《临床检验仪器学》课程教学资源（讲义）实验11 生化分析仪的参数设置及性能评价

实验11生化分析仪的参数设置及性能评价 实验目的 1.掌握自动生化分析仪参数正确设置的步骤。 2.掌握自动生化分析仪主要性能评价的基本原理和方法。 实验器材 全自动生化分析仪一台：硫酸铜标准溶液：取AR级硫酸铜，用去离子水分 别配成2.5%、5.0%、7.5%、10%的溶液，使它们在620nm处吸光度分别为0.2A、 0.4A、0.6A、0.8A(最大允许误差为0.5%)：临床生化检测某项目试剂：新鲜 血清样品（医学决定水平浓度和高浓度各一份），也可用质控品代替 实验原理 临床检验仪器参数的正确设置和合理使用是仪器正常工作的前提条件。自动 生化分析仪的参数包括波长、温度、样品量和试剂量、分析方法和校正方法、反 应时间设定、线性范围的设置、机械臂与电子阀设置、计算机软件的设定等。封 闭式生化分析仪的参数由厂家提供，无需人为设定。目前国内实验室大多使用开 放式生化分析仪，其部分参数应在使用前根据试剂厂商的说明及所用仪器的实际 情况正确设置。 正确设置参数后，要应用于临床检验，还必须对自动生化分析仪的性能进行 实验和评价。常用性能评价指标有精密度、波长的准确性和线性、与其它仪器的 相关性等。本实验通过多次重复测定某新鲜样品的某一个项目，衡量自动生化分 析仪的批内精密度：通过用在固定波长下已知吸光度的标准溶液，用被评价生化 仪测定实际吸光度值，与相应标准值之差衡量该生化仪波长的准确性：通过用已 知稳定浓度的一系列标准溶液在最大吸收处读取吸光度，然后绘制标准曲线，观 察其波长的线性。通过以一系列浓度样品分别在待评价和已通过评价的两台仪器 上测定相同项目，数据作线性回归处理来衡量两台仪器的相关性 实验步骤 1.参数的正确设置（以UniCel DxC800测定LDL为例），见表23- 表23-1相应参数表 实名利定方式位定标方式定标

实验 11 生化分析仪的参数设置及性能评价 实验目的 1.掌握自动生化分析仪参数正确设置的步骤。 2.掌握自动生化分析仪主要性能评价的基本原理和方法。 实验器材 全自动生化分析仪一台；硫酸铜标准溶液：取 AR 级硫酸铜，用去离子水分 别配成 2.5%、5.0%、7.5%、10%的溶液，使它们在 620nm 处吸光度分别为 0.2A、 0.4A、0.6A、0.8A（最大允许误差为 0.5%）；临床生化检测某项目试剂；新鲜 血清样品（医学决定水平浓度和高浓度各一份），也可用质控品代替。 实验原理 临床检验仪器参数的正确设置和合理使用是仪器正常工作的前提条件。自动 生化分析仪的参数包括波长、温度、样品量和试剂量、分析方法和校正方法、反 应时间设定、线性范围的设置、机械臂与电子阀设置、计算机软件的设定等。封 闭式生化分析仪的参数由厂家提供，无需人为设定。目前国内实验室大多使用开 放式生化分析仪，其部分参数应在使用前根据试剂厂商的说明及所用仪器的实际 情况正确设置。 正确设置参数后，要应用于临床检验，还必须对自动生化分析仪的性能进行 实验和评价。常用性能评价指标有精密度、波长的准确性和线性、与其它仪器的 相关性等。本实验通过多次重复测定某新鲜样品的某一个项目，衡量自动生化分 析仪的批内精密度；通过用在固定波长下已知吸光度的标准溶液，用被评价生化 仪测定实际吸光度值，与相应标准值之差衡量该生化仪波长的准确性；通过用已 知稳定浓度的一系列标准溶液在最大吸收处读取吸光度，然后绘制标准曲线，观 察其波长的线性。通过以一系列浓度样品分别在待评价和已通过评价的两台仪器 上测定相同项目，数据作线性回归处理来衡量两台仪器的相关性。 实验步骤 1.参数的正确设置（以 UniCel DxC800 测定 LDL 为例），见表 23-1 表 23-1 相应参数表 实验名称 测定方式 单位 定标方式 定标点 主波长 （nm） 副 波 长 （nm）

