沈阳师范大学：《细胞生物学实验》课程教学资源（教案讲义）实验四 液泡及线粒体的超活染色与观察

回顾贡能1.显微镜的“专业”操作。2.标准的生物科研绘图。3.暗视野下神奇的世界。4.实验设计：单盲、双盲、阳性对照、阴性对照。5.实验数据处理理念：组内重复，组间差异和组内差异

回顾 1.显微镜的“专业”操作。 2.标准的生物科研绘图。 3.暗视野下神奇的世界。 4.实验设计：单盲、双盲、阳性对照 、阴性对照。 5.实验数据处理理念：组内重复，组 间差异和组内差异

你的泪，能不能轻易流下来？眼痒眼胀感眼痛异物感眼红视疲劳针刺感畏光干涩感视力波动视力模糊烧灼感

你的泪，能不能轻易流下来？

·泪膜破碎时间（BUT）：轻轻在被检者结膜囊内滴一滴（1-2ul）1%荧光素钠，眼数次，自然眼平视前方应用泪膜镜直接观察泪膜，出现蓝色的裂隙的时间>10s为正常，<10s为泪液膜不稳定，<5s即为异常，BUT=0.7SBUT=2SBUT=10SBUT=7.2S

• 泪膜破碎时间（BUT）： • 在被检者结膜囊内滴一滴（1-2ul）1% 荧光素钠，轻轻眨 眼数次，自然睁眼平视前方. • 应用泪膜镜直接观察泪膜,出现蓝色的裂隙的时间， >10s 为正常，<10s 为泪液膜不稳定，<5s 即为异常。 BUT=0.7S BUT=2S BUT=7.2S BUT=10S

眼表活体染色角膜荧光素染色：荧光素染色阳性反映角膜上皮的缺损不连续），如出现点状、丝状染色或呈溃疡状表明角膜有损伤

眼表活体染色 • 角膜荧光素染色：荧光素染色阳性反映角膜上皮的缺损（ 不连续），如出现点状、丝状染色或呈溃疡状表明角膜有 损伤

实验三液泡及线粒体的超活染色与观察

实验三 液泡及线粒体的超 活染色与观察

预习问题·活体染色，超活染色概念及原理·谈谈你了解的线粒体和液泡系?线粒体和液泡系可以用什么染料进行超活染色？·为什么可以特异性的对线粒体或者液泡染色？

预习问题 • 活体染色，超活染色概念及原理. • 谈谈你了解的线粒体和液泡系. • 线粒体和液泡系可以用什么染料进行超活染色? • 为什么可以特异性的对线粒体或者液泡染色?

一、实验目的（1）掌握细胞器超活染色的原理及应用领域。（2）利用詹纳斯绿B染色，观察线粒体的基本形态与分布（3）利用中性红染色，观察植物液泡的形态与分布

一、实验目的 （1）掌握细胞器超活染色的原理及应用领域。 （2）利用詹纳斯绿B染色，观察线粒体的基本形态与分布。 （3）利用中性红染色，观察植物液泡的形态与分布

实验原理1.活体染色对生活有机体的细胞或组织某些结构着色，不影响细胞的生命活动和产生任何物理化学变化的一种染色方法。真实：观察生活状态下的细胞形态结构和生理病理状态

1.活体染色  对生活有机体的细胞或组织某 些结构着色，不影响细胞的生 命活动和产生任何物理化学变 化的一种染色方法。  真实：观察生活状态下的细胞 形态结构和生理病理状态。 二、实验原理

（超活染色）体内活染与体外活染活体染料：能进入活细胞，多为碱性性染料。中性红：细胞的液泡系染色；线粒体詹纳斯绿B和亮焦油紫：次甲基蓝：神经组织尼罗蓝可染原生动物的大核。虎红：结膜失活的细胞及变性细胞染色

体内活染与体外活染（超活染色） 活体染料：能进入活细胞，多为碱性性染料。 中性红：细胞的液泡系染色； 詹纳斯绿B和亮焦油紫：线粒体 次甲基蓝：神经组织 尼罗蓝可染原生动物的大核。 虎红：结膜失活的细胞及变性细胞染色

2.描述一下你了解的线粒体GolgiApparatusLvsosomPeroxisomeLAMPfOOTGCLNNucleusCCNB:AutophagosomeMAP.LC3D0EndosomeSATGT0tabs00EndoplasmicReticulumCALEMicrotubuleTURAIBOFocalAdhesionFiberAMembraneProteinsELCHJeuronalMarkersFMitochondrlaPDHACoated PltOtherCytoskeleton Proteinsctin SirressFibersCLTBOPNt

2.描述一下你了解的线粒体