贵州师范大学：《生物学实验》课程教学课件（PPT讲稿）霉菌的制片与染色

霉菌的制片和简单染色

一、实验目的，学习并掌握观察霉菌形态的基本方法：初步了解霉菌的形态特征；学习并掌握霉菌的制片和简单染色基本技术

 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；  初步了解霉菌的形态特征；  学习并掌握霉菌的制片和简单染色基本技术

二、实验原理、1、霉菌：呈菌线体形态，但霉菌的菌丝和孢子比放线菌的粗得多。霉菌的菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，菌落与培养基间连接紧密，不易挑取，菌落正反面，边缘与中心的颜色、构造通常不一致，有霉味。菌丝的孢子较大，在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌丝和抱子及巨大的抱子囊

 1、霉菌：呈菌线体形态，但霉菌的菌丝 和孢子比放线菌的粗得多。霉菌的菌落形 态较大，质地疏松，外观干燥，不透明， 菌落与培养基间连接紧密，不易挑取，菌 落正反面，边缘与中心的颜色、构造通常 不一致，有霉味。菌丝的孢子较大，在低 倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌丝和 孢子及巨大的孢子囊

2、制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液用此染液做霉菌制片的特点是细胞不变形具有杀菌、防腐作用，不易干燥，能保持较长时间，能防止孢子四处飞散，棉蓝具有一定的染色作用，染液的蓝色能增大反差。（如果用水封片，常因渗透作用而膨胀，水也易使菌丝、孢子和气泡混为一团，影响观察。)

孢子囊葡萄菌丝饱囊梗根霉茵10x10曲霉菌10x10

分生SRC1S福孢子C66C29S次生小梗初生小梗顶囊分生孢子梗务器足细胞曲霉slnagadnos厨自联创术出工生国养驾的服安间

.OL-5一孢子囊Lo囊轴芽孢子囊托孢囊梗葡甸枝接合孢子囊假根图2-11根霉的形态和构造

三、实验器材1菌种：毛霉48h马薯琼脂平板垃羊物黑曲霉48h板培养物2、溶液试酸棉蓝溶液丶3、仪器及酒精灯、镊盖玻片、解50%乙醇。Bala百型重庆市物种资原基础放属库

 1、菌种：毛霉48h马铃 薯琼脂平板培养物、  黑曲霉48h马铃薯琼脂平 板培养物  2、溶液试剂：乳酸石炭 酸棉蓝溶液  3、仪器及其他用品： 酒精灯、镊子、载玻片、 盖玻片、解剖针、显微镜、 50%乙醇

四、实验步骤1、直接制片观察（1）在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，（2）用镊子从生长有霉菌的斜面挑取霉菌菌丝（3）用50%的乙醇浸润，洗去脱落孢子再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下（4）放入载玻片上的液滴中，仔细地用解剖针将菌丝分散开来（5）盖上盖玻片（勿使产生气泡，且不要再移动盖玻片）。（6）镜检：先用低倍镜。再转换高倍镜镜检并记录观察结果

 1、直接制片观察  （1）在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液。  （2）用镊子从生长有霉菌的斜面挑取霉菌菌丝  （3）用50%的乙醇浸润，洗去脱落孢子再用蒸馏水 将浸过的菌丝洗一下  （4）放入载玻片上的液滴中，仔细地用解剖针将菌 丝分散开来。  （5）盖上盖玻片（勿使产生气泡，且不要再移动盖 玻片）。  （6）镜检：先用低倍镜。再转换高倍镜镜检并记录 观察结果

2、透明胶带法：（1）、在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液（2）、食指与拇指黏在一段透明胶带两端，使胶带呈U形，胶胶面面朝下（3）、胶面轻触霉菌表面（4）、将黏在胶面的菌体浸入无国的究载玻片上的乳酸石炭酸棉蓝染色液中，并将胶带两端固定在载玻片两端（5）、低倍镜、高倍镜镜检图N-2透明胶带法示意阳

 2、透明胶带法：  （1）、在载玻片上滴加一滴乳 酸石炭酸棉蓝染色液  （2）、食指与拇指黏在一段透 明胶带两端，使胶带呈U形，胶 面朝下  （3）、胶面轻触霉菌表面  （4）、将黏在胶面的菌体浸入 载玻片上的乳酸石炭酸棉蓝染色 液中，并将胶带两端固定在载玻 片两端  （5）、低倍镜、高倍镜镜检