《农业微生物学》课程授课教案（实验讲义）1. 酵母菌形态及其菌落特征的观察 2. 显微镜直接计量微生物细胞的数量 3. 微生物对大分子化合物的水解 4. 酵母菌的酒精发酵作用

农业微生物学实验四操作流程 【实验内容】 1.酵母菌形态及其菌落特征的观察 2.显微镜直接计量微生物细胞的数量 3.微生物对大分子化合物的水解 4.酵母菌的酒精发酵作用 【实验材料】 1、每组：啤酒酵母斜面一支、培养皿一套，热带假丝酵母培养皿一套： 2、每两个组：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和巨大芽孢杆菌斜面各一支： 3、每组：美兰染液一瓶：无菌水试管1支：血球计数板一套：淀粉培养基和卵磷脂 培养基平板各1套：发酵管1个；灭菌红糖水1支。 【实验步骤】 【1、酵母菌菌落形态的观察】 取培养好的酵母菌平板一套，观察菌落大小、形态、颜色、质地、是否有光泽、突起 程度、边缘状况等。 【2、水压片法观察酵母菌的细胞形态】 取干净的载玻片一滴一滴美兰染液一用接种环挑起少量啤酒酵母一在染 液中混匀→用慑子取盖玻片→以45度角使其一边与美兰染液接触，缓缓放下盖玻片 →高倍镜下观察菌体形态和出芽生殖 【3、热带假丝酵母假菌丝的观察】 打开已培养皿盖，用10倍或40倍物镜对准平板上的盖玻片，直接观察

1 【实验内容】 1. 酵母菌形态及其菌落特征的观察 2. 显微镜直接计量微生物细胞的数量 3. 微生物对大分子化合物的水解 4. 酵母菌的酒精发酵作用 【实验材料】 1、每 组：啤酒酵母斜面一支、培养皿一套，热带假丝酵母培养皿一套； 2、每两个组：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和巨大芽孢杆菌斜面各一支； 3、每 组：美兰染液一瓶；无菌水试管 1 支；血球计数板一套；淀粉培养基和卵磷脂 培养基平板各 1 套；发酵管 1 个；灭菌红糖水 1 支。 【实验步骤】 【1、酵母菌菌落形态的观察】 取培养好的酵母菌平板一套，观察菌落大小、形态、颜色、质地、是否有光泽、突起 程度、边缘状况等。 【2、水压片法观察酵母菌的细胞形态】 取干净的载玻片 → 滴一滴美兰染液 → 用接种环挑起少量啤酒酵母 → 在染 液中混匀 → 用镊子取盖玻片 → 以 45 度角使其一边与美兰染液接触，缓缓放下盖玻片 → 高倍镜下观察菌体形态和出芽生殖 【3、热带假丝酵母假菌丝的观察】 打开已培养皿盖，用 10 倍或 40 倍物镜对准平板上的盖玻片，直接观察。 农业微生物学实验四操作流程

农业微生物学实验四操作流程 【4、显微镜直接计量微生物细胞的数量】 用接种环从斜面上取一环啤酒酵母→放入无菌水试管中一用振荡器充分混 匀→用无菌滴管取少许稀释液→滴在计数室平台→盖上专用盖玻片→在 显微镜下找计数室正中央的大方格一沿对角线取9个中方格→数菌数，记录 【5、微生物对大分子化合物的水解】 如图在淀粉培养基平板的相应位置分别点接 枯草芽孢杆菌和大肠杆菌（左）：在卵磷脂培养 基平板上分别点接金黄色葡萄球菌和芽孢杆菌 (右)。37℃倒置培养2-3天后，观察结果。 在淀粉培养基中加入卢哥氏碘液，观察是否出现透明圈。卵磷脂培养基直接观察是否出现透 明圈。 【6、酵母菌的酒精发酵作用】 取无菌发酵管→用10ml无菌吸管吸取糖液13一14ml放入发酵管→用接种环接 种啤酒酵母菌一环 →塞好棉塞，包好纸→28℃温箱中培养24-48小时 →检查发 酵液的气味，有无C02和酒精的生成 【实验结果】 1、绘制啤酒酵母营养细胞、出芽生殖和热带假丝酵母假菌丝的形态图。 2、记录啤酒酵母计数结果（表9-1），并计算每毫升酵母菌的细胞数量。 3、将大分子水解结果填入表15-1。 4、记录酵母菌酒精发酵的结果（有无酒香味，有无C02和酒精的生成）。 5、完成课后讨论题

农业微生物学实验四操作流程 2 【4、显微镜直接计量微生物细胞的数量】 用接种环从斜面上取一环啤酒酵母 → 放入无菌水试管中 → 用振荡器充分混 匀 → 用无菌滴管取少许稀释液 → 滴在计数室平台 → 盖上专用盖玻片 → 在 显微镜下找计数室正中央的大方格 → 沿对角线取 9 个中方格 → 数菌数，记录 【5、微生物对大分子化合物的水解】 如图在淀粉培养基平板的相应位置分别点接 枯草芽孢杆菌和大肠杆菌（左）；在卵磷脂培养 基平板上分别点接金黄色葡萄球菌和芽孢杆菌 （右）。37℃倒置培养 2-3 天后，观察结果。 在淀粉培养基中加入卢哥氏碘液，观察是否出现透明圈。卵磷脂培养基直接观察是否出现透 明圈。 【6、酵母菌的酒精发酵作用】 取无菌发酵管 → 用 10ml无菌吸管吸取糖液 13－14ml放入发酵管 → 用接种环接 种啤酒酵母菌一环 → 塞好棉塞，包好纸 → 28℃温箱中培养 24－48 小时 → 检查发 酵液的气味，有无 CO2 和酒精的生成 【实验结果】 1、绘制啤酒酵母营养细胞、出芽生殖和热带假丝酵母假菌丝的形态图。 2、记录啤酒酵母计数结果（表 9-1），并计算每毫升酵母菌的细胞数量。 3、将大分子水解结果填入表 15-1。 4、记录酵母菌酒精发酵的结果（有无酒香味，有无 CO2 和酒精的生成）。 5、完成课后讨论题。 B E M A