《食品微生物学》课程教学课件（讲稿）实验二 厌氧菌培养与滚管技术

食品微生物学实验 实验二 厌氧菌的培养和滚管技术 主讲：郑海涛

主讲：郑海涛 实验二 厌氧菌的培养和滚管技术

一、实验目的 1、了解厌氧微生物的生长特性 2、观察厌氧菌（双歧杆菌）的形态特征 3、掌握滚管分离、培养与计数技术

1、了解厌氧微生物的生长特性 2、观察厌氧菌（双歧杆菌）的形态特征 3、掌握滚管分离、培养与计数技术 一、实验目的

二、实验原理 1、目前培养厌氧微生物的技术包括：厌氧 箱培养技术、厌氧罐培养技术、厌氧袋 培养技术及亨盖特厌氧滚管技术

二、实验原理 1、目前培养厌氧微生物的技术包括：厌氧 箱培养技术、厌氧罐培养技术、厌氧袋 培养技术及亨盖特厌氧滚管技术

二、实验原理 2、亨盖特厌氧滚管 技术是美国微生物 学家亨盖特Hungate 于1950年首次提出 并应用于瘤胃厌氧 微生物研究的一种 厌氧培养技术。 2003728

二、实验原理 2、亨盖特厌氧滚管 技术是美国微生物 学家亨盖特Hungate 于1950年首次提出 并应用于瘤胃厌氧 微生物研究的一种 厌氧培养技术

二、实验原理 多年来的实践已经证明亨盖特厌氧滚管 技术是研究严格、专性厌氧菌的一种极为 有效的技术。 3、亨盖特培养技术不仅可以用于有益厌 氧菌的分离与活菌培养计数，还可以 用于有害腐败菌的分离与鉴定

二、实验原理 多年来的实践已经证明亨盖特厌氧滚管 技术是研究严格、专性厌氧菌的一种极为 有效的技术。 3、亨盖特培养技术不仅可以用于有益厌 氧菌的分离与活菌培养计数，还可以 用于有害腐败菌的分离与鉴定

三、实验材料 1、样品： 双歧杆菌酸奶、双歧杆菌制剂等； 2、培养基：改良的MRS培养基、无菌生理盐 水等； 3、其他： 亨盖特厌氧滚管装置一套、厌氧管、无 菌注射器

三、实验材料 1、样品： 双歧杆菌酸奶、双歧杆菌制剂等; 2、培养基：改良的MRS培养基、无菌生理盐 水等; 3、其他： 亨盖特厌氧滚管装置一套、厌氧管、无 菌注射器

四、实验方法步骤 实验流程 铜柱除氧 预还原培养基 稀释液制备 稀释样品 滚管 37℃培养24h 计数

四、实验方法步骤 实验流程 铜柱除氧 预还原培养基 稀释液制备 稀释样品 滚管 37℃培养24h 计数

五、样品不同稀释度的制备 在无菌条件下准确称取1g固体或用 无菌注射器吸取1m1混合均匀的液体样 品，加入装有预还原生理盐水的厌氧试 管中，用振荡器将其震荡均匀，制成10 倍的稀释液

在无菌条件下准确称取1g固体或用 无菌注射器吸取1ml混合均匀的液体样 品，加入装有预还原生理盐水的厌氧试 管中，用振荡器将其震荡均匀，制成10 倍的稀释液。 五、样品不同稀释度的制备

五、样品不同稀释度的制备 再用另一只无菌注射器吸取1m110倍 的稀释液至另一支9m1生理盐水试管中制 成100倍稀释液。按此操作依次进行10倍 系列稀释至10-7，通常选择10-5、10-6、10 ?3个稀释度进行滚管计数

再用另一只无菌注射器吸取1ml 10倍 的稀释液至另一支9ml生理盐水试管中制 成100倍稀释液。按此操作依次进行10倍 系列稀释至10-7，通常选择10-5、10-6、10 - 7 3个稀释度进行滚管计数。 五、样品不同稀释度的制备

六、厌氧滚管培养法 将融化好的厌氧琼脂培养基试管放置于 50℃左右的恒温水浴中，用1m1无菌注射器分别 吸取10-5、10-6、10-13个稀释度的稀释液各 0.1m1与融化了的琼脂培养基试管中，将其平放 于盛有冰块的盘中或特制的滚管机上迅速滚 动，这样使带菌培养基在试管内部形成一薄层

将融化好的厌氧琼脂培养基试管放置于 50℃左右的恒温水浴中，用1ml无菌注射器分别 吸取 10-5、 10-6、 10-7 3个稀释度的稀释液各 0.1ml与融化了的琼脂培养基试管中，将其平放 于盛有冰块的盘中或特制的滚管机上迅速滚 动，这样使带菌培养基在试管内部形成一薄层。 六、厌氧滚管培养法