华南师范大学：《植物生理学》课程教学资源（实验指导）实验19 植物呼吸速率的测定

实验19植物呼吸速率的测定（小笼框法）一、目的学会用小笼框法测定植物的呼吸速率。二、材料用具及仪器药品(1）0.05mo1/LBa(OH)2溶液一一称取15.76g纯Ba(OH)，·8H0溶于冷开水稀释至1000ml即成。(2）0.05mo1/L（CO0H)2滴定液—一称取（C00H)2·2H206.3025克溶于蒸馏水中，稀释至1000ml即成。2.2"为1ml0.05mo1/L草酸相当于C0z的毫克数，该数字可以从下列反应式推算出来Ba (OH)2+CO2-BaCO ↓ +H2044从上面反应式可知：作用于1摩尔的Ba(OH)2要用去的g的CO2。上用相当，用的的Ba（)就相当于2.2gC02。因此，1ml0.05mo1/LBa（OH)2则相当于2.2mgC0z，因此1ml0.05mo1/L(COOH)，相当于2.2mgCO2。（3）广口瓶、橡皮塞子、恒温箱、镊子、小笼框、酸滴定管、碱定管、漏斗。（4）1%酚。三、原理在一密封的容器里，其空气中原来CO2之含量。用Ba(OH)2溶液将其吸收，然后用草酸进行滴定，即可计算出来。Ba (OH)2+CO2-BaCO,+H20若将待测定种子装入在该密封的容器里，由于进行呼吸作用放出的CO2为Ba（OH)2溶液所吸收（从溶液中产生白色BaCO沉淀可以看出）。然后用草酸进行滴定。根据两次（实验和空白）滴定用去草酸量之差数，即可计算出在测定时间内呼吸作用所吸收CO的量。从而计算出所测种子的呼吸速率。四、方法取干净的300ml广口瓶两个，并准备四个橡皮塞子如下：橡皮塞子（1）二个（公用，两孔，一孔倒插一端拉成毛细管状的玻璃管。另一孔插入玻璃棒）。橡皮塞子（2）二个（无孔，塞底钉入大头针，弯曲）。此时，还准备两个铁钞小笼框。实验开始前，打开广口瓶瓶塞，顺瓶口方向摇瓶子多次，使瓶内空气与室内空气一致。分别在一个小笼框内装入待测的材料（萌发的或没有萌发的水稻种子等），装入量以不高于小笼框高度易于流通气体为宜（萌发的水稻或小麦种子可装入100粒）。装好后把小笼框挂在橡皮塞子（2）的大头针上。实验开始时，以橡皮塞子（1）紧塞广口瓶口，拨去塞子上的玻璃棒，立即用大姆指堵住孔口，迅速插入滴定管，滴入20ml0.05mo1/LBa（OH)2溶液，然后拨出橡皮塞子（1）把挂有待测材料的橡皮塞子（2）迅速塞紧。同样，在另一广口瓶加入同量的0.05mo1/LBa(OH)2溶液，只是小笼框中不放实验材料，作空白实验用。一切装置好后，立即把两瓶移放入30℃的恒温箱内（如作不同温度条件对呼吸速率影响比较试验：可将待测材料放于20℃以下，25℃以上等不同温度条件中），准确记录时间，不时摇动广口瓶（不能用力太锰，以免小笼框掉下或碱液沾到小笼框上）

