《医学免疫学》课程教学资源（实验指导）凝集反应——类风湿因子检测

类风湿因子检测一走就来！！！

1 类风湿因子检测

类风湿性关节炎（RheumatoidArthritis，RA）体内变性IgG刺激机体产生抗体（称为类风湿因子，IgM类），形成IC，沉积于全身小关节滑膜处，引起小关节红肿、变形直、失去运动功能。Normal JointOsteoarthritisRheumatoidArthritisMuscleBoneBoneerosionSynovialBursamembraneSynovialfluidJoint capsuleThinnedTendoncartilageCartilageBone endsSwolleninflamedrubtogetherSynovialmembraneMedicineetnNormalandArthriticJoints

类风湿性关节炎（ Rheumatoid Arthritis ，RA） 体内变性IgG刺激机体产生抗体（称为类风湿因子， IgM类），形成IC，沉积于全身 小关节滑膜处，引起小关节红肿、变形僵直、失去运动功能

类风湿性关节炎的临床表现早期指间关节、腕关节、掌指关节软组织肿胀、发僵晚期关节脱位畸形、强直

一、目的掌握间接凝集反应的原理。熟悉间接凝集法检测类风湿因子的方法。。了解类风湿因子的临床意义

一、目的 掌握间接凝集反应的原理。 熟悉间接凝集法检测类风湿因子的方法。 了解类风湿因子的临床意义

二、原理间接凝集反应将可溶性抗原事先吸附或偶联于与免疫无关的颗粒载体表面，制成致敏载体颗粒，再与相应抗体反应。间接凝集反应人++Y抗体载体颗粒可溶性抗原致敏颗粒凝集

二、原理  间接凝集反应： 将可溶性抗原事先吸附或偶联于与免疫无关的颗粒 载体表面，制成致敏载体颗粒，再与相应抗体反应

间接凝集反应检测类风湿因子原理类风湿因子（rheumatoidfactor，RF）是由于细菌、病毒等感染引起体内产生的以变性IgG（一种抗体）为抗原的一种自身抗体。一般医院主要采用胶乳凝集法测定类风湿因子。将IgG吸附于聚苯乙烯胶乳上，RF与其反应可产生凝集现象

 间接凝集反应检测类风湿因子原理： 类风湿因子（rheumatoid factor，RF）是由于细菌、 病毒等感染引起体内产生的以变性IgG（一种抗体）为抗 原的一种自身抗体。一般医院主要采用胶乳凝集法测定类 风湿因子。将IgG吸附于聚苯乙烯胶乳上，RF与其反应可 产生凝集现象

三、材料1．试剂盒：类风湿因子测定试剂盒（胶乳凝集法）合:Y28/A4283-40-201注野证号：沪食药路（8）字20胶乳液（人IgG包被胶乳）、类风湿因子（RF）测定试剂盒（胶乳凝集法）阳性对照、阴性对照泸食药监械生产许：20041062号反应片（6孔/板）上海捷门生物技术合作公司小SHANGHAIJIEMENBIO-TECHCO2．试剂：检测样本（患者血清）、生理盐水3.器材：移液器（1）、吸头（2）、Ep管（1）

三、材料 1. 试剂盒：类风湿因子测定试剂盒（胶乳凝集法） 胶乳液（人IgG包被胶乳）、 阳性对照、阴性对照 反应片（6孔/板） 2. 试剂：检测样本（患者血清）、生理盐水 3. 器材：移液器（1）、吸头（2）、Ep管（1）

四、方法1．加样本：在反应片孔中加入待检样本50ul（待检样本以生理盐水倍比稀释，稀释倍数为1：2、1：4、1：8、1：16），余2孔各加阴性对照、阳性对照1滴（约50ul）2．加胶乳液：每孔加1滴胶乳液于各样本中，轻微晃动反应片充分混匀。3.数分钟后仔细观察凝集反应发生情况

四、方法 1. 加样本：在反应片孔中加入待检样本50ul（待检样本以生理 盐水倍比稀释，稀释倍数为1：2、1：4、1：8、1：16）， 余2孔各加阴性对照、阳性对照1滴（约50ul） 2. 加胶乳液：每孔加1滴 胶乳液于各样本中，轻微晃动反应片 充分混匀。 3. 数分钟后仔细观察凝集反应发生情况

注意事项1.注意样本及胶乳液加样量的比例。2.本试剂样本而清加样量和阴性、阳性对照加样量均头50ul，保证液滴大小一致。3．若阴阳性对照结果出现异常，则试剂不可使用。4.试剂盒贮存于210℃，受热会导致试剂阳性率偏高，切勿冷冻

注意事项 1. 注意样本及胶乳液加样量的比例。 2. 本试剂样本血清加样量和阴性、阳性对照加样量均为 50ul，保证液滴大小一致。 3. 若阴阳性对照结果出现异常，则试剂不可使用。 4. 试剂盒贮存于2~10 ℃，受热会导致试剂阳性率偏高，切 勿冷冻

五、结果1:21:41:81:16阴性阳性对照对照RF效价：？注：“十”凝集“”不凝集

五、结果 1:2 1:4 1:8 1:16 阴性 对照 阳性 对照 ＋ ＋ － － － ＋ 注：“＋”凝集 “－”不凝集 RF效价：？