《分析化学》课程教学课件（PPT讲稿）第十章 吸光光度法-2/3

第十章吸光光度法 Absorptiometry 10.1概述 10.2分光光度计 10.3显色反应及其影响因素 10.4吸光光度分析及误差控制 10.5其他吸光光度法 10.6吸光光度法的应用

1 10.1 概述 10.2 分光光度计 10.3 显色反应及其影响因素 10.4 吸光光度分析及误差控制 10.5 其他吸光光度法 10.6 吸光光度法的应用 第十章 吸光光度法 （Absorptiometry）

103 显色反应及影响因素 1031 显色反应和显色剂 一、显色反应 没有颜色的或颜色较浅的化合物，需要通过适当的反应定量 生成有色化合物再测定-显色反应。 M+R=MR 被测物显色剂有色化合物 加东理2大深 Analytical Chemistry 2

Analytical Chemistry 2 一、 显色反应 没有颜色的或颜色较浅的化合物，需要通过适当的反应定量 生成有色化合物再测定－ 显色反应。 M +R = MR 被测物 显色剂 有色化合物 显色反应及影响因素 显色反应和显色剂

对显色反应的要求： 1、选择性好 2、灵敏度高(>104) 3、产物的化学组成稳定 4、化学性质稳定 5、显色剂和产物有明显的颜色差别（△>60nm) 山本理王大军 Analytical Chemistry 3

Analytical Chemistry 3 对显色反应的要求： 1、选择性好 2、灵敏度高 (ε>104 ) 3、 产物的化学组成稳定 4、 化学性质稳定 5、 显色剂和产物有明显的颜色差别 (λ>60nm)

二、显色剂 1、无机显色剂： 过氧化氢，硫氰酸铵，碘化钾 2、有机显色剂： (1)偶氮类：偶氮胂Ⅲ AsO3 H2 OHOH H2O As N=N- N=N- H03S1 SO:H 加东理2大深 Analytical Chemistry 4

Analytical Chemistry 4 二、显色剂 1、 无机显色剂: 过氧化氢，硫氰酸铵，碘化钾 2、 有机显色剂： （1）偶氮类：偶氮胂III N N N N HO3 S SO3H AsO H3 2 OH OH H O As 2 3

(2)三苯甲烷类 三苯甲烷酸性染料铬天菁$ 三苯甲烷碱性染料结晶紫 COOH COOH (H3C)2N N(CH3)2 HO SO;H N(CH3)2 (3)邻菲罗啉类：新亚铜灵 CH CH3 山本理王大军 Analytical Chemistry 5

Analytical Chemistry 5 （2）三苯甲烷类 三苯甲烷酸性染料 铬天菁S O CH3 COOH HO C Cl Cl SO3H CH3 COOH （3）邻菲罗啉类：新亚铜灵 N N CH3 CH3 三苯甲烷碱性染料 结晶紫 C N(CH3 ) (H3C)2N 2 N(CH3)2

(4)肟类：丁二肟 CH3 CH3 Ho一N N- OH 三、多元络合物 混配化合物：Nb-5-Br-PADAP-酒石酸 离子缔合物：AuCL4-罗丹明B 金属离子配体-表面活性剂体系： Mo-水杨基荧光酮-CTMAB 加东理2大深 Analytical Chemistry 6

Analytical Chemistry 6 （4）肟类：丁二肟 C C CH3 N N OH HO CH3 三、 多元络合物 混配化合物： Nb-5-Br-PADAP-酒石酸 离子缔合物： AuCl4 - -罗丹明B 金属离子-配体-表面活性剂体系： Mo-水杨基荧光酮-CTMAB

1032 影响显色反应的因素 1、溶液酸度(pH值及缓冲溶液) >影响显色剂的平衡浓度及颜色， >影响待测离子的存在状态，防止沉淀 >影响络合物组成 2、显色剂的用量 稍过量，处于平台区 3、显色反应时间 ml 针对不同显色反应确定显示时间 显色反应快且稳定；显色反应快但不稳定； 显色反应慢，稳定需时间；显色反应慢但不稳定 G也本开2大名 7 Analytical Chemistry

Analytical Chemistry 7 1、 溶液酸度（pH值及缓冲溶液） ➢ 影响显色剂的平衡浓度及颜色， ➢ 影响待测离子的存在状态，防止沉淀 ➢ 影响络合物组成 2、显色剂的用量 稍过量，处于平台区 3 、显色反应时间 针对不同显色反应确定显示时间 显色反应快且稳定；显色反应快但不稳定； 显色反应慢，稳定需时间；显色反应慢但不稳定 影响显色反应的因素

4、显色反应温度 加热可加快反应速度，导致显色剂或产物分解 5、溶剂 有机溶剂，提高灵敏度、显色反应速率 6、干扰离子 消除办法： 改变酸度，加入掩蔽剂，改变价态 选择合适参比 选择适当波长 力东理王大 Analytical Chemistry 8

Analytical Chemistry 8 4、 显色反应温度 加热可加快反应速度，导致显色剂或产物分解 5、溶剂 6、干扰离子 有机溶剂，提高灵敏度、显色反应速率 消除办法： 改变酸度，加入掩蔽剂，改变价态 选择合适参比 选择适当波长

104 吸光光度分析及误差控制 1041 吸光光度分析法的设计 1.选择显色反应 2.选择显色剂 3.优化显色反应条件 4.选择检测波长 5.选择合适的浓度 测量条件选择 6.选择参比溶液 7.建立标准曲线 山东理工大军 Analytical Chemistry 9

Analytical Chemistry 9 1. 选择显色反应 2. 选择显色剂 3. 优化显色反应条件 4. 选择检测波长 5. 选择合适的浓度 6. 选择参比溶液 7. 建立标准曲线 测量条件选择 吸光光度分析及误差控制 吸光光度分析法的设计

一、测量条件的选择 1、测定波长选择 选择原则：“吸收最大，干扰最小” 灵敏度 选择性 018 0.16 max waye-320nm 014 0.12 0.1 0.06 0.04 900310320 330 310 320 330 340 50 wavelength(nm wavelength(nm) 乌》也系及2不 到A0 EISIYOFTOH0n Analytical Chemistry10

Analytical Chemistry 10 一、测量条件的选择 选择原则：“吸收最大，干扰最小” 灵敏度 选择性 1、测定波长选择