《微生物学与免疫学实验》课程教学资源（讲义）细菌芽孢染色

微生物学与免疫学实验模块三微生物的形态观察、生理生化反应及鉴定细菌的茅孢染色模块三

微生物学与免疫学实验 模块三 模块三 微生物的形态观察、生理生化反应及鉴定 之 细菌的芽孢染色

主要内容细菌芽孢染色的原理芽孢简介细菌芽孢的结构细菌芽孢染色的原理研究芽孢的意义实验所需要的试剂及器械等操作步骤与注意事项染色结果观察实验目的与要求了解细菌芽孢染色法的原理掌握操作技术

实验目的与要求  了解细菌芽孢染色法的原理  掌握操作技术 细菌芽孢染色的原理  芽孢简介  细菌芽孢的结构  细菌芽孢染色的原理  研究芽孢的意义 实验所需要的试剂及器械等 操作步骤与注意事项 染色结果观察 主要内容

简介芽孢：有些细菌（多为G+）在一定条件下细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或圆形的休眠体。对高温、紫外线、干燥、电离辐射和很多有毒的化学物质都有很强的抗性。1个细菌细胞只形成1个芽孢，有的在细胞一端，有的在细胞中部。孢外壁茅孢衣皮层核心芽孢的形态

芽孢：有些细菌（多为G+）在一定条件下，细胞质高度浓缩脱 水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。对高温、 紫外线、干燥、电离辐射和很多有毒的化学物质都有很强的抗性。 1个细菌细胞只形成1个芽孢，有的在细胞一端，有的在细胞中部。 简介

细菌芽孢的结构孢外壁芽孢衣皮层核心：芽孢壁芽孢膜芽质芽核区

孢外壁 芽孢衣 皮层 核心：芽孢壁 芽孢膜 芽孢质 芽孢核区 细菌芽孢的结构

细菌芽孢染色的原理细菌的芽孢和菌体对染料的亲和性不同，采用复合染色法可以区分细菌的芽孢和菌体。由于芽孢壁厚通透性低，着色和脱色均较困难，如果先用一种弱碱性染料，如孔雀绿，在加热条件下，使染料进入菌体和芽孢，菌体中的染料可经水洗洗脱，而进入芽孢的染料则难以透出，再用复染液处理，从而使菌体和芽孢呈现不同的颜色，便于区别

细菌芽孢染色的原理  细菌的芽孢和菌体对染料的亲和性不同，采用复合染 色法可以区分细菌的芽孢和菌体。  由于芽孢壁厚通透性低，着色和脱色均较困难，如果 先用一种弱碱性染料，如孔雀绿，在加热条件下，使 染料进入菌体和芽孢，菌体中的染料可经水洗洗脱， 而进入芽孢的染料则难以透出，再用复染液处理，从 而使菌体和芽孢呈现不同的颜色，便于区别

研究芽的意义/消毒灭菌的最重要的指标筛选菌种/分类依据（芽的形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标。）生物农药，抗生素（短杆菌肽、杆菌肽等），整肠生（地衣芽孢杆菌活菌A?整肠生m

消毒灭菌的最重要的指标 筛选菌种 分类依据（芽孢的形态、大小和着生位 置是细菌分类和鉴定中的重要指标。） 生物农药，抗生素（短杆菌肽、杆菌肽 等），整肠生(地衣芽孢杆菌活菌) 研究芽孢的意义

细菌芽孢染色实验所需要的试剂与器械等菌株：枯草芽胞杆菌B.subtilis试剂：孔雀绿；番红器械：酒精灯；接种环；载玻片：显微镜等

细菌芽孢染色实验 所需要的试剂与器械等 菌株：枯草芽胞杆菌B.subtilis 试剂：孔雀绿；番红 器械：酒精灯；接种环；载玻片；显微镜等

细菌芽染色操作步骤涂片，1.制片固定自然晾干。2.孔雀绿加热染色5分钟3.水洗4.番红复染1分钟5.水洗6.镜检写标记阳性对照分离菌株

细菌芽孢染色操作步骤 1. 制片 （涂片，自然晾干，固定） 2. 孔雀绿加热染色5分钟 3. 水洗 4. 番红复染1分钟 5. 水洗 6. 镜检 阳性对照 分离菌株 写 标 记

注意事项注意掌握供试验菌种的培养时间染色加热过程要及时补充染液。切勿让涂片干凋

注意事项 注意掌握供试验菌种的培养时间 染色加热过程要及时补充染液， 切勿让涂片干涸

10μmSporulating B.subtilis

Sporulating B. subtilis