复旦大学：《药物分析 Pharmaceutical Analysis》课程教学资源（PPT课件讲稿）05 第五章 体内药物分析（主讲：梁建英）

第五章 体奶物分析

第五章 体内药物分析

生物样品特点 1、被测定的药物和代谢物的浓度低; 2、样品大多需要分离和净化; 3、样品量少,连续测定时,很难再度获得完全相同 的样品。 4、工作量较大, 5、要求很快地提供结果(毒物检测)

生物样品特点 1、被测定的药物和代谢物的浓度低； 2、样品大多需要分离和净化； 3、样品量少，连续测定时，很难再度获得完全相同 的样品。 4、工作量较大， 5、要求很快地提供结果(毒物检测)

体内药物分析: 样品制备:去除蛋白质、缀合物水解、化学衍生 化、分离浓集(液液萃取、固相萃取等); 样品测定:光谱分析法、色谱分析法、免疫分析 法、生物学方法 方法验证:特异性、标准曲线和定量范围、定量 下限、精密度与准确度、稳定性、提取回收率

样品制备：去除蛋白质、缀合物水解、化学衍生 化、分离浓集（液液萃取、固相萃取等）； 样品测定：光谱分析法、色谱分析法、免疫分析 法、生物学方法 方法验证：特异性、标准曲线和定量范围、定量 下限、精密度与准确度、稳定性、提取回收率 体内药物分析：

第一节、常用体内样品的制备与贮藏 体内样品的种类、采集与制备 )血样:血浆、血清 ■血浆:选用最多。因血浆中的药浓可反映药物在体内的状 况。而且血浆中药物浓度的数据报道较多,可供借鉴。血 浆是全血在加肝素、枸橼酸、草酸盐等抗凝剂的全血经离 后分取,量约为全血的一半

第一节、常用体内样品的制备与贮藏 一、体内样品的种类、采集与制备 （一）血样：血浆、血清 ◼ 血浆：选用最多。因血浆中的药浓可反映药物在体内的状 况。而且血浆中药物浓度的数据报道较多，可供借鉴。血 浆是全血在加肝素、枸橼酸、草酸盐等抗凝剂的全血经离 心后分取，量约为全血的一半

■血浆的制眢:采集的静脉血液置含有抗凝剂的试管中,混 后,以2500~3000/min离心5~10min使与血球分离, 所得淡黄色上清液即为血浆。 抗凝剂一最常用的是肝素( heparin),肝素是体内正常 成分,因此不会改变血样的化学组成或引起药物的变化 般不会干扰药物的测定。通常1m血液需用肝素 0.1~0.2mg或20uU1mg~-126U)。可不必准确控制 其它抗凝剂EDTA、枸橼酸盐、草酸盐等,是与血液中 的钙离子结合的试剂,它们可能引起被测组分发生变化或 干扰某些药物的测定,不常使用

◼ 血浆的制备：采集的静脉血液置含有抗凝剂的试管中，混 合后，以25003000r/min离心510min使与血球分离， 所得淡黄色上清液即为血浆。 抗凝剂—最常用的是肝素（heparin），肝素是体内正常 成分，因此不会改变血样的化学组成或引起药物的变化， 一般不会干扰药物的测定。通常1ml血液需用肝素 0.10.2mg或20IU(1mg126IU)。可不必准确控制 其它抗凝剂EDTA、枸橼酸盐、草酸盐等，是与血液中 的钙离子结合的试剂，它们可能引起被测组分发生变化或 干扰某些药物的测定，不常使用

血清的制备:采集的静脉血液置试管中,于37°℃或室氵 放置3omin~ih。血液凝固后,用细竹棒或玻璃棒轻轻 剥去试管壁上的血饼,再在2500~3000/min离心 5~10min,上层淡黄色液体即为血清。 现文献所指血药浓度为血浆或血清中药物总浓度(游离 的和血浆蛋白结合的总浓度)

