福建农林大学：《水产动物疾病学》课程教学课件（PPT讲稿）第六章 水产动物病原的检测技术

第六章 水产动物病原的检测技术 第一节 免疫学检测 第二节 PCR技术 第三节 核酸分子杂交技术

第六章 水产动物病原的检测技术 第一节 免疫学检测 第二节 PCR技术 第三节 核酸分子杂交技术

第一节 免疫学检测 一、Ag-Ab反应的一般规律和特点 二、Ag-Ab反应的影响因素 三、免疫凝集试验 四、免疫沉淀试验 五、与补体相关的试验 六、酶联免疫吸附试验 七、荧光免疫技术

第一节 免疫学检测 一、Ag-Ab反应的一般规律和特点 二、Ag-Ab反应的影响因素 三、免疫凝集试验 四、免疫沉淀试验 五、与补体相关的试验 六、酶联免疫吸附试验 七、荧光免疫技术

一、Ag-Ab反应的一般规律和特点 （一）特异性与交叉性 （二）可逆性 （三） Ag-Ab的结合比例与“带现象” （四）特异性结合与反应可见两个阶段 第一节 免疫学检测

一、Ag-Ab反应的一般规律和特点 （一）特异性与交叉性 （二）可逆性 （三） Ag-Ab的结合比例与“带现象” （四）特异性结合与反应可见两个阶段 第一节 免疫学检测

（三）Ag-Ab的结合比例与“带现象” ⚫ Ag - Ab结合需有适当比例-最适比，形成的结合 物体积大、数量多，出现肉眼可见的反应。即Ag - Ab反应的等价带。 ⚫ 若Ag 或Ab过多，比例不适，不能出现肉眼可见反 应-“带现象”。 ⚫ Ab过剩-前带， Ag 过剩-后带。 第一节 免疫学检测

（三）Ag-Ab的结合比例与“带现象” ⚫ Ag - Ab结合需有适当比例-最适比，形成的结合 物体积大、数量多，出现肉眼可见的反应。即Ag - Ab反应的等价带。 ⚫ 若Ag 或Ab过多，比例不适，不能出现肉眼可见反 应-“带现象”。 ⚫ Ab过剩-前带， Ag 过剩-后带。 第一节 免疫学检测

前带 等价带 后带 巴斜 抗体过剩 抗原过利 最适此例

二、影响Ag-Ab反应的主要因素 1、电解质：生理盐水（0.85%NaCl ） 2、温度：37℃，水产动物28～30℃ 3、PH：6~8 第一节 免疫学检测

二、影响Ag-Ab反应的主要因素 1、电解质：生理盐水（0.85%NaCl ） 2、温度：37℃，水产动物28～30℃ 3、PH：6~8 第一节 免疫学检测

三、免疫凝集试验（凝集反应） 电解质 颗粒性Ag + 相应Ab 凝集小块 （凝集原） （凝集素） 反应种类 敏感度 ⚫ 直接凝集反应 + ⚫ 间接凝集反应 ++ ⚫ 间接凝集抑制试验 +++ ⚫ 协同凝集试验 +++ 第一节 免疫学检测

三、免疫凝集试验（凝集反应） 电解质 颗粒性Ag + 相应Ab 凝集小块 （凝集原） （凝集素） 反应种类 敏感度 ⚫ 直接凝集反应 + ⚫ 间接凝集反应 ++ ⚫ 间接凝集抑制试验 +++ ⚫ 协同凝集试验 +++ 第一节 免疫学检测

（一）直接凝集试验 第一节 免疫学检测

（一）直接凝集试验 第一节 免疫学检测

常用已知Ab测未知Ag。可用于细菌的鉴定、 ABO血型分型 1、玻片法：定性 反应阳性 反应阴性 第一节 免疫学检测

常用已知Ab测未知Ag。可用于细菌的鉴定、 ABO血型分型 1、玻片法：定性 反应阳性 反应阴性 第一节 免疫学检测

2、试管法：定量 （测定抗体的效价） 第一节 免疫学检测

2、试管法：定量 （测定抗体的效价） 第一节 免疫学检测