《无机化学》课程PPT教学课件（医学及相关专业，实验讲稿）维生素测定

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 实验目的 1、掌握紫外一可见分光光度计的使用方法。 2、学习在紫外光谱区同时测定双组分体系一 维生素C和维生素E的方法

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 一、实验目的 1、掌握紫外—可见分光光度计的使用方法。 2、学习在紫外光谱区同时测定双组分体系— — 维生素C和维生素E的方法

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 二、实验原理 维生素C和维生素在紫外光区具有不同的最大 吸收波长，维生素C是水溶性的，维生素E是脂 溶性的，但它们都能溶于无水乙醇，可在同一 溶液中利用双组分测定原理同时测定

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 二、实验原理 维生素C和维生素E在紫外光区具有不同的最大 吸收波长，维生素C是水溶性的，维生素E是脂 溶性的，但它们都能溶于无水乙醇，可在同一 溶液中利用双组分测定原理同时测定

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 二、实验原理 朗伯-比耳定律应用于双组分体系，可得到下列 联立方程式： 上下两个方程式分别为波长2、波长2，下总吸 光度、与维生素C浓度及维生E浓度的关系式。 解上述方程即可求维生素C浓度及维生E浓度

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 二、实验原理 朗伯-比耳定律应用于双组分体系，可得到下列 联立方程式： C C E E A k c k c 1 1 1 = + 总 C C E E A k c k c 2 2 2 = + 总 上下两个方程式分别为波长1、波长2下总吸 光度、与维生素C浓度及维生E浓度的关系式。 解上述方程即可求维生素C浓度及维生E浓度

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 三、仪器与试剂 UNCO-2000紫外一可见分光光度计及相应的配套 软件，石英比色皿(1cm),容量瓶(25ml),容量瓶 (10ml),吸量管(10ml)移液管(1ml)。 维生素C储备液(3.00×moL1)维生素E储备液 (4.52×molL1)

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 三、仪器与试剂 UNICO-2000紫外—可见分光光度计及相应的配套 软件，石英比色皿(1cm)，容量瓶(25ml)，容量瓶 (10ml )，吸量管(10 ml ) 移液管(1ml )。 维生素C储备液（3.00× mol·L-1）维生素E储备液 （4.52×mol·L-1）

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 四、实验步骤 (一)配置标准溶液 1、分别准确取维生素C储备液4.00ml、6.00ml、 8.00ml、10.00ml于4个25ml容量瓶中，用无水 乙醇稀释至刻度，摇匀。 2、分别准确取维生素E储备液4.00ml、6.00ml、 8.00ml、10.00ml于4个25ml容量瓶中，用无水 乙醇稀释至刻度，摇匀

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 四、实验步骤 (一) 配置标准溶液 1、分别准确取维生素C储备液4.00ml、6.00ml、 8.00ml、10.00ml于4个25ml容量瓶中，用无水 乙醇稀释至刻度，摇匀。 2、分别准确取维生素E储备液4.00ml、6.00ml、 8.00ml、10.00ml于4个25ml容量瓶中，用无水 乙醇稀释至刻度，摇匀

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 四、实验步骤 (二)扫描吸收光谱 以无水乙醇为参比，取6.00ml的标准溶液，在 200~300nm范围扫描出维生素C和维生素E的 吸收光谱，并确定人和2，打印谱图。 三)建立工作曲线 以无水乙醇为参比，在波长2和2处分别测定步 骤1配制的8个标准溶液的吸光度。运用UNICO- 2000数据处理软件系统，分别建立并打印4条工 作曲线

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 四、实验步骤 (二) 扫描吸收光谱 以无水乙醇为参比，取6.00ml的标准溶液，在 200～300nm范围扫描出维生素C和维生素E的 吸收光谱，并确定1和2，打印谱图。 (三) 建立工作曲线 以无水乙醇为参比，在波长1和2处分别测定步 骤1配制的8个标准溶液的吸光度。运用UNICO- 2000数据处理软件系统，分别建立并打印4条工 作曲线

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 四、实验步骤 (四)药物中维生素C和维生素E的测定 准确称取0.0150~0.0200g的含有维生素C(抗 坏血酸)和维生素E(Q一生育酚)的药物，溶 于无水乙醇中，并用无水乙醇定溶于25ml容量 瓶中。 用1ml移液管吸取上述溶液于10ml容量瓶，用 无水乙醇稀释至刻度，摇匀。在波长2和入处 分别测定其吸光度

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 四、实验步骤 (四) 药物中维生素C和维生素E的测定 准确称取0.0150～0.0200g的含有维生素C（抗 坏血酸）和维生素E（α—生育酚）的药物，溶 于无水乙醇中，并用无水乙醇定溶于25ml容量 瓶中。 用1ml移液管吸取上述溶液于10ml容量瓶，用 无水乙醇稀释至刻度，摇匀。在波长1和2处 分别测定其吸光度

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 五、操作要点和注意事项 1、正确使用参比溶液校正仪器。 2、每变换一次波长就需用参比溶液校正仪器

五、操作要点和注意事项 双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 1、正确使用参比溶液校正仪器。 2、每变换一次波长就需用参比溶液校正仪器

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 六、数据处理 1、打印维生素C和维生素E的吸收光谱图，确定 和22 2、分别打印维生素C和维生素E在)1和入2时的4条 工作曲线，求出4条曲线的斜率 3、计算药物未知液中的维生素C和维生素E的浓度

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 六、数据处理 1、打印维生素C和维生素E的吸收光谱图，确定1 和2。 2、分别打印维生素C和维生素E在1和2时的4条 工作曲线，求出4条曲线的斜率 3、计算药物未知液中的维生素C和维生素E的浓度

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 七、思考题 1、从维生素C和维生素E的结构式解释一个是 “水 溶性”，一个是“脂溶性”的原因。 2、使用本方法测定维生素C和维生素E是否灵敏？ 解释其原因

双波长分光光度法同时测定药物中 维生素C和维生素E 七、思考题 1、从维生素C和维生素E的结构式解释一个是 “水 溶性”，一个是“脂溶性”的原因。 2、使用本方法测定维生素C和维生素E是否灵敏？ 解释其原因