血清的制备：采集的静脉血液置试管中，于37℃或室温 放置30min1h。血液凝固后，用细竹棒或玻璃棒轻轻 剥去试管壁上的血饼，再在25003000 r/min离心 510min，上层淡黄色液体即为血清。 现文献所指血药浓度为血浆或血清中药物总浓度（游离 的和血浆蛋白结合的总浓度）

血浆与血清的区别 血清比血浆只是少一种纤维蛋白原 ◆一般血浆中药物浓度与血清中药物浓度相当 ◆血浆比血清的分离快,而且制取量约为全血的5090~60 (血清为全血的50%左右),多数用血浆进行分析 ◆若血浆中含有的抗凝剂对药物浓度测定有影响时,则应 使用血清样品

血浆与血清的区别 ◆ 血清比血浆只是少一种纤维蛋白原 ◆ 一般血浆中药物浓度与血清中药物浓度相当 ◆ 血浆比血清的分离快，而且制取量约为全血的50%~60% （血清为全血的50%左右），多数用血浆进行分析。 ◆ 若血浆中含有的抗凝剂对药物浓度测定有影响时，则应 使用血清样品

(二)尿样: ■尿样测定主要用于药物剂量回收研究、药物肾清除率和生 物利用度等研究,以及测定代谢物类型等。体内药物清除 主要是通过尿液排出,药物可以原型(母体药物)或代谢 物及其缀合物形式排出。尿样常需加入防腐剂

（二）尿样： ◼ 尿样测定主要用于药物剂量回收研究、药物肾清除率和生 物利用度等研究，以及测定代谢物类型等。体内药物清除 主要是通过尿液排出，药物可以原型（母体药物）或代谢 物及其缀合物形式排出。尿样常需加入防腐剂

成人一日排尿量为1~5L。尿样包括随时尿、晨尿、白 天尿、夜间尿及时间尿几种。因尿液浓度变化较大,所 以应测定一定时间内排入尿中的药物总量。一般采集时 间尿(规定时间内采集尿液体积和排入尿中的药物总 尿液中药物浓度的改变不能直接反映血药浓度,即与血 药浓度相关性较差、尿液量较大不易保存等

成人一日排尿量为15L。尿样包括随时尿、晨尿、白 天尿、夜间尿及时间尿几种。因尿液浓度变化较大，所 以应测定一定时间内排入尿中的药物总量。一般采集时 间尿（规定时间内采集尿液体积和排入尿中的药物总 量）。 尿液中药物浓度的改变不能直接反映血药浓度，即与血 药浓度相关性较差、尿液量较大不易保存等

(三)、唾液: 唾液中的药物浓度通常与血浆浓度相关。样品易得, 取样无损害,尤易为儿童接收。有些可从药物唾液浓度推 定血浆中游离药物浓度 唾液由腮腺、颌下腺和舌下腺三个主要的唾液腺分泌汇 集而成前两者分泌量占总量90%两者中浓度大致相当 取样:在漱口后15min,安静状态下采集口腔内然流出 的唾液;也可在刺激下快速采样(需注意干扰)。如口嚼石 腊片或将柠檬酸、维生素C等置于舌尖,弃去初始部分后 采集。刺激后采集的为混合唾液

（三）、唾液： 唾液中的药物浓度通常与血浆浓度相关。样品易得， 取样无损害，尤易为儿童接收。有些可从药物唾液浓度推 定血浆中游离药物浓度。 唾液由腮腺、颌下腺和舌下腺三个主要的唾液腺分泌汇 集而成前两者分泌量占总量90%。两者中浓度大致相当。 取样：在潄口后15min，安静状态下采集口腔内然流出 的唾液；也可在刺激下快速采样(需注意干扰) 。如口嚼石 腊片或将柠檬酸、维生素C等置于舌尖，弃去初始部分后 采集。刺激后采集的为混合唾液