LDL 两点终点法 mmol/L. 线性 1 600 700 换算系数定标时间间隔 样品体积试剂T体积L试剂Ⅱ体积L 可检测范围mo1/L 336h 3 225 75 0-18.1 2.精密度试验按照步骤1参数设置（用该仪器做该项目检测）或试剂厂商 提供的参数设置说明书（可根据自身实验室条件选择）设置好参数，取新鲜血清 样品（医学决定水平浓度）重复测定该项目20次，计算均值(mean)、标准差(S) 和变异系数(Cv%),与厂商要求的CY或CLIA管理项目要求的精密度比较，看 批内精密度是否符合要求（要求见判断标准）。 3.波长的准确性检测在波长620m处用蒸馏水作空白校正仪器吸光度 “0”,分别用吸光度值为0.4A和0.8A的硫酸铜标准溶液测定实际吸光度值，每 个样品重复测定三次，记录并计算结果。 4.波长的线性检测在波长620m处用蒸馏水作空白校正仪器吸光度“0”， 分别用吸光度值为0.2A(2.5%)、0.4A(5.0%)、0.6A(7.5%、0.8A(10%) 的硫酸铜标准溶液测定实际吸光度值，每个样品重复测定三次，记录并计算结果。 5.仪器相关性试验按照步骤1参数（用该仪器做该项目检测）或试剂厂商 提供的参数设置说明书（可根据自身实验室条件选择）设置好参数，取新鲜血清 样品（高浓度）进行等比稀释，得到共6个不同浓度稀释样品，同时在待评价仪 器和已通过评价的仪器上测定，得到两组数据，记录并将数据用线性回归处理。 数据记录及处理 表23-2自动生化分析仪精密度实验结果 234567891011121314151617181920mscw 判断标准：UniCelDxC800测定LDL批内精密度CV<3%,或按厂商或CLIA 管理项目要求的精密度， 表23-3自动生化分析攸波长的准确性检测 波长(nm) 标准A 620 0.4 0.8 判断标准：平均吸光度A与相应标准吸光度之差即代表波长的准确性，要

LDL 两点终点法 mmol/L 线性 1 600 700 换算系数 定标时间间 隔 样品体积 试剂Ⅰ体积 μL 试剂Ⅱ体积 μL 可检测范围 mmol/L 1 336h 3 225 75 0~18.1 2．精密度试验 按照步骤 1 参数设置（用该仪器做该项目检测）或试剂厂商 提供的参数设置说明书（可根据自身实验室条件选择）设置好参数，取新鲜血清 样品（医学决定水平浓度）重复测定该项目 20 次，计算均值（mean）、标准差（S） 和变异系数（CV%），与厂商要求的 CV 或 CLIA 管理项目要求的精密度比较，看 批内精密度是否符合要求（要求见判断标准）。 3．波长的准确性检测 在波长 620nm 处用蒸馏水作空白校正仪器吸光度 “0”，分别用吸光度值为 0.4A 和 0.8A 的硫酸铜标准溶液测定实际吸光度值，每 个样品重复测定三次，记录并计算结果。 4. 波长的线性检测 在波长 620nm 处用蒸馏水作空白校正仪器吸光度“0”， 分别用吸光度值为 0.2A（2.5%）、0.4A（5.0%）、0.6A（7.5%）、0.8A（10%） 的硫酸铜标准溶液测定实际吸光度值，每个样品重复测定三次，记录并计算结果。 5.仪器相关性试验 按照步骤 1 参数（用该仪器做该项目检测）或试剂厂商 提供的参数设置说明书（可根据自身实验室条件选择）设置好参数，取新鲜血清 样品（高浓度）进行等比稀释，得到共 6 个不同浓度稀释样品，同时在待评价仪 器和已通过评价的仪器上测定，得到两组数据，记录并将数据用线性回归处理。 数据记录及处理 表 23-2 自动生化分析仪精密度实验结果 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 mean S CV% 判断标准：UniCel DxC 800 测定 LDL 批内精密度 CV＜3%，或按厂商或 CLIA 管理项目要求的精密度。 表 23-3 自动生化分析仪波 长的 准确 性检 测 波长（nm） A1 A2 A3 标准 A dA 620 0.4 0.8 判断标准：平均吸光度 与相应标准吸光度之差即代表波长的准确性，要

