浙江农林大学（浙江林学院）：《食品微生物学》课程教学课件（PPT讲稿）第六章 微生物的生长及其控制 6.1 第一节 微生物纯培养分离及测定生长繁殖的方法

生长与繁殖的概念 生长——微生物细胞吸收营养物质，进行新陈代谢， 当同化作用>异化作用时，生命个体的重量和体积不 断增大的过程。 繁殖——生命个体生长到一定阶段，通过特定方式 产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生 物学过程。 发育——从生长到繁殖，是生物的构造和机能从简 单到复杂、从量变到质变的发展变化过程，这一过 程称为发育。 第一节 微生物纯培养分离及测定生长繁殖的方法

生长与繁殖的概念 生长——微生物细胞吸收营养物质，进行新陈代谢， 当同化作用>异化作用时，生命个体的重量和体积不 断增大的过程。 繁殖——生命个体生长到一定阶段，通过特定方式 产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生 物学过程。 发育——从生长到繁殖，是生物的构造和机能从简 单到复杂、从量变到质变的发展变化过程，这一过 程称为发育。 第一节 微生物纯培养分离及测定生长繁殖的方法

⚫个体生长——微生物细胞个体吸收营养物 质，进行新陈代谢，原生质与细胞组分的 增加为个体生长。 ⚫群体生长——群体中个体数目的增加。可 以用重量、体积、密度或浓度来衡量。 （由于微生物的个体极小，所以常用群体 生长来反映个体生长的状况） 个体生长→个体繁殖→ 群体生长 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖

⚫个体生长——微生物细胞个体吸收营养物 质，进行新陈代谢，原生质与细胞组分的 增加为个体生长。 ⚫群体生长——群体中个体数目的增加。可 以用重量、体积、密度或浓度来衡量。 （由于微生物的个体极小，所以常用群体 生长来反映个体生长的状况） 个体生长→个体繁殖→ 群体生长 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖

⚫纯培养(pure culture)——微生物学中把从 一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖 而得到的后代,称纯培养. 一、获得纯培养的方法 ①液体稀释法 ②平板划线分离法（Streak Plate） ③倾注平板法（Pour Plate） ④平板涂布分离法（Spread Plate） ⑤选择性培养分离法 ⑥单细胞（单孢子）分离法 ⑦膜过滤（Membrane Filter）

⚫纯培养(pure culture)——微生物学中把从 一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖 而得到的后代,称纯培养. 一、获得纯培养的方法 ①液体稀释法 ②平板划线分离法（Streak Plate） ③倾注平板法（Pour Plate） ④平板涂布分离法（Spread Plate） ⑤选择性培养分离法 ⑥单细胞（单孢子）分离法 ⑦膜过滤（Membrane Filter）

首先将待分离的样品进行连续稀释,目的是得到高度 稀释的效果,使一支试管中分配不到一个微生物.如果经 过稀释后的大多数试管中没有微生物生长,那么有微生 物生长的试管得到的培养物可能就是由一个微生物个体 繁殖而来的纯培养物. 这种方法适合于细胞较大的微生物. ①液体 稀释法

首先将待分离的样品进行连续稀释,目的是得到高度 稀释的效果,使一支试管中分配不到一个微生物.如果经 过稀释后的大多数试管中没有微生物生长,那么有微生 物生长的试管得到的培养物可能就是由一个微生物个体 繁殖而来的纯培养物. 这种方法适合于细胞较大的微生物. ①液体 稀释法

②平板划线分离法（Streak Plate） An inoculating loop is used to thin out organisms on the surface of the agar. 特点：快速、方便。 分区划线（适用于浓度较大的样品） 连续划线（适用于浓度较小的样品）

②平板划线分离法（Streak Plate） An inoculating loop is used to thin out organisms on the surface of the agar. 特点：快速、方便。 分区划线（适用于浓度较大的样品） 连续划线（适用于浓度较小的样品）

连续划线 划线分离后平板上显示 的菌落照片

连续划线 划线分离后平板上显示 的菌落照片

③倾注平板法（Pour Plate） Organisms are serially diluted, then a small amount is added to an empty sterile petri dish, to which melted agar at 50 ºC is added. Then mix to distribute the organisms. 1ml 1ml 9ml 1ml 9ml

③倾注平板法（Pour Plate） Organisms are serially diluted, then a small amount is added to an empty sterile petri dish, to which melted agar at 50 ºC is added. Then mix to distribute the organisms. 1ml 1ml 9ml 1ml 9ml

④平板涂布分离法（Spread Plate） Liquid specimen is spread on the surface of solid agar with a sterile bent glass rod. 简单易行，但易造成机械损伤

④平板涂布分离法（Spread Plate） Liquid specimen is spread on the surface of solid agar with a sterile bent glass rod. 简单易行，但易造成机械损伤

⑤选择性培养分离法 为了从混杂的微生物群体中分离出某种微生物， 可以根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长 条件等，采用选择培养的方法进行分离。 ＊利用选择培养基进行直接分离 ＊富集培养

⑤选择性培养分离法 为了从混杂的微生物群体中分离出某种微生物， 可以根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长 条件等，采用选择培养的方法进行分离。 ＊利用选择培养基进行直接分离 ＊富集培养

⑥单细胞（单孢子）分离法 采用显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单 个个体进行培养以获得纯培养的方法。该方法要在显微 镜下进行。 毛细管法：用毛细管提取微生物个体，适合于较大微生 物。 显微操作仪：用显微针、钩、环等挑取单个细胞或孢子 以获得纯培养。 小液滴法：将经过适当稀释后的样品制成小液滴，在显 微镜下选取只含一个细胞的液滴来进行纯培养物的分离

⑥单细胞（单孢子）分离法 采用显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单 个个体进行培养以获得纯培养的方法。该方法要在显微 镜下进行。 毛细管法：用毛细管提取微生物个体，适合于较大微生 物。 显微操作仪：用显微针、钩、环等挑取单个细胞或孢子 以获得纯培养。 小液滴法：将经过适当稀释后的样品制成小液滴，在显 微镜下选取只含一个细胞的液滴来进行纯培养物的分离