山东农业大学：《基因工程综合试验》课程教学大纲 2

《基因工程综合试验2》教学大纲课程代码：BB061306学时：36学分：2适用专业：生物技术，生物科学审定课程性质：必修执笔人：朱常香人：郑成超一、实验课的性质与任务本课程是一门专业实验课。该课程在《基因工程综合实验1》的基础上，继目的基因的分离、克隆，载体的构建等实验的基础开设的。主要介绍目的基因原核表达、基因转化、转基因植株的鉴定等方面的实验内容，在注重专业性和可操作性的前提下突出先进性和系统性，加强教学内容的选择性。通过本课程的学习和实践，使学生对基因工程的全过程有系统、明确的认识，达到熟识、理解并掌握基因工程的实验原理和操作方法，提高分析问愿和解决问题的能力，开拓创新能力，为从事生物技术及其相关领域的科学研究工作打下基础。二、实验目的与要求本课程的目的是培养高年级本科生及研究生进行基因操作的能力。教学中，要求调动教学双方的主观能动性，组织学生参加实验准备，让学生和教师共同讨论理论和实验问题，指导学生分析总结实验结果，学会正确书写科学报告（论文）。三、实验项目及内容提要基因工程综合实验2（BB061306)实验类型序号实验名称学时选开验证基本综合内容提要必开设计操作构建包含外源基因的原核表外源基因的达载体，诱导基因表达，并8AV原核表达进行电泳检测用包含有表达载体（pROKII-农杆菌介导CP）农杆菌LBA4404，采用2的烟草基因12叶圆片法转化烟草，经预培N转化养、共培养和选择培养，获得转基因植株。转基因植物采用SDS法提取转基因烟草总3总DNA提取及10DNA,采用PCR扩增目的基因，PCR检测进行转基因植物的初步鉴定采用间接酶联免疫吸附技酶联免疫吸术，检测植株中病毒含量，附技术检测-对转基因植株进行抗病性鉴病毒定四、实验报告的格式实验报告的撰写要求使用专用实验报告纸。实验报告的内容应包括：实验目的、实验的基本原理、实验用的仪器设备及试剂、实验操作程序、实验结果与分析、实验应注意事项及问题讨论。五、本课程考核方式、方法及实验成绩评定方法考核及成绩评定把学生的实际动手能力放在重要地位，根据实验报告撰写情况及平时表现给予综合评定。六、实验应配套的主要仪器设备及台（套）数台（套）数仪器设备名称2电泳仪2水平电泳槽2垂直电泳槽

《基因工程综合试验2》教学大纲 课程代码：BB061306 学时：36 学分：2 适用专业： 生物技术，生物科学 课程性质：必修 执笔人：朱常香 审定 人：郑成超 一、实验课的性质与任务 本课程是一门专业实验课。该课程在《基因工程综合实验1》的基础上，继目的基因的分离、克隆，载体的构建等实验的基础开设的。主 要介绍目的基因原核表达、基因转化、转基因植株的鉴定等方面的实验内容，在注重专业性和可操作性的前提下突出先进性和系统性，加强教 学内容的选择性。通过本课程的学习和实践，使学生对基因工程的全过程有系统、明确的认识，达到熟识、理解并掌握基因工程的实验原理和 操作方法，提高分析问题和解决问题的能力，开拓创新能力，为从事生物技术及其相关领域的科学研究工作打下基础。 二、实验目的与要求 本课程的目的是培养高年级本科生及研究生进行基因操作的能力。教学中，要求调动教学双方的主观能动性，组织学生参加实验准备，让 学生和教师共同讨论理论和实验问题，指导学生分析总结实验结果，学会正确书写科学报告（论文）。 三、实验项目及内容提要 基因工程综合实验2 （BB061306） 序号 实验名称 学时 必开 选开 实验类型 验证 基本 内容提要 操作 综合 设计 1 外源基因的 原核表达 8 √ √ 构建包含外源基因的原核表 达载体，诱导基因表达，并 进行电泳检测 2 农杆菌介导 的烟草基因 转化 12 √ √ 用包含有表达载体（pROKII￾CP）农杆菌LBA4404，采用 叶圆片法转化烟草，经预培 养、共培养和选择培养，获 得转基因植株。 3 转基因植物 总DNA提取及 PCR检测 10 √ √ 采用SDS法提取转基因烟草总 DNA,采用PCR扩增目的基因， 进行转基因植物的初步鉴定 4 酶联免疫吸 附技术检测 病毒 6 √ √ 采用间接酶联免疫吸附技 术，检测植株中病毒含量， 对转基因植株进行抗病性鉴 定 四、实验报告的格式 实验报告的撰写要求使用专用实验报告纸。实验报告的内容应包括：实验目的、实验的基本原理、实验用的仪器设备及试剂、实验操作程 序、实验结果与分析、实验应注意事项及问题讨论。 五、本课程考核方式、方法及实验成绩评定方法 考核及成绩评定把学生的实际动手能力放在重要地位，根据实验报告撰写情况及平时表现给予综合评定。 六、实验应配套的主要仪器设备及台（套）数 仪器设备名称 台（套）数 电泳仪 2 水平电泳槽 2 垂直电泳槽 2

6旋涡混合器-恒温光照培养箱全温震荡培养箱6磁力搅拌器1冰箱1超低温冰柜1分光光度计1万分之一天平1百分之一天平1低温高速冷冻离心机3普通离心机3超静工作台微量移液器10（1000u/200u/20ul）1酶标仪1微波炉1水浴锅1恒温水浴锅钢制冰机1高压灭菌锅附：教学参考书目1、使用实验指导《基因工程综合实验》操作手册。朱常香，宋云枝，刘学春等，2003。2、参考书目(1)《分子克隆实验指南》（第三版）。J·萨姆布鲁克，D·W·拉塞尔著，黄培堂等译。科学出版社，2002。(2)《基因工程原理与技术》。王关林，方宏笃主编，科学出版社，1998

旋涡混合器 6 恒温光照培养箱 1 全温震荡培养箱 1 磁力搅拌器 6 冰箱 1 超低温冰柜 1 分光光度计 1 万分之一天平 1 百分之一天平 1 低温高速冷冻离心机 1 普通离心机 3 超静工作台 3 微量移液器 10（1000ul\200ul\20ul） 酶标仪 1 微波炉 1 水浴锅 1 恒温水浴锅 1 制冰机 1 高压灭菌锅 1 附：教学参考书目 1、使用实验指导《基因工程综合实验》操作手册。朱常香，宋云枝，刘学春等，2003。 2、参考书目 （1）《分子克隆实验指南》（第三版）。J·萨姆布鲁克，D·W·拉塞尔著，黄培堂等译。科学出版社，2002。 （2）《基因工程原理与技术》。王关林，方宏筠主编，科学出版社，1998