厦门大学：《生物化学实验》课程教学资源（讲稿）影响酶活性的因素

实验十影响酶活性的因素王世珍

实验十 影响酶活性的因素 王世珍

影响酶促反应速度的因素底物温度pH值酶浓度激活剂抑制剂

影响酶促反应速度的因素  底物  温度  pH值  酶浓度  激活剂  抑制剂

底物浓度对酶促反应速度的影响（米氏方程、米氏常数Km）100[S]Vmax80-V=Km+ [S]6040当[S]>Km时,v=Vmax20当[S]=Km时,v=Vmax/220.81012141618Concentration of Substrate(umol/L)m

底物浓度对酶促反应速度的影响 （米氏方程、米氏常数Km） V= Vmax [S] Km + [S] 当[S]Km时，v=(Vmax/Km)[S] 当[S]Km时,v=Vmax 当[S]=Km时,v=Vmax/2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 0 20 40 60 80 100 Concentration of Substrate(umol/L) Rate of Reaction(v) Km

pH 的影响100木瓜蛋白酶在一定的pH 下，酶具有胃蛋白酶最大的催化活性，通常称此pH 为最适 pH。胆碱脂酶a.过酸或过碱影响酶蛋白60的构象，使酶变性失活b.影响酶分子中某些基团40的解离状态（活性中心的基团或维持构象的一20些基团)C.影响底物分子的解离状态03L7849210pH

pH 的影响 在一定的pH 下, 酶具有 最大的催化活性,通常 称此pH 为最适 pH。 a.过酸或过碱影响酶蛋白 的构象，使酶变性失活 b.影响酶分子中某些基团 的解离状态（活性中心 的基团或维持构象的一 些基团） c.影响底物分子的解离状 态 木瓜蛋白酶 胆碱脂酶 胃蛋白酶

温度的影响一方面是温度升高,酶促反应速度加快。100-另一方面，温度升高，酶80-的高级结构将发生变化或变性，导致酶活性降60低甚至丧失。40因此大多数酶都有一个最适温度。 在最适温20度条件下，反应速度最020304050大。6070809010Temperature °c酶对温度的耐受力与其存在状态有关

温度的影响 • 一方面是温度升高,酶 促反应速度加快。 • 另一方面,温度升高,酶 的高级结构将发生变化 或变性，导致酶活性降 低甚至丧失。 • 因此大多数酶都有一个 最适温度。 在最适温 度条件下,反应速度最 大。 • 酶对温度的耐受力与其 存在状态有关。 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 20 40 60 80 100 Temperature OC Relative Activity (%)

酶浓度对酶反应速度的影响一定条件下，若底物浓度足够大（>>【E]）反应速度与酶浓度成正比Vmax=Ks[E]Vmax[S]Km +[S][S]K3[E]V=Km +[S][E]酶浓度对反应速度的影响

酶浓度对酶反应速度的影响 酶浓度对反应速度的影响 [E]  Vmax=K3 [E] V= Vmax [S] Km + [S] 一定条件下，若底物浓度足够大（＞＞[E]），反应速度与酶浓度成正比

激活剂对酶反应速度的影响凡能提高酶活性的物质，都称为激活剂(activator)Ca2+Fe2+（1）无机离子：金属离子(K+ Na+ Mg2+ Zn2+Cu2+)、阴离子(CI- Br-）、氢离子（多种作用方式）(2）中等大小的有机分子：某些还原剂（GSH)、乙二胺四乙酸（EDTA）等。EDTA是金属螯合剂，能除去酶中的重金属杂质，从而解除重金属对酶的抑制作用。(3某些酶类：酶原激活过程中的酶类

激活剂对酶反应速度的影响 • 凡能提高酶活性的物质，都称为激活剂（activator） （1）无机离子：金属离子(K+ Na+ Mg2+ Zn2+ Fe2+ Ca2+ Cu2+)、阴离子(Cl- Br-)、氢离子（多种作用方式） （2）中等大小的有机分子：某些还原剂(GSH)、乙二胺四 乙酸（EDTA）等。 EDTA是金属螯合剂，能除去酶中的 重金属杂质，从而解除重金属对酶的抑制作用。 (3)某些酶类：酶原激活过程中的酶类

实验目的观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察不同底物、温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响

实验目的 观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色 的变化。 观察不同底物、温度、pH、激活剂与抑 制剂对唾液淀粉酶活性的影响

实验原理淀粉在睡液淀粉酶（含淀粉酶和少量麦芽糖酶）的作用下被逐步水解成单糖，水解的中间产物遇碘呈现不同的颜色：淀粉→不同大小分子的糊精→麦芽糖、葡萄糖蓝色不变紫色→暗褐色一→红色色

实验原理 淀粉在唾液淀粉酶（含淀粉酶和少量麦芽糖 酶）的作用下被逐步水解成单糖，水解的中间 产物遇碘呈现不同的颜色： 淀粉→不同大小分子的糊精→麦芽糖、葡萄糖 蓝色 紫色→暗褐色→红色 不变 色

根据水解液和碘反应的颜色，可以判断水解是否已完全，观察底物、温度、pH及激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响

根据水解液和碘反应的颜色，可以判断水 解是否已完全，观察底物、温度、pH及激 活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响