《食品微生物学》课程教学课件（PPT讲稿）实验六 细菌生理生化实验

实验七细菌的生理生化实验一、实验目的1.巩固微生物无菌接种技术；2.了解细菌鉴定中常用的生理生化反应原理3.掌握测定细菌生理生化特征的技术和方法

实验七 细菌的生理生化实验 一、实验目的 1.巩固微生物无菌接种技术； 2.了解细菌鉴定中常用的生理生化反应原理。 3.掌握测定细菌生理生化特征的技术和方法

二、实验原理各种微生物在代谢类型上有很大差异不同细菌分解、利用糖类、脂肪、蛋白质的能力不同，所以其发酵的类型和产物也不同

二、实验原理 各种微生物在代谢类型上有很大差异。 不同细菌分解、利用糖类、脂肪、蛋白质 的能力不同，所以其发酵的类型和产物也 不同

三、实验材料菌种：大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌培养基：葡萄糖蛋白陈水培养基（20支试管）蛋白陈水培养基葡萄糖乳糖糖发酵培养基蔗糖

三、实验材料 菌种：大肠杆菌、产气肠杆菌、 普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌。 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基（20支试管） 蛋白胨水培养基 葡萄糖 糖发酵培养基 乳糖 蔗糖

四、实验内容糖发酵实验甲基红实验（M.R实验）V.P实验哚实验

四、实验内容 糖发酵实验 甲基红实验（M.R实验） V.P实验 吲哚实验

糖发酵实验原理：X丙酮酸裂解生成乙酰CoA与甲酸，甲酸在酸性条件X下在甲酸氢解酶作用下可进一步裂解生成H,和CO2—产酸产气*缺少甲酸氢解酶一一产酸不产气步骤：配制糖发酵培养基一一接种一一培养（约X24h)一一观察结果*结果：紫色无气泡，既不产酸也不产气用-表示：心黄色无气泡，产酸不产气，用+表示：黄色且有气泡，产酸产气，用0表示

糖发酵实验 ❖ 原理： ❖丙酮酸裂解生成乙酰CoA与甲酸，甲酸在酸性条件 下在甲酸氢解酶作用下可进一步裂解生成H2和 CO2——产酸产气 ❖缺少甲酸氢解酶——产酸不产气 ❖ 步骤：配制糖发酵培养基——接种——培养（约 24h)——观察结果 ❖ 结果： ❖ 紫色无气泡，既不产酸也不产气用- 表示； ❖ 黄色无气泡，产酸不产气，用 + 表示； ❖ 黄色且有气泡，产酸产气，用 0 表示

（M.R实验）甲基红实验原理X微生物进行混合酸发酵，产生各种有机酸一一pH下降一X一加入指示剂甲基红一一红色步骤：配制蛋白陈水培养基一一接种一一培养（约24h）一—加入指示剂甲基红1～2滴—一观察结果结果：X红色一一M.R实验阳性，用+表示；不变色一一M.R实验阴性，，用-表示；

甲基红实验（M.R实验） ❖原理 ❖微生物进行混合酸发酵，产生各种有机酸——pH下降— —加入指示剂甲基红——红色 ❖ 步骤：配制蛋白胨水培养基——接种——培养（约24h) — —加入指示剂甲基红1～2滴——观察结果 ❖ 结果： ❖ 红色——M.R实验阳性，用 + 表示； ❖ 不变色——M.R实验阴性，用 - 表示；

V.P实验步骤：配制蛋白陈水培养基一一接种一一培养（约X24h)5~10d 40%K0H, 5 ~10d 5%a-奈酚和少量肌醇，取出塞子，用力震荡，保温（37度15~30min）一一观察结果*结果：红色一一V.P实验阳性，用 + 表示X不变色一一V.P实验阴性，用 - 表示。?

V.P实验 ❖ 步骤：配制蛋白胨水培养基——接种——培养（约 24h) ——5～10d 40%KOH, 5～10d 5%a- 奈酚和少量肌醇，取出塞子，用力震荡，保温 （37度15～30min）——观察结果 ❖ 结果： ❖ 红色——V.P实验阳性，用 + 表示； ❖ 不变色——V.P实验阴性，用 - 表示

吲哚实验蛋白陈水培养基→标记一→接种一培养一加入乙醚一振荡一静置一加哚试剂一观察颜色变化一记录

吲哚实验 蛋白胨水培养基→标记→接种→培养→加 入乙醚→振荡→静置→加吲哚试剂→观察颜 色变化→记录