《医学免疫学》课程教学资源（实验指导）免疫标记技术——HCG检测（胶体金免疫层析法）

HCG检测（胶体金免疫层析法）

HCG检测 （胶体金免疫层析法）

实验目的掌握胶体金免疫层析技术检测HCG原理。了解检测HCG的临床意义通过定性检测人体尿液中HCG用于妊娠的早期诊断

一、实验目的  掌握胶体金免疫层析技术检测HCG原理。  了解检测HCG的临床意义——通过定性检测人体尿 液中HCG用于妊娠的早期诊断

二、实验原理人绒毛膜促性腺激素（HumanChorionicGonadotrophin）HCG）检测，文称为早早孕快速诊断。用胶体金标记抗体与相应抗原特异性结合而显色。HCG是妇女妊娠期由胎盘产生的一种糖蛋白激素，可在孕早期孕妇尿液中检验到，是早期检测怀孕的最好标志

二、实验原理  HCG是妇女妊娠期由胎盘产生的一种糖蛋白激素，可在孕 早期孕妇尿液中检验到，是早期检测怀孕的最好标志。  人绒毛膜促性腺激素（Human Chorionic Gonadotrophin， HCG）检测，又称为早早孕快速诊断。用胶体金标记抗体， 与相应抗原特异性结合而显色

■应用胶体金免疫层析双抗体夹心法的原理，试纸条用胶体金标记的抗HCGMcAb、抗HCGpAb、和羊抗鼠pAb固定于硝酸纤维膜上■检测时，当被检尿样虹吸通过胶体金标记抗体时，形成抗原抗体胶体金复合物，复合物继续爬行，通过包被的抗HCGpAb时，形成双抗体夹心胶体金复合物，在包被条带处皇现色带，过量的胶体金抗体继续爬行，和羊抗鼠pAb对照线形成胶体金免疫复合物，呈现色带

 应用胶体金免疫层析双抗体夹心法的原理，试纸条用胶体金标记的 抗HCG McAb、抗HCG pAb、和羊抗鼠 pAb固定于硝酸纤维膜上  检测时，当被检尿样虹吸通过胶体金标记抗体时，形成抗原抗体 胶体金复合物，复合物继续爬行，通过包被的抗HCG pAb 时， 形成双抗体夹心胶体金复合物，在包被条带处呈现色带，过量的 胶体金抗体继续爬行，和羊抗鼠pAb对照线形成胶体金免疫复合 物，呈现色带

试纸条的构造质控区（C)胶体金垫吸收垫样品垫NC膜（硝酸纤维素膜）测试区（T)衬板层析方向

测试区（T） 胶体金垫 质控区（C） 吸收垫 样品垫 NC膜（硝酸纤维素膜） 衬板 层析方向 试纸条的构造

（双抗体夹心）胶体金免疫层析法检测Y1=非8-hCG单克隆抗体反应原理Y2a抗a-hCG多克座挑体Y3=羊抗鼠多克整抗体E4Y1-hCG-Y2hCGY1-Y3鸭Y3C

胶体金免疫层析法检测（双抗体夹心）

夹心法反应原理正视图侧视图吸水垫质控线兔抗鼠IgG硝酸纤维素膜<抗AIV单抗1检测线PVC背衬金标垫金标抗AIV单抗2量A样品垫图图AIVAB阳性C 阴性

B 阳性 C 阴性 夹心法反应原理

三、实验材料早早孕诊断试纸条■尿样

三、实验材料 早早孕诊断试纸条 尿样

四、实验方法试剂条和尿样室温平衡（20-30℃）1将试纸条按箭头方向插入尿液标本中，，至少5秒钟后取出平放或者一直放在尿杯中等待判读结果。等待紫红色条带的出现，检测结果在3分钟时判读，10分钟判读无效。注意：尿液液面不可超过试纸条的标记线

 试剂条和尿样室温平衡（20-30℃）  将试纸条按箭头方向插入尿液标本中，至少5秒钟后取出 平放或者一直放在尿杯中等待判读结果。  等待紫红色条带的出现，检测结果在3分钟时判读，10分 钟判读无效。  注意： 尿液液面不可超过试纸条的标记线。 四、实验方法

胶体金免疫层析法技术优势：简单\现场\快速1.打开包装取出试纸条2.直接插入待测样品中3.目测读出结果（3-10分钟内）

胶体金免疫层析法技术优势：简单\现场\快速 1.打开包装取出试纸条 2.直接插入待测样品中 3. 目测读出结果（3-10分钟内）