实验 19 植物呼吸速率的测定（小笼框法） 一、目的 学会用小笼框法测定植物的呼吸速率。 二、材料用具及仪器药品 (1) 0.05mol/L Ba(OH)2 溶液——称取 15.76g 纯 Ba(OH)2·8H2O 溶于冷开水稀释至 1000ml 即成。 (2) 0.05mol/L (COOH)2 滴定液——称取(COOH)2·2H20 6.3025 克溶于蒸馏水中，稀释 至 1000ml 即成。 2.2 *为 1ml 0.05mol/L 草酸相当于 CO2 的毫克数，该数字可以从下列反应式推算出来 Ba(OH)2+CO2→BaCO3↓+H2O 从上面反应式可知：作用于 1 摩尔的 Ba(OH)2 要用去的 g 的 CO2。 若 1000ml 0.5mol/L Ba(OH)2 相当于 22gCO2，那么 1000ml 0.05mol/L Ba(OH)2 就相当于 2.2g CO2。因此，1ml 0.05mol/L Ba(OH)2 则相当于 2.2mgCO2，因此 1ml 0.05mol/L (COOH)2 相当于 2.2mg CO2。 （3）广口瓶、橡皮塞子、恒温箱、镊子、小笼框、酸滴定管、碱定管、漏斗。 （4）1%酚酞。 三、原理 在一密封的容器里，其空气中原来 CO2 之含量。用 Ba(OH)2 溶液将其吸收，然后用草酸 进行滴定，即可计算出来。 Ba(OH)2+CO2→BaCO3+H2O 若将待测定种子装入在该密封的容器里，由于进行呼吸作用放出的 CO2 为 Ba(OH)2 溶液 所吸收（从溶液中产生白色 BaCO3 沉淀可以看出）。然后用草酸进行滴定。 根据两次（实验和空白）滴定用去草酸量之差数，即可计算出在测定时间内呼吸作用所 吸收 CO2 的量。从而计算出所测种子的呼吸速率。 四、方法 取干净的 300ml 广口瓶两个，并准备四个橡皮塞子如下：橡皮塞子（1）二个（公用， 两孔，一孔倒插一端拉成毛细管状的玻璃管。另一孔插入玻璃棒）。橡皮塞子（2）二个（无 孔，塞底钉入大头针，弯曲）。此时，还准备两个铁钞小笼框。 实验开始前，打开广口瓶瓶塞，顺瓶口方向摇瓶子多次，使瓶内空气与室内空气一致。 分别在一个小笼框内装入待测的材料（萌发的或没有萌发的水稻种子等），装入量以不 高于小笼框高度易于流通气体为宜（萌发的水稻或小麦种子可装入 100 粒）。装好后把小笼 框挂在橡皮塞子（2）的大头针上。 实验开始时，以橡皮塞子（1）紧塞广口瓶口，拨去塞子上的玻璃棒，立即用大姆指堵 住孔口，迅速插入滴定管，滴入 20ml 0.05mol/L Ba(OH)2 溶液，然后拨出橡皮塞子（1）， 把挂有待测材料的橡皮塞子（2）迅速塞紧。同样，在另一广口瓶加入同量的 0.05mol/L Ba(OH)2 溶液，只是小笼框中不放实验材料，作空白实验用。 一切装置好后，立即把两瓶移放入 30℃的恒温箱内（如作不同温度条件对呼吸速率影 响比较试验：可将待测材料放于 20℃以下，25℃以上等不同温度条件中），准确记录时间， 不时摇动广口瓶（不能用力太锰， 以免小笼框掉下或碱液沾到小笼框上）。 2 44

经30分钟后，将广口瓶子取出，拔去塞子和小笼框，迅速换上橡皮塞子（1），塞紧瓶口。如供测定的材料为萌发种子，可不必烘干，只计算其鲜重，否则应将材料烘干，称其干重。在进行滴定之前，拔去塞子上的玻璃，迅速加入1%酚酰4滴，并插入滴定管，用0.05mo1/L草酸进行滴定，记下滴定时两瓶用去草酸的量，然后计算供测定材料的呼吸速率。公式如下：呼吸速率（mgCOz·g"FW·h=【空白滴定用草酸量（毫升）一呼吸滴定用草酸量（毫升）1×2.2°供测材料克鲜重（或克干重）×呼吸时间（h）五、实验报告计算所测材料的呼吸速率。六、思考题1、实验期间，为什么要不时地摇动广口瓶？2、本实验为什么要塞紧广口瓶的盖子？

经 30 分钟后，将广口瓶子取出，拔去塞子和小笼框，迅速换上橡皮塞子（1），塞紧瓶 口。 如供测定的材料为萌发种子，可不必烘干，只计算其鲜重，否则应将材料烘干，称其 干重。 在进行滴定之前，拔去塞子上的玻璃，迅速加入 1%酚酞 4 滴，并插入滴定管，用 0.05mol/L 草酸进行滴定，记下滴定时两瓶用去草酸的量，然后计算供测定材料的呼吸速率。 公式如下： 呼吸速率（mgCO2·g -1 FW·h -1 = [空白滴定用草酸量（毫升）—呼吸滴定用草酸量（毫升）]×2.2 * 供测材料克鲜重（或克干重）× 呼吸时间（h） 五、实验报告 计算所测材料的呼吸速率。 六、思考题 1、实验期间，为什么要不时地摇动广口瓶？ 2、本实验为什么要塞紧广口瓶的盖子？