《普通遗传学实验》课程教学课件（讲稿）植物根尖压片技术

NG实验二植物根尖压片技术

实验二 植物根尖压片技术

1、实验目的熟悉有丝分裂过程学习植物根尖压片技术。加C7L行

一、实验目的 熟悉有丝分裂过程, 学习植物根尖压片技术

10根毛区二、实验原理植物分生组织细胞进行着旺盛的有丝分裂。伸长区在细胞分裂的适当时期取材，通过适当的处理，就可在显微镜下观察有丝分裂，并进行染色体计数。分生区什么时期的染色体易于计数？生长点植物根尖

二、实验原理 植物分生组织细胞进行着旺盛的有丝分裂。 在细胞分裂的适当时期取材，通过适当的处 理，就可在显微镜下观察有丝分裂，并进行染色 体计数。 什么时期的染色体易于计数？ 植物根尖 根毛区 伸长区 分生区 生长点

有丝分裂中期的染色体易于计数。可用药物或冰冻处理方法，阻止纺锤体的形成以获得更多的中期细胞。同时还可使染色体缩短，易于分散，便于进行观察研究。另外通过对细胞组织进行酸性水解或酶处理除去细胞之间的果胶层，并软化细胞壁，使细胞容易彼此散开，有利于压片和染色

l 有丝分裂中期的染色体易于计数。 l 可用药物或冰冻处理方法，阻止纺锤体的形成以获得更多的中期细胞。 同时还可使染色体缩短，易于分散，便于进行观察研究。 l 另外通过对细胞组织进行酸性水解或酶处理除去细胞之间的果胶层，并 软化细胞壁，使细胞容易彼此散开，有利于压片和染色

三、实验材料和实验用品1材料：大蒜、洋葱根尖2.药品：95%乙醇、冰醋酸、蒸馏水、浓盐酸、2%醋酸洋红染色液

三、实验材料和实验用品 1．材料：大蒜、洋葱根尖 2．药品：95%乙醇、冰醋酸、蒸馏水、浓盐酸、2% 醋酸洋红染色液

101四、实验内容和实验步骤固定预处理低渗取材染色与压片低渗解离镜检

取材 预处理 固定 低渗 解离 低渗 染色与压片 镜检 四、实验内容和实验步骤

1.取材：可在室内培养，也可从田间挖取幼嫩根尖。室内培养圆葱和大蒜根尖：，待根长1-2cm时，选健壮根剪下备用。20-25℃光照下培养2-3天

1．取材： 可在室内培养，也可从田间挖取幼嫩根尖。 室内培养圆葱和大蒜根尖： 20-25℃光照下培养2-3天，待根长1-2cm时，选健壮根剪下备用

2.预处理：（1）冰冻预处理：将根尖浸泡在蒸馏水中，置于冰水浴或1-4℃冰箱内24小时表1常用药液预处理时间（2）药物预处理：药品条件圆葱玉米小麦15室温25温度(℃)0.1%秋水仙素溶液42处理时间（小时）3室温室温温度（℃）饱和对二氯苯溶液处理时间（小时）44室温温度（℃)180.002mol/L1328-羟基喹处理时间（小时）4

2．预处理： （1）冰冻预处理：将根尖浸泡在蒸馏水中，置于冰水浴或1- 4℃冰箱内24小时。 （2）药物预处理：

3.固定：预处理后用蒸馏水冲洗，转移到固定液中。？：？卡诺氏固定液，无水酒精：冰醋酸=如需长期保存，可70%酒精冲2次然后转入70%酒精中保存

3．固定： l 预处理后用蒸馏水冲洗，转移到固定液中。 卡诺氏固定液，无水酒精：冰醋酸＝ ？：？ l 如需长期保存，可70%酒精冲2次然后转入70%酒精中保存

4.前低渗、解离：前低渗：用蒸馏水冲洗解离：（1）处理2-10min。酒精和浓盐酸的等量混合液(2)60℃1mol/L盐酸处理10-15min或5mol/L盐酸处理5-10min。（3）2.5%果胶酶、2.5%纤维素酶等量混合，室温处理1-2hrNHO

4．前低渗、解离： 前低渗：用蒸馏水冲洗 解离：（1）酒精和浓盐酸的等量混合液 处理2-10min。 （2） 60℃ 1mol/L盐酸 处理10-15 min 或 5mol/L盐酸 处理5-10 min。 （3）2.5%果胶酶、2.5%纤维素酶等量混合，室温处理1-2hr