沈阳师范大学：《细胞生物学实验》课程教学资源（教案讲义）实验八及十 动物贴壁细胞的传代培养

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消毒方式 擅长 不擅长 尽量避免 例 紫外消毒 表面 不能穿透的物体 活的、有活性的 桌面，空气，地面， 水？ 湿热灭菌 不怕水的、不怕热的 怕水的、怕热的 有活性的 水，布，玻璃，塑料 干热灭菌 不怕热的，不怕干燥的 怕热的、怕干燥的 有活性的 玻璃，某些塑料 过滤除菌 液体 固体，空气 贵的，哈哈哈 PBS、刀剪镊、抗生素、血清、细胞培养箱、三蒸水、胰蛋白酶、离心机、 DMEM、老鼠体表、96孔培养板、操作台、实验室地面、离心管、手、地面 、显微镜、Hank’s液

顾回实验室的设置模拟体外培养条件细胞的生存环境无菌环境的营造HDMEM、老鼠体表、操作台、培养瓶、离心管、解剖器械、实验室地面、J胰蛋白酶，PBS、离心机OOOBoe

实验室的设置 体外培养条件 无菌环境的营造 模拟 细胞的 生存环境 回 顾 无菌环境的营造 • DMEM、老鼠体表、操作台、培养瓶、离心管、解剖器械、实 验室地面、胰蛋白酶，PBS、离心机

基本实验室国、辅助实验室无菌室的基本设计动物细胞实验室净化台、CO02培养箱、倒置显微无菌室的基本设备镜等基本配置培养器血、盛装器血、金属材培养所需器血质用具等动物级辣基本培养液、血清、PBS、胰蛋白酶溶液等动物细胞培养基本试剂无菌、ph、分装、储存清洗包装动物细胞培养基本准备物理消毒，干热灭菌，湿热灭灭菌与消毒菌，滤过除菌，化学消等无菌操作ROOo

无菌操作 无菌室的基本设计 无菌室的基本设备 培养所需器皿 基本培养液、血清、PBS、胰蛋白酶溶液等 无菌、ph、分装、储存 基本实验室国、辅助实验室 净化台、CO2培养箱、倒置显微 镜等 培养器皿、盛装器皿、金属材 质用具等 清洗 包装 灭菌与消毒 物理消毒, 干热灭菌 ,湿热灭 菌 ,滤过除菌 ,化学消毒等 动物 细胞 实验 室及 基本 操作 动物细胞培养 基本准备 动物细胞培养 基本试剂 动物细胞实验室 基本配置

实验八动物细胞传代培养的虚拟仿真实训实验十动物贴壁细胞的传代培养QQ@oo

实验八 动物细胞传代培养的 虚拟仿真实训 实验十 动物贴壁细胞的传代 培养

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贴壁 细胞 的传 代培养 概念 传代培养 原代培养 补充学习 传代培养 操作流程 细胞生长曲线 染菌判断方法 思维导图

预习问题（1）细胞依靠什么机制贴附在培养瓶壁上的？（2）贴壁的细胞和非贴壁的细胞形态上有什么区别？（3）所谓的“消化细胞”是什么意思，胃消化食物么？（4）如何判断细胞已经不在贴壁状态？（5）利用《沈阳师范大学动物细胞培养虚拟教学平台》了解动物贴壁细胞的传代过程。Oo

（1）细胞依靠什么机制贴附在培养瓶壁上的？ （2）贴壁的细胞和非贴壁的细胞形态上有什么区别？ （3）所谓的“消化细胞”是什么意思，胃消化食物么？ （4）如何判断细胞已经不在贴壁状态？ （5）利用《沈阳师范大学动物细胞培养虚拟教学平台》了解动物贴 壁细胞的传代过程。 预习问题

一、原代培养鸡胚概念：PrimaryCulture，直胞、组织或器官开始的培养。。特点：最接近生物体的生活状遗传物质）。OO@oO

一、原代培养 概念：Primary Culture，直接从生物体获取细 胞、组织或器官开始的培养。 特点：最接近生物体的生活状态（形态，行为， 遗传物质）。 鸡胚

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试管动物 克隆动物 嵌合动物 HIV抗体 原代培养

动物培养层次（干细胞）·器官培养：三维结构和功能·组织培养：基本不存在·细胞培养：细胞在体外条件下的生长，但不再形成组织的过程QQQ8o

动物培养层次 •器官培养：三维结构和功能（干细胞）。 •组织培养：基本不存在 •细胞培养：细胞在体外条件下的生长，但不再 形成组织的过程

中枢神经的组织切片脂肪的组织切片晚幼粒细胞一中幼粒细胞中性分叶核粒细胞不同发育阶段的粒细胞十二指肠组织切片OOao

脂肪的组织切片 十二指肠组织切片 中枢神经的组织切片 不同发育阶段的粒细胞