厦门大学：《微生物学实验》课程教学课件（讲稿）土壤中细菌的分离与纯化

实验2土壤中细菌的分离与纯化实验目的通过从土壤中分离纯化细菌，初步掌握微生物的分离纯化方法和无菌操作技术观察来自土壤中的三大类群微生物的菌落形态特征/学习平板菌落计数的基本原理和方法

实验2 土壤中细菌的分离与纯化 一 、 实验目的  通过从土壤中分离纯化细菌，初步掌握微 生物的分离纯化方法和无菌操作技术。 观察来自土壤中的三大类群微生物的菌落形 态特征 学习平板菌落计数的基本原理和方法

二、基本原理1.自然界中各种微生物混杂生活在一起要研究某种微生物的特性，首先须使该微生物处于纯培养状态。从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化2.．土壤是微生物生活的大本营，可以从中分离到很多有价值的菌株。本实验将采用三种不同的培养基从土壤中分离不同类型的微生物

二、基本原理 1. 自然界中各种微生物混杂生活在一起， 要研究某种微生物的特性，首先须使该 微生物处于纯培养状态。从混杂的微生 物群体中获得只含有某一种或一株微生 物的过程称为微生物的分离与纯化。 2. 土壤是微生物生活的大本营，可以从中 分离到很多有价值的菌株。本实验将采 用三种不同的培养基从土壤中分离不同 类型的微生物

操作步骤制备土稀释液涂布平板培养条菌落平板划线分离转入斜面观察菌落特征，制片镜鉴菌体形态菌种保藏8

操作步骤 1. 制备土壤稀释液 2. 涂布平板 3. 培养 4. 条菌落 5. 平板划线分离 6. 转入斜面 7. 观察菌落特征，制片镜鉴菌体形态 8. 菌种保藏

操作步骤（1）-稀释平板法1、土壤溶液的稀释1 rrlrrl1rrl1 rrlrnl/rrl11克土样99 rrl9 rrl无菌水无菌水稀释分离过程示意图

1 、土壤溶液的稀释 操作步骤（1）-稀释平板法

2、1倾注平板培养基制人培养Ⅲ

2、 倾注平板

操作步骤（2）-平板划线法Hand cloeto tosoflapbdeLaop in pule blesFlame loopTurnplatethrough90°FlameTurn plateloopthrough90°Turn platethrough90CoolkopinaiLoopinhotses(hold nopsn)pentorfane

操作步骤（2）-平板划线法

平板划线分离的方法51.斜线法2.曲线法3.方格法4.放射法5.四格法Colonies

平板划线分离的方法 1.斜线法 2.曲线法 3.方格法 4.放射法 5.四格法

操作步骤（3）-培养

操作步骤（3）-培养

操作步骤（3）-移接斜面常用的接种方法划线接种点接种穿刺接种涂布接种液体接种注射接种

常用的接种方法 划线接种 点接种 穿刺接种 涂布接种 液体接种 注射接种 操作步骤（3）-移接斜面

挑菌落接种和分离工具36.31.接种针2.接种环3.接种钩4.5.玻璃涂棒6.接种圈7.接种锄8.小解剖刀一次性接种环/针

一次性接种环/针 挑菌落