复旦大学:《分子生物学理论与实验》教学课件_实验二 重组DNA的提取及酶切鉴定
复旦大学:《分子生物学理论与实验》教学课件_实验二 重组DNA的提取及酶切鉴定
掌握以下方法和技术: 1.质粒DNA的小量快速制备 2.质粒DNA的限制性内切酶酶切 3.DNA的琼脂糖凝胶电冰
掌握以下方法和技术: 1. 质粒DNA的小量快速制备 2. 质粒DNA的限制性内切酶酶切 3. DNA的琼脂糖凝胶电泳
1.质粒DNA的小量快速制备 分离质粒DNA有三个步骤: 1.培养细菌使质粒扩增 2.收集和裂解细菌(本实验:SDS裂解) 3.分离和纯化质粒DNA(本实验:碱变性法)
分离质粒DNA有三个步骤: 1. 培养细菌使质粒扩增 2. 收集和裂解细菌(本实验:SDS裂解) 3. 分离和纯化质粒DNA(本实验:碱变性法) 1. 质粒DNA的小量快速制备
碱变性法抽提质粒DNA Solution II Solution II 离心后去向 pH12. 6 pH4.8 染色体「氢键断裂, DNA 双螺旋解开不能复性沉淀中 氢键部分断 质粒DN4/裂,cDNA复性 互补链不完 上清中 全分离
碱变性法抽提质粒DNA Solution II pH12.6 Solution III pH4.8 离心后去向 染色体 DNA 氢键断裂, 双螺旋解开 不能复性 沉淀中 质粒DNA 氢键部分断 裂,cccDNA 互补链不完 全分离 复性 上清中
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