厦门大学：《细胞与显微技术实验》课程教学资源（讲义）石蜡切片法

一生物显微制片技术根据材料的性质和制作法的不同，生物显微制片技术可以分为切片法与非切片法两大类：·切片法：徒手切片法；石蜡切片法；火棉胶切片法；冰冻切片法等。涂布法；压片法等。·非切片法：包括整体封藏法：本模块主要介绍石蜡切片法、冰冻切片法。2厦门大学生命科学国家级实验教术范中心

生物显微制片技术 根据材料的性质和制作法的不同，生物显微制片技 术可以分为切片法与非切片法两大类： • 切片法：徒手切片法；石蜡切片法；火棉胶切片法； 冰冻切片法等。 • 非切片法：包括整体封藏法；涂布法；压片法等。 本模块主要介绍石蜡切片法、冰冻切片法

?石蜡切片法馨石蜡切片法是利用石蜡作为组织支撑物，对组织标本进行切片和染色观察的制片方法从取材开始，到制成切片标本为止，其间必须经过以下各主要步骤： 取材固定一、二、四、三、洗涤脱水五、透明六、透入与包理七、切片八、贴片九、染色十、封藏厦门大学生命科学国家级实验教术范中心

石蜡切片法 石蜡切片法是利用石蜡作为组织支撑物，对组织标 本进行切片和染色观察的制片方法 从取材开始，到制成切片标本为止，其间必须经过以下各主要 步骤： 一、取材 二、固定 三、洗涤 四、脱水 五、透明 六、透入与包埋 七、切片 八、贴片 九、染色 十、封藏

精实验十七（一）取材、固定、洗涤、脱水石蜡切片法、透明、透蜡、包埋一、实验目的固定、洗涤、脱水等各步骤的基本原1.理解取材、i理。2.了解取材、固定、洗涤、脱水等各步骤的注意事项。3.掌握取材、固定、洗涤、脱水等各步骤的操作方天爱门大学生命科学国家级实鉴教示范中心

实验十七 石蜡切片法（一）取材、固定、洗涤、脱水 、透明、透蜡、包埋 一、实验目的 1.理解取材、固定、洗涤、脱水等各步骤的基本原 理。 2.了解取材、固定、洗涤、脱水等各步骤的注意事 项。 3.掌握取材、固定、洗涤、脱水等各步骤的操作方 法

实验原理二、31.取材：用于制片的动植物材料应选择新鲜的，用陈腐材料制片，往往不能反映材料的真正情况。2.固定：固定是借助化学药品的作用,使细胞组织的形态保存下来,不使其改变形态和变质。厦门大学生命科学国家级实验教术范中心

1. 取材：用于制片的动植物材料应选择新鲜的，用陈腐 材料制片，往往不能反映材料的真正情况。 2. 固定：固定是借助化学药品的作用,使细胞组织的形 态保存下来,不使其改变形态和变质。 二、实验原理

固定液的特点与作用(1)迅速渗入组织,杀死原生质。在杀死的短时期中,细胞形态不致有所变化。，对组织各部分的渗透力相等，可使(2)必须具有渗透力，组织内外完全固定。(3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。(4)使细胞内的成分凝固或沉淀。(5)使组织变硬，具有一定的硬度。(6)固定以后能起到保存的作用厦门大学生命科学国家级实验教尔范中心

固定液的特点与作用 (1)迅速渗入组织,杀死原生质。在杀死的短时期中,细胞 形态不致有所变化。 (2)必须具有渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使 组织内外完全固定。 (3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。 (4)使细胞内的成分凝固或沉淀。 (5)使组织变硬，具有一定的硬度。 (6)固定以后能起到保存的作用

甲醛固定的原理甲醛通过与蛋白多肽链氨基酸侧链的功能基团，如氨基羟基、酰氨基等结合，使蛋白多肽分子间形成亚甲基桥(-CH2-)，蛋白质不再发生改变，保存原位。醛基与抗原蛋白氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的2空间构象发生改变，分子间交联形成的网络结构可能部分和完全遮盖抗原决定簇，使之不能完全暴露厦门大学生命科学国家级实验教术范中心

甲醛固定的原理 1. 甲醛通过与蛋白多肽链氨基酸侧链的功能基团，如氨基 、羟基、酰氨基等结合，使蛋白多肽分子间形成亚甲基 桥(-CH2-)，蛋白质不再发生改变，保存原位。 2. 醛基与抗原蛋白氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的 空间构象发生改变，分子间交联形成的网络结构可能部 分和完全遮盖抗原决定簇，使之不能完全暴露

1．取材的注意事项：材料应新鲜：动作要迅速：取病理材料时，应加对照。厦门大学生命科学国家级实验教术范中心

1. 取材的注意事项： 材料应新鲜； 动作要迅速； 取病理材料时，应加对照

固定的注意事项2.固定液以新配为好；固定的时间依材料的种类、性质、大小等而定；材料固定完毕，保存于加盖的容器，贴上标签。厦门大学生命科学国家级实验教术范中心

2. 固定的注意事项 固定液以新配为好 ； 固定的时间依材料的种类、性质、大小等而定； 材料固定完毕，保存于加盖的容器，贴上标签

T3.洗涤：洗涤是洗去渗入细胞内部的固定液。因材料中的固定液有的会妨碍染色：有的会发生沉淀或结晶，影响观察；有的会继续作用，使材料变坏等厦门大学生命科学国家级实验教术范中心

3.洗涤：洗涤是洗去渗入细胞内部的固定液。因材 料中的固定液有的会妨碍染色；有的会发生沉淀或 结晶，影响观察；有的会继续作用，使材料变坏等

洗涤的注意事项3.洗涤的时间要依固定剂的种类而定；固定液为酒精或酒精混合液，一般不冲洗含有铬酸、重铬酸钾等，必须用流水冲洗；长时间固定于福尔马林的应充分水洗。厦门大学生命科学国家级实验教术范中心

3. 洗涤的注意事项 洗涤的时间要依固定剂的种类而定； 固定液为酒精或酒精混合液，一般不冲洗； 含有铬酸、重铬酸钾等，必须用流水冲洗； 长时间固定于福尔马林的应充分水洗