数, 蔗糖等于 1;c:等渗浓度;R:气体常数,0.0083 MPa·L/mol·K;T 表示绝对温度,即 273+t (实验时溶液的温度)]。因为 ψs sol=ψw sol,又因为细胞初始质壁分离时,ψp cell=0,即 ψw cell= ψs cell,所以 ψw cell(或ψs cell)= ψw sol( 或ψs sol). 四、方法步骤 1.按十字交叉法把 1mol/L 蔗糖溶液(母液)分别配成 0.1、0.2、0.3、0.5、0.6 mol/L 蔗糖溶液各 10ml。置于培养皿中,摇匀加盖。 2.撕取带有色素的植物组织(如花瓣、洋葱鳞片等)表皮,分别投入各种浓度的蔗 糖液中,(每浓度约放 5 片),使其完全浸入。 3.20 分钟之后依次取出表皮放在载玻片上,滴上同样浓度的溶液 1 滴,盖上盖玻片, 在显微镜下观察细胞产生质壁分离的情况,确定等渗浓度 C。 4.测量液温 5.根据公式ψs=-CiRT,计算出所测材料的ψw (ψs). 五、实验报告 试比较洋葱和大红花花瓣水势的高低
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