求见表23-4。 表23-4自助生化分析仪波长的准确性技术要求 吸光度A 仪器等级 一类仪器 二类仪器 A ±0.01 ±0.02 0.5 B ±0.02 ±0.03 C ±0.03 ±0.04 A ±0.02 ±0.04 1.0 B ±0.04 ±0.06 c ±0.07 ±0.08 表23-5自动生化分析攸波长的线性检测 硫酸铜标准溶液 2.5% 5.0% 7.5% 10.0% 判断标准：用最小三乘法求出直线方程和相关系数r,需符合r≥0.995 表23-6自动生化分析仪相关性实验结果 仪器 浓度1 浓度2浓度3 浓度4浓度5浓度6 待评价(y) 已评价(x) 判断标准：将两组数据用线性回归处理得方程y=bx+a及相关系数r,需符 合r≥0.975。 注意事项 1.自动生化分析仪为精密仪器，使用过程中需严格按照仪器说明书要求，必 须在老师指导下完成实验。 2.所用血清样品必须为新鲜血清，为人源性标本，须小心对待，防止污染。 3.所用试剂必须为AR级（分析纯试剂），实验用水为去离子水。 4.实验结束需按照所用自动生化分析仪的日常维护要求对仪器进行维护保

求见表 23-4。 表 23-4 自动生化分析仪波长的 准 确性 技术 要求 吸光度 A 仪器等级 一类仪器 二类仪器 0.5 A ±0.01 ±0.02 B ±0.02 ±0.03 C ±0.03 ±0.04 1.0 A ±0.02 ±0.04 B ±0.04 ±0.06 C ±0.07 ±0.08 表 23-5 自动生化分析仪波 长的 线性 检测 硫酸铜标准 溶液 A1 A2 A3 2.5% 5.0% 7.5% 10.0% 判断标准：用最小二乘法求出直线方程和相关系数 r，需符合 r≥0.995。 表 23-6 自动生化分析仪相关性实验结 果 仪器 浓度 1 浓度 2 浓度 3 浓度 4 浓度 5 浓度 6 待评价(y) 已评价(x) 判断标准：将两组数据用线性回归处理得方程 y=bx+a 及相关系数 r，需符 合 r≥0.975。 注意事项 1.自动生化分析仪为精密仪器，使用过程中需严格按照仪器说明书要求，必 须在老师指导下完成实验。 2.所用血清样品必须为新鲜血清，为人源性标本，须小心对待，防止污染。 3.所用试剂必须为 AR 级（分析纯试剂），实验用水为去离子水。 4.实验结束需按照所用自动生化分析仪的日常维护要求对仪器进行维护保

养。 思考题 1.什么情况下需要自行设置自动生化分析仪参数？ 2.正确设置参数后的自动生化分析仪检测结果是否能直接应用于临床？为 什么？ 3.自动生化分析仪主要性能评价指标有哪些？应如何进行评价？

养。 思考题 1.什么情况下需要自行设置自动生化分析仪参数？ 2.正确设置参数后的自动生化分析仪检测结果是否能直接应用于临床？为 什么？ 3.自动生化分析仪主要性能评价指标有哪些？应如何进行评价？