厦门大学：《现代生物实验学》课程教学课件（PPT讲稿）实验四 细菌转导

实验四 细菌转导 厦门大学生命科学学院

实验四 细菌转导 厦门大学生命科学学院

实验目的 ◼ 通过大肠杆菌噬 菌体专一性转导 半乳糖发酵基因 学习掌握局限性 转导的原理，掌 握转导实验的基 本方法

实验目的 ◼ 通过大肠杆菌噬 菌体专一性转导 半乳糖发酵基因 学习掌握局限性 转导的原理，掌 握转导实验的基 本方法

噬菌体介绍 噬菌体是指细菌病毒 生活周期：吸附、侵入、 复制合成、装配、释放 •烈性噬菌体 如T4 •温和噬菌体 如、Mu-1、P1和P2等

噬菌体介绍 噬菌体是指细菌病毒 生活周期：吸附、侵入、 复制合成、装配、释放 •烈性噬菌体 如T4 •温和噬菌体 如、Mu-1、P1和P2等

噬菌体结构

噬菌体结构

噬菌体组装

噬菌体组装

λ噬菌体载体

λ噬菌体载体

证明遗传 物质是 DNA而非 蛋白质的 Hershey￾Chase实验

证明遗传 物质是 DNA而非 蛋白质的 Hershey￾Chase实验

溶源菌的形成 噬菌体整合进大肠杆菌 染色体中的固定位点上， 这个位点在gal(半乳糖代 谢基因)和bio(生物素合 成基因)之间，这位点称 为BOB’，它与的附着 位点POP’有相同的核心 序列区，由15bp组成， 它们通过同源单交换发 生整合，形成溶源菌

溶源菌的形成 噬菌体整合进大肠杆菌 染色体中的固定位点上， 这个位点在gal(半乳糖代 谢基因)和bio(生物素合 成基因)之间，这位点称 为BOB’，它与的附着 位点POP’有相同的核心 序列区，由15bp组成， 它们通过同源单交换发 生整合，形成溶源菌

实验原理 ◼ 转导定义： 以噬菌体作为媒介将一个细胞（供体） 的遗传物质传递给另一个细胞（受体） 的过程。 ◼ 普遍性转导 P1和P2 ◼ 局限性转导 λ λdg λdb

实验原理 ◼ 转导定义： 以噬菌体作为媒介将一个细胞（供体） 的遗传物质传递给另一个细胞（受体） 的过程。 ◼ 普遍性转导 P1和P2 ◼ 局限性转导 λ λdg λdb

实验材料 ◼ 菌株：E.coli k12(λ)gal+ k12Sgal- ◼ 用品：Eppondoff离心管(1.5ml/4.5ml) Tip枪头(1ml/200ul/20ul) ◼ 培养基(肉汤固体/半固体/加倍肉汤/EMB) ◼ 试剂：氯仿、磷酸buffer

实验材料 ◼ 菌株：E.coli k12(λ)gal+ k12Sgal- ◼ 用品：Eppondoff离心管(1.5ml/4.5ml) Tip枪头(1ml/200ul/20ul) ◼ 培养基(肉汤固体/半固体/加倍肉汤/EMB) ◼ 试剂：氯仿、磷酸buffer