福州大学：《酶学及其应用》课程教学课件（PPT讲稿）酶动力学引论

第五章 酶动力学引论 ◼ 底物浓度 ◼ 酶浓度 ◼ pH ◼ 温度 ◼ 激活剂 ◼ 抑制剂 主要内容——研究各因素对酶催化反应速 度的影响

第五章 酶动力学引论 ◼ 底物浓度 ◼ 酶浓度 ◼ pH ◼ 温度 ◼ 激活剂 ◼ 抑制剂 主要内容——研究各因素对酶催化反应速 度的影响

1.底物浓度对酶催化反应速度的影响 酶催化应速度与底物浓度的关系 p203 酶催化反应进程曲线 0 5 10 15 0 50 100 150 200 250 300 水解时间(min) DH(%) 537酸性蛋白酶，50℃，pH3,E/S=4%（酶与底物的浓度之比） AS1398中性蛋白酶50℃，pH7,E/S=2% 胰蛋白酶37℃，pH8,E/S=4% 胰酶37℃，pH8,E/S=4% Alcalase60℃,pH8,E/S=12AU(安森单位)/Kg 木瓜蛋白酶，60℃,pH5,E/S=10% Protamex50℃,pH6.5,E/S=24AU/Kg 一底物或其他底物浓度不变时 适用

1.底物浓度对酶催化反应速度的影响 酶催化应速度与底物浓度的关系 p203 酶催化反应进程曲线 0 5 10 15 0 50 100 150 200 250 300 水解时间(min) DH(%) 537酸性蛋白酶，50℃，pH3,E/S=4%（酶与底物的浓度之比） AS1398中性蛋白酶50℃，pH7,E/S=2% 胰蛋白酶37℃，pH8,E/S=4% 胰酶37℃，pH8,E/S=4% Alcalase60℃,pH8,E/S=12AU(安森单位)/Kg 木瓜蛋白酶，60℃,pH5,E/S=10% Protamex50℃,pH6.5,E/S=24AU/Kg 一底物或其他底物浓度不变时 适用

反应出现平衡的原因 0 5 10 15 20 25 0 100 200 300 水解时间（min） 水解度DH% E+S ES E+P1+P2

反应出现平衡的原因 0 5 10 15 20 25 0 100 200 300 水解时间（min） 水解度DH% E+S ES E+P1+P2

Note p2

Note p2

米氏方程 V=Vmax[S]/(Km+[S]) V = Kcat[E]t [S] /(Km + [S])

米氏方程 V=Vmax[S]/(Km+[S]) V = Kcat[E]t [S] /(Km + [S])

Kcat: 催化常数（酶的转化数） 每秒种每个酶分子转换底物的微摩尔数 Kcat/Km: 专一性常数 Km, Kcat, and kcat /Km

Kcat: 催化常数（酶的转化数） 每秒种每个酶分子转换底物的微摩尔数 Kcat/Km: 专一性常数 Km, Kcat, and kcat /Km

米氏方程的意义 ◼ 米氏常数为反应速度是最大反应速度一半时的 底物浓度，Km单位为摩尔浓度（mol/L） ◼ Km对于特定的反应条件而言是一个特征常数。 它只与酶的性质有关而与酶的浓度无关，不同 的酶，具有不同的Km值。 ◼ Km值作为常数只是对固定的底物、一定的温度、 一定的pH等条件而言的。 ◼ Km值可以反映酶同底物的亲和力

米氏方程的意义 ◼ 米氏常数为反应速度是最大反应速度一半时的 底物浓度，Km单位为摩尔浓度（mol/L） ◼ Km对于特定的反应条件而言是一个特征常数。 它只与酶的性质有关而与酶的浓度无关，不同 的酶，具有不同的Km值。 ◼ Km值作为常数只是对固定的底物、一定的温度、 一定的pH等条件而言的。 ◼ Km值可以反映酶同底物的亲和力

Km在实际应用中的作用 ◼ 鉴定酶 ◼ 判断酶的最适底物 ◼ 计算一定反应速度下的底物浓度 ◼ 了解酶的底物在体内具有的浓度水平 ◼ 判断反应方向或趋势 ◼ 判断抑制类型 是否复合MM方程 Note part2-10

Km在实际应用中的作用 ◼ 鉴定酶 ◼ 判断酶的最适底物 ◼ 计算一定反应速度下的底物浓度 ◼ 了解酶的底物在体内具有的浓度水平 ◼ 判断反应方向或趋势 ◼ 判断抑制类型 是否复合MM方程 Note part2-10

某酶促反应遵从Michaelis-Menten动力 学，酶的Km为2.4 × 10-4mol/L，当底物浓度 为0.05mol/L时，其反应速度为128mol毫升-1 分钟-1，若底物浓度为10-4mol/L后，其反应速 度为多少？ 如果一酶促反应[S]=0.5Km，则V值等于 多少Vmax?

某酶促反应遵从Michaelis-Menten动力 学，酶的Km为2.4 × 10-4mol/L，当底物浓度 为0.05mol/L时，其反应速度为128mol毫升-1 分钟-1，若底物浓度为10-4mol/L后，其反应速 度为多少？ 如果一酶促反应[S]=0.5Km，则V值等于 多少Vmax?

米氏方程的求法 Lineweaver-Burk plot

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