华南师范大学：《植物生理学》课程教学资源（实验指导）实验17 粗脂肪的定量测定

实验17粗脂肪的定量测定（油重法）一、目的学会植物组织中粗脂肪含量的测定方法。二、材料用具及仪器药品花生种子、大豆种子、索氏脂肪抽提器、电热恒温水浴锅、电吹风、滤纸、称量瓶、电子天平、20～40目筛、小粉碎机、无水乙醚（A.R.）：三、原理脂肪不溶于水，易溶于有机溶剂，用乙醚或石油醚可将脂肪类物质提取出来。提取物中除脂肪外，还有游离脂肪酸、石蜡、磷酯、固醇、色素、有机酸等物质，总称“粗脂肪”粗脂肪的定量分析常用油重法。四、实验步骤1.样品制备：含油种子去壳去杂，在105℃烘箱烘干1小时，用磨碎机粉碎，过20或40目筛，装瓶备用。2.将洗净的索氏抽提器小烧瓶编号，置105℃烘箱中烘2小时，取出，置干燥器内冷却至室温，用天平称重，并记录（W2）。3.精密称取待测样品2g（A)，装入过滤纸筒（或包），在试样面层塞以脱脂棉，以防漏散，将滤纸筒（包）放入提取管内。4.已称重的小烧瓶内，倒入1/2～2/3体积的无水乙醚，联接索氏提取器各部分，在水浴上进行抽提。控制水浴温度70～80℃，以每小时回馏3～5次较宜，一般抽提8～10小时，含油量较高的可适当增加抽提时间。5.抽提完毕，使乙醚完全流入小烧瓶时，取出滤纸筒（包），再回馏一次以洗涤抽提管。继续蒸馏，待抽提管内乙醚液面接近虹吸管上端而未流入小烧瓶前，倒出抽提管中乙醚。如此进行数次，直至小烧瓶中乙醚基本蒸尽，取下小烧瓶，用吹风机使残留的乙醚全部挥发。6.将装有脂肪的小烧瓶置于105℃烘箱中烘1小时，取出置干燥器中冷至室温，称重。再烘半小时，取出冷却，再称重，直至恒重（W）：根据小烧瓶增加之重量，即可计算出样品的粗脂肪含量。W.-Wz×100粗脂肪%=A式中W，为烧瓶和脂肪的重量：W2为烧瓶重量，A为样品重量。注意事项：带壳油料种子粗脂肪%=子仁粗脂肪%×出仁率%五、实验报告计算所测材料中的粗脂肪含量。六、思考题哪些种子的粗脂肪含量较高？

实验 17 粗脂肪的定量测定（油重法） 一、目的 学会植物组织中粗脂肪含量的测定方法。 二、材料用具及仪器药品 花生种子、大豆种子、索氏脂肪抽提器、电热恒温水浴锅、电吹风、滤纸、称量瓶、 电子天平、20～40 目筛、小粉碎机、无水乙醚（A.R.）. 三、原理 脂肪不溶于水，易溶于有机溶剂，用乙醚或石油醚可将脂肪类物质提取出来。提取物 中除脂肪外，还有游离脂肪酸、石蜡、磷酯、固醇、色素、有机酸等物质，总称“粗脂肪”， 粗脂肪的定量分析常用油重法。 四、实验步骤 1．样品制备：含油种子去壳去杂，在 105℃烘箱烘干 1 小时，用磨碎机粉碎，过 20 或 40 目筛，装瓶备用。 2．将洗净的索氏抽提器小烧瓶编号，置 105℃烘箱中烘 2 小时，取出，置干燥器内冷 却至室温，用天平称重，并记录（W2）。 3．精密称取待测样品 2g（A），装入过滤纸筒（或包），在试样面层塞以脱脂棉，以防 漏散，将滤纸筒（包）放入提取管内。 4．已称重的小烧瓶内，倒入 1/2～2/3 体积的无水乙醚，联接索氏提取器各部分 ，在 水浴上进行抽提。控制水浴温度 70～80℃，以每小时回馏 3～5 次较宜，一般抽提 8～10 小 时，含油量较高的可适当增加抽提时间。 5．抽提完毕，使乙醚完全流入小烧瓶时，取出滤纸筒（包），再回馏一次以洗涤抽提 管。继续蒸馏，待抽提管内乙醚液面接近虹吸管上端而未流入小烧瓶前，倒出抽提管中乙醚。 如此进行数次，直至小烧瓶中乙醚基本蒸尽，取下小烧瓶，用吹风机使残留的乙醚全部挥发。 6．将装有脂肪的小烧瓶置于 105℃烘箱中烘 1 小时，取出置干燥器中冷至室温，称重。 再烘半小时，取出冷却，再称重，直至恒重(W1)；根据小烧瓶增加之重量，即可计算出样品 的粗脂肪含量。 粗脂肪%= 100 1 2  − A W W 式中 W1 为烧瓶和脂肪的重量；W2 为烧瓶重量，A 为样品重量。 注意事项： 带壳油料种子粗脂肪%=子仁粗脂肪%×出仁率% 五、实验报告 计算所测材料中的粗脂肪含量。 六、思考题 哪些种子的粗脂肪含量较高？