厦门大学：《微生物学实验》课程教学课件（讲稿）细菌总数的测定

实验3细菌总数的测定一目的要求了解微生物数量的测定方法，掌握平板菌落计数的原理和方法二 基本原理平板菌落计数法是将待测菌液经过适当的稀释涂布在平板上：经过培养后在平板上形成肉眼可见的菌落。统计菌落数，根据稀释倍数和取样量技术按出样品细胞密度

实验3 细菌总数的测定 一 目的要求 了解微生物数量的测定方法，掌握平板菌 落计数的原理和方法 二 基本原理 平板菌落计数法是将待测菌液经过适当的稀释， 涂布在平板上；经过培养后在平板上形成肉眼 可见的菌落。统计菌落数，根据稀释倍数和取 样量技术按出样品细胞密度

显微镜直接计数To calculate numberRidges that support coverslipofsample:iare 0=1.5×10Number/mm?added here; care must beMicroscopic observation; all cells areonnottoalleNumber/mm?iverslipand slideis0.02mmweencounted in large square:12 cellsWholeelpraomn.25.randmm)rod severnl180are oountedandNumber /cm’ (ml)atotaiof1mmtotal volume of 0.02mm

显微镜直接计数

平板菌落计数0. 5ml0. 5 ml0.5ml0.5ml0. 5 ml0.5ml51各各O210.2ml3各0.2m10-110-大肠杆薯悬液10-310~410~810-倒平板各约15ml培养图YI-3平板菌落计数操作步骤

平板菌落计数

三操作程序无菌平皿编号一→制备大肠杆菌稀释液一倾注平板→培养(48h)→计数

三 操作程序 无菌平皿编号→制备大肠杆菌稀释液→ 倾注平板→ 培养(48h) → 计数

四注意事项倒平板时要注意控制培养基的温度稀释操作时，要尽量减少样品稀释误差，而且每个稀释度的菌液应各用一支无菌吸管。为使菌落能在平板上均匀分布，样品液加入平皿后，应尽快倾注培养基并旋转混匀五思考题要测定某种液体饮料中的活细菌总数，除了采用平板菌落计数法外，还可采用哪些方法？

四 注意事项  倒平板时要注意控制培养基的温度。  稀释操作时，要尽量减少样品稀释误差，而且 每个稀释度的菌液应各用一支无菌吸管。  为使菌落能在平板上均匀分布，样品液加入平 皿后，应尽快倾注培养基并旋转混匀。 五 思考题  要测定某种液体饮料中的活细菌总数，除了采 用平板菌落计数法外，还可采用哪些方法？

本次实验操作内容，第2周制备的分离平板的观察、计数挑单菌落：每组从分离平板挑4个单菌落转接于4支斜面中。制备菌悬液（由老师提供）倒平板，4个平板/组平板划线，4个平板/组

本次实验操作内容 • 第2周制备的分离平板的观察、计数。 • 挑单菌落：每组从分离平板挑4个单菌 落转接于4支斜面中。 • 制备菌悬液（由老师提供） • 倒平板，4个平板/组 • 平板划线，4个平板/组

实验报告实验报告实验名称：专业班级：姓名：学号：同组实验者：实验日期：年月一日实验报告日期：年二月一日实验目的实验原理材料与方法四、结果与分析五、讨论

实验报告 实验报告 实验名称： 专业班级： 姓名： 学号： 同组实验者： 实验日期： 年 月 日 实验报告日期： 年 月 日 一、实验目的 二、实验原理 三、材料与方法 四、结果与分析 五、讨论

1．材料与方法样品来源实验方法2、结果采用平板菌落计数法（倾注平板法），测定结果见表1。3、讨论本实验操作过程应着重注意哪些问题？表1土壤中细菌总数的测定结果平均菌落数稀释度菌落数细菌总数(CFU/g)10-310-5

1. 材料与方法 样品来源 实验方法 2、结果 采用平板菌落计数法（倾注平板法），测定结果见表1。 3、讨论 本实验操作过程应着重注意哪些问题？ 表1 土壤中细菌总数的测定结果 稀释度 菌落数 平均菌落数 细菌总数 （CFU/g） 1 2 3 10-3 10-5