沈阳师范大学：《细胞生物学实验》课程教学资源（教案讲义）实验八 贴壁细胞的传代培养

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消毒方式 擅长 不擅长 尽量避免 例 紫外消毒 表面 不能穿透的物体 活的、有活性的 桌面，空气，地面， 水？ 湿热灭菌 不怕水的、不怕热的 怕水的、怕热的 有活性的 水，布，玻璃，塑料 干热灭菌 不怕热的，不怕干燥的 怕热的、怕干燥的 有活性的 玻璃，某些塑料 过滤除菌 液体 固体，空气 贵的，哈哈哈 PBS、刀剪镊、抗生素、血清、细胞培养箱、三蒸水、胰蛋白酶、离心机、 DMEM、老鼠体表、96孔培养板、操作台、实验室地面、离心管、手、地面 、显微镜、Hank’s液

顾回实验室的设置模拟体外培养条件细胞的生存环境无菌环境的营造HDMEM、老鼠体表、操作台、培养瓶、离心管、解剖器械、实验室地面、J胰蛋白酶，PBS、离心机OOOBoe

实验室的设置 体外培养条件 无菌环境的营造 回 顾 • DMEM、老鼠体表、操作台、培养瓶、离心管、解剖器械、实 验室地面、胰蛋白酶，PBS、离心机

实验八贴壁细胞的传代培养QQQ8o

实验八 贴壁细胞的传代培养

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贴壁 细胞 的传 代培 养 概念 传代培养 原代培养 基本方法 传代培养 操作流程 细胞生长曲线 染菌判断方法 思维导图

预习问题（1）细胞依靠什么机制贴附在培养瓶壁上的？（2）贴壁的细胞和非贴壁的细胞形态上有什么区别？（3）所谓的“消化细胞”是什么意思，胃消化食物么？（4）如何判断细胞已经不在贴壁状态？（5）利用《沈阳师范大学动物细胞培养虚拟教学平台》了解动物贴壁细胞的传代过程。Oo

（1）细胞依靠什么机制贴附在培养瓶壁上的？ （2）贴壁的细胞和非贴壁的细胞形态上有什么区别？ （3）所谓的“消化细胞”是什么意思，胃消化食物么？ （4）如何判断细胞已经不在贴壁状态？ （5）利用《沈阳师范大学动物细胞培养虚拟教学平台》了解动物贴 壁细胞的传代过程。 预习问题

动物培养层次（干细胞）·器官培养：三维结构和功能·组织培养：基本不存在·细胞培养：细胞在体外条件下的生长，但不再形成组织的过程QQQ8o

动物培养层次 •器官培养：三维结构和功能（干细胞）。 •组织培养：基本不存在 •细胞培养：细胞在体外条件下的生长，但不再 形成组织的过程

中枢神经的组织切片脂肪的组织切片晚幼粒细胞一中幼粒细胞中性分叶核粒细胞不同发育阶段的粒细胞十二指肠组织切片OOao

脂肪的组织切片 十二指肠组织切片 中枢神经的组织切片 不同发育阶段的粒细胞

动物细胞体外培养的形态学特征根据其生长方式主要分为：1.贴壁依赖性细胞：贴附生长，接触抑制；2.非贴壁依赖性细胞：悬浮生长，密度抑制QQQ8oo

根据其生长方式主要分为： 1. 贴壁依赖性细胞：贴附生长，接触抑制； 2. 非贴壁依赖性细胞：悬浮生长，密度抑制； 一、动物细胞体外培养的 特征

(贴壁细胞)贴壁依赖性细胞(1)成纤维型细胞：“柳叶形”梭形或不规则形中胚层来源细胞如心肌细胞，血管内皮细胞等。放射状，江漩涡或火焰状走行人肝癌组织切片肝癌细胞HEPG-2鸡胚成纤维细胞OOBo

1、贴壁依赖性细胞（贴壁细胞） ： 鸡胚成纤维细胞 肝癌细胞HEPG-2 人肝癌组织切片 梭形或不规则形，“柳叶形” 。 ，如心肌细胞，血管内皮细胞等。 放射状,漩涡或火焰状走行

(2)上皮型细胞：扁平多角形，“铺石路状”内、外胚层的细胞，如消化管外皮细胞，肝脏，hela等。上皮细胞，人口腔上皮细胞真正的铺石路人肝癌细胞BEL-7402OOOBoe

扁平多角形，“铺石路状” 人口腔上皮细胞 真正的铺石路 人肝癌细胞 BEL-7402 内、外胚层的细胞，如消化管外皮细胞，肝脏 上皮细胞，hela等