哈尔滨医科大学：《基础化学》课程教学课件（PPT讲稿）第13章 吸光光度法

第五节可见吸光光度法的应用 第四节分光光度计 择 第三节吸光光度法分析条件的 第二节光吸收的基本定律 第一节吸光光度法的基本原理 第十三章吸光光度法

第一节吸光光度法的基本原理 第二节光吸收的基本定律 第三节吸光光度法分析条件的 选择 第四节分光光度计 第五节可见吸光光度法的应用 第十三章吸光光度法

吸光光度法是基于物质光的选择性吸收而 建立的一种分析方法，包括比色法、可见吸光光 度法、紫外吸光光度法和红外光谱法等。 吸光光度法属于仪器分析方法，它所测定的 是物质对光的吸收程度。 吸光光度法主要具有以下特点： (1)测定的灵敏度高。常用于测量质量分数 为103%~1%的微量组分，甚至可测定质量分 数低至105%~104%的痕量组分。 (2)测定的准确度较高。一般吸光光度法测 定的相对误差为2%~5%，若使用精密仪器，相 对误差可降至1%~2%，完全可以满足微量组分 测定的要求

吸光光度法是基于物质对光的选择性吸收而 建立的一种分析方法，包括比色法、可见吸光光 度法、紫外吸光光度法和红外光谱法等。 吸光光度法属于仪器分析方法，它所测定的 是物质对光的吸收程度。 吸光光度法主要具有以下特点： （1）测定的灵敏度高。常用于测量质量分数 为 10-3 ％ ~ 1％ 的微量组分，甚至可测定质量分 数低至 10-5 ％ ~ 10-4 ％ 的痕量组分。 （2）测定的准确度较高。一般吸光光度法测 定的相对误差为2％ ~ 5％，若使用精密仪器，相 对误差可降至1％~ 2％，完全可以满足微量组分 测定的要求

（3)仪器设备简单，操作简便、快速，选 择性好。由于新的显色剂和掩蔽剂不断发现， 提高了选择性，一般不需分离干扰物质就能进 行测定。 (4)应用广泛。几乎所有的无机离子和具 有共轭双键的有机化合物都可以直接或间接地 用吸光光度法进行测定

（3）仪器设备简单，操作简便、快速，选 择性好。由于新的显色剂和掩蔽剂不断发现， 提高了选择性，一般不需分离干扰物质就能进 行测定。 （4）应用广泛。几乎所有的无机离子和具 有共轭双键的有机化合物都可以直接或间接地 用吸光光度法进行测定

第一节吸光光度法的基本原理 一、光的基本性质 二、物质对光的选择性吸收 三、吸收曲线

第一节 吸光光度法的基本原理 一、光的基本性质 二、物质对光的选择性吸收 三、吸收曲线

一、光的基本性质 光是一种电滋波，如果按波长或频率排列，有如 下所示的电兹波谱。 波谱名称 波长范围 分析方法 Y射线 0.005≈0.17nm 中子活化分析，穆斯堡尔谱法 X射线 0.1~10m X射线光谱法 远紫外 10~200nm 真空紫外光谱法 近紫外 200~400nm 紫外光谱法 可见光 400≈760nm 比色法，可见吸光光度法

一、光的基本性质 光是一种电磁波，如果按波长或频率排列，有如 下所示的电磁波谱。 波谱名称 波长范围 分 析 方 法 γ射线 0.005 ~ 0.17nm 中子活化分析，穆斯堡尔谱法 X射线 0.1 ~ 10nm X射线光谱法 远紫外 10 ~ 200nm 真空紫外光谱法 近紫外 200 ~ 400nm 紫外光谱法 可见光 400 ~ 760nm 比色法，可见吸光光度法

