《无机化学》课程PPT教学课件（医学及相关专业，实验讲稿）人血清总胆固醇含量的测定

医用化学（无机）实验教案 重庆医科大学

医用化学（无机）实验教案 重庆医科大学

实验二十一人血清总胆固醇含量的测定 实验目的 掌握乙酸酐一疏酸显色测定人血清胆固醇的原理 熟悉分光光度法的基本操作 了解人血清总胆固醇含量的意义 ●●●●

了解人血清总胆固醇含量的意义 熟悉分光光度法的基本操作 掌握乙酸酐－硫酸显色测定人血清胆固醇的原理 实验二十一 人血清总胆固醇含量的测定 实验目的 1 2 3 一

二、实验原理 在乙酸酐的作用下，胆固醇脱水生成脱水胆固醇，后者与硫酸结合生成 显绿色的胆固醇二烯单磺酸，在600m波长有最大吸收。为此，可利用 此性质，采用分光光度法测定血清胆固醇的总含量。其反应式如下： H3C CaH17 C8H17 H, 8H17 HgC 乙酸酐 浓2S04 HO3S HO 胆固醇 CH3COOH 脱水胆固醇 H20 绿色化合物 (胆固醇二烯单磺酸) ●●●●

二、实验原理 在乙酸酐的作用下，胆固醇脱水生成脱水胆固醇，后者与硫酸结合生成 显绿色的胆固醇二烯单磺酸，在600nm波长有最大吸收。为此，可利用 此性质，采用分光光度法测定血清胆固醇的总含量。其反应式如下： HO H3C H3C C8H17 H3C H3C C8H17 CH3COOH H2SO4 HO3S H3C H3C C8H17 胆固醇 H2O 乙酸酐 脱水胆固醇 浓 绿色化合物 (胆固醇二烯单磺酸)

三、实验仪器与试剂 仪器 水浴箱，UV-2102PC型紫外一可见分光光度计， 100mL容量瓶，10mL吸量管，试管 试剂 2mgmL1标准胆固醇溶液，乙酸酐一硫酸显色剂， 浓硫酸 ●●●●

三、实验仪器与试剂 仪器 试剂 水 浴箱 ， UV-2102PC型 紫 外－可 见分 光光度 计 ， 100mL容量瓶，10mL吸量管，试管 2mg·mL-1标准胆固醇溶液，乙酸酐－硫酸显色剂， 浓硫酸 Creativity

四、实验操作 吸光度测定 乙酸酐一硫酸显 标准胆固醇溶液 色剂的配制 的配制

四、实验操作 1 2 3 标准胆固醇溶液 的配制 乙酸酐－硫酸显 色剂的配制 吸光度测定

2 3 用空白溶液作参比， 最大吸收波长下测定 理解计算血清总胆 每次测定前要用 标准溶液的吸光度 固醇的公式。 参比调节分光光 度计的零点 五、操作要点和注意事项 ●●●●

1 2 3 用空白溶液作参比， 每次测定前要用 参比调节分光光 度计的零点 理解计算血清总胆 固醇的公式。 最大吸收波长下测定 标准溶液的吸光度 五、 操作要点和注意事项

1、测定人血清总胆固 醇有何意义？ 2、其显色反应基于什么 3、本实验中的空白溶 原理？ 液，标准溶液和未知 溶液是如何配置的？ 六、思考题 ●●●●

1、测定人血清总胆固 醇有何意义？ 3、本实验中的空白溶 液，标准溶液和未知 溶液是如何配置的？ 2、其显色反应基于什么 原理？ 六、思考题