《食品微生物学》课程教学课件（PPT讲稿）实验五 酵母菌大小测定和显微镜直接计数

实验四酵母菌大小测定及显微镜直接计数一、实验目的1、学习并掌握目镜测微尺的校正方法和测量微生物大小的原理。2、了解血球计数板的构造，掌握利用它进行细胞计数的方法。3、掌握鉴别酵母菌细胞死活的染色方法

实验四 酵母菌大小测定及 显微镜直接计数 一、实验目的 1、学习并掌握目镜测微尺的校正方法和测量微生物大小 的原理。 2、了解血球计数板的构造，掌握利用它进行细胞计数的 方法。 3、掌握鉴别酵母菌细胞死活的染色方法

实验原理二#1、大小测定B

二、实验原理 1、大小测定

2、菌体计数

2、菌体计数

三、实验内容1、接目测微尺的标定(1)取下目镜，装人接目测微尺。(2)将镜台测微尺固定在显微镜的载物台上，有刻度的一面朝上。(3)将低倍镜转入光路，调焦后，转动接目测微尺，使两个测微尺的刻度线相平行。调节镜台测微尺，使接自测微尺的一条刻度与镜台测微尺的一条刻度相重合，再找另一条重合线，分别数出两者的格数，即可计算出接目测微尺每小格所代表的实际长度。例如：若在两重合刻度线之间接自测微尺为50格，镜台测微尺为10格，则此时接日测微尺每小格所代表的实际长度=10格×10μm/50格=2μm。(4)再分别以高倍镜、油镜按上述方法对接目测微尺进行标定

三、实验内容 1、接目测微尺的标定 (1)取下目镜，装人接目测微尺。 (2)将镜台测微尺固定在显微镜的载物台上，有刻度的一面朝 上。 (3)将低倍镜转入光路，调焦后，转动接目测微尺，使两个测 微尺的刻度线相平行。调节镜台测微尺，使接目测微尺的 一条刻度与镜台测微尺的一条刻度相重合，再找另一条重 合线，分别数出两者的格数，即可计算出接目测微尺每小 格所代表的实际长度。例如:若在两重合刻度线之间接目测 微尺为50格，镜台测微尺为10格，则此时接日测微尺每 小格所代表的实际长度=10格×10μm/50格=2μm。 (4)再分别以高倍镜、油镜按上述方法对接目测微尺进行标定

2、酵母细胞大小的测量在载物台上固定好酵母标本，调焦至视野中物像清晰，数出酵母菌细胞在接目测微尺中直径或长和宽各占几格，然后计算其实际大小。为了减少实验误差，应在同一标本片上测量10个以上菌体，取其平均值

2、酵母细胞大小的测量 在载物台上固定好酵母标本，调焦至视野中物像清晰，数出 酵母菌细胞在接目测微尺中直径或长和宽各占几格，然后 计算其实际大小。为了减少实验误差，应在同一标本片上 测量10个以上菌体，取其平均值

3、酵母菌血球计数板镜检计数（1）取一块盖玻片，加盖在血球计数板中央的计数室上方。（2）用滴管吸取菌悬液滴于盖玻片的边缘，通过毛细作用渗入计数室，注意不能有气泡产生，然后放置于载物台，静置5min，使细胞全部沉降到其表面。（3）高倍镜镜检，数对角线上5个中方格中的细胞总数，再计算出菌悬液浓度。为了减少误差，应注意对样品适当稀释，以每个小方格中平均4～6个细胞为佳；另外也可对同一样品进行重复计数，取其平均值

3、酵母菌血球计数板镜检计数 （1）取一块盖玻片，加盖在血球计数板中央的计数室上 方。 （2）用滴管吸取菌悬液滴于盖玻片的边缘，通过毛细作 用渗入计数室，注意不能有气泡产生，然后放置于载物 台，静置5min，使细胞全部沉降到其表面。 （3）高倍镜镜检，数对角线上5个中方格中的细胞总数， 再计算出菌悬液浓度。为了减少误差，应注意对样品适 当稀释，以每个小方格中平均4~6个细胞为佳；另外也 可对同一样品进行重复计数，取其平均值

四、实验结果1、计算目镜测微尺在低、高倍镜下的刻度值。2、记录酵母菌菌体大小的测定值。3、计算样品中酵母菌浓度

四、实验结果 1、计算目镜测微尺在低、高倍镜下的刻度值。 2、记录酵母菌菌体大小的测定值。 3、计算样品中酵母菌浓度