近红外 0.76~2.5m 红外光谱法 中红外 2.5≈50m 红外光谱法 远红外 50~1000um 红外光谱法 微波 1~1000mm 微波光谱法 射频 1~1000m 核磁共振光谱法 光具有波粒二相性。光的波长λ、频率火速率 C、能量E之间的关系为： E=w=hc/λ 不同波长的光具有不同的能量，光的波长越短， 光的能量就越大；光的波长越长，光的能量就越小

近红外 0.76 ~ 2.5 红外光谱法 中红外 2.5 ~ 50 红外光谱法 远红外 50 ~ 1000 红外光谱法 微 波 1 ~ 1000 mm 微波光谱法 射 频 1 ~ 1000 m 核磁共振光谱法 光具有波粒二相性。光的波长λ、频率 、速率 c、能量 E 之间的关系为： 不同波长的光具有不同的能量，光的波长越短， 光的能量就越大；光的波长越长，光的能量就越小。 m m m E hv hc = = / 

二、溶液对光的选择性吸收 人的眼睛能感觉到的光称为可见光，其波长 大约在400~760nm范围内。通常将具有同一波 长的光称为单色光，由不同波长的单色光组合得 到的光称为复合光。 溶液之所以呈现不同的颜色，是由于溶液对 不同波长的单色光选择吸收而产生的。当一束白 光通过一有色溶液时，某种波长的单色光被溶液 吸收，而其他波长的单色光透过溶液。因此，溶 液呈现的颜色取决于透过光的颜色

二、溶液对光的选择性吸收 人的眼睛能感觉到的光称为可见光，其波长 大约在 400 ~ 760 nm范围内。通常将具有同一波 长的光称为单色光，由不同波长的单色光组合得 到的光称为复合光。 溶液之所以呈现不同的颜色，是由于溶液对 不同波长的单色光选择吸收而产生的。当一束白 光通过一有色溶液时，某种波长的单色光被溶液 吸收，而其他波长的单色光透过溶液。因此，溶 液呈现的颜色取决于透过光的颜色

如果将两种单色光按适当的比例混合后得到 白光，则这种单色光称为互补色光。显然，透过 光和吸收光是互补色光。 物质的颜色与吸收光颜色的关系 物质的 吸收光 物质的 吸收光 颜色 颜色 λ/nm 颜色 颜色 A/nm 黄绿 紫 400~450 紫 黄绿 560580 黄 蓝 450~480 蓝 黄 580~600 橙 绿蓝 480~490 绿蓝 橙 600650 红 蓝绿 490~500 蓝绿 红 650760 紫红 绿 500~560

物质的 颜色 吸 收 光 物质的 颜色 吸 收 光 颜色 λ/nm 颜色 λ/nm 黄绿 紫 400 ~ 450 紫 黄绿 560 ~ 580 黄 蓝 450 ~ 480 蓝 黄 580 ~ 600 橙 绿蓝 480 ~ 490 绿蓝 橙 600 ~ 650 红 蓝绿 490 ~ 500 蓝绿 红 650 ~ 760 紫红 绿 500 ~ 560 如果将两种单色光按适当的比例混合后得到 白光，则这种单色光称为互补色光。显然，透过 光和吸收光是互补色光。 物质的颜色与吸收光颜色的关系

三、吸收曲线 如果将不同波长的光通过一定浓度的某一溶 液，分别测定溶液对各种波长的光的吸光度。以 入射光的波长人为横坐标，相应的吸光度A为 纵坐标作图，可得到一条吸光度随波长变化的曲 线，称为吸收曲线或吸收光谱。 备

三、吸收曲线 如果将不同波长的光通过一定浓度的某一溶 液，分别测定溶液对各种波长的光的吸光度。以 入射光的波长 λ 为横坐标，相应的吸光度 A 为 纵坐标作图，可得到一条吸光度随波长变化的曲 线，称为吸收曲线或吸收光谱

1.6 1.2 0.8 0.4 400 480 560 640 720 天/nm KMnO4的吸收曲线 备

KMnO4 的吸收曲线