山东第一医科大学（山东省医学科学院）：《分析化学》课程授课教案（打印版）第十章 紫外可见吸收分光光度法

泰山医学院 省级精品课程申报 教案 姓名 学年第一学期 时 节次 课程名称 分析化学Ⅱ 授课专业及层次2010级药学、临床药学 本科 授课内容 第十章紫外可见分光光度法1 学时数 3 教学目的 熟悉紫外可见分光光度法基本概念，掌握其基本原理和使用方法，了解紫外可见 分光光度计结构 而占 紫外可见分光度法基本原理 难点 基本概念、有机化合物分子结构于紫外吸收带关系 自学内容 紫外可见分光光度常用术语、偏离Lambert-Beer定律因素、紫外可见分光光度计 使用数具 多媒体 相关学科知识 物理化学、无机化学 教学法讲授、启发 讲授内容纲要、要求及时间分配（可加附页） 第章紫外可见分光光度法1 第一节紫外可见吸收光请的基本概念 一、紫外可见分光光度法 研究物质在紫外可见光区(200-400紫外区、400-800可见区)分子吸收光请的分析方法 光度法称为紫外可见分光光度法(ultraviolet and visible spectrophotometry,UV-vis) 紫外可见吸收光请属于分子光请中的电子光请。 、跃迁类型（主婴是有机化合物） 紫外可见吸收光请法研究分子中价电子在不同的分子轨道之间跃迁的能量关系。分子中 的价电子有处于。轨道上的σ电子，π轨道上的π电子和未参与成键而仍处于原子轨道中 的电子。分子轨道就有。成键轨道、·反键轨道、π成键轨道、π反键轨道和非键轨道 三种电子的能级高低顺序是：(o)<(π)〈()〈（π）〈(o) 1、。→。跃迁：处于。成键轨道上的电子吸收光能后跃迁到。反键轨道。饱和烃中电 子跃迁均为此类型，吸收波长小于200mm,一般不讨论此跃迁。 2、π→π‘跃迁：处于π成键轨道上的电子吸收光能后跃迁到π反键轨道。不饱和烃中 电子跃迁均为此类型，孤立的π→π'跃迁吸收波长在200m左右，共轭的π→π'跃迁 吸收波长)200nm,月强度大。（最有用的吸收光沸） 3、”→π跃迁：含有杂原子(O、S、N、P和卤素原子)不饱和基团，其非键轨道中的 孤对电子吸收光能后跃迁到π反键轨道。丽、醛、羧酸、酯电子跃迁均为此类型，吸收波 长一般在200-400mm,强度小。（最有用的吸收光谱）

@秦山医学院 省级精品课程申报 讲授内容纲要，要求及时间分配（可加附页） 4、n→。跃迁：含有杂原子(O、S,N,P和卤素原子)饱和基团，其杂原子中的孤对 电子吸收光能后跃迁到。'反键轨道。饱和烃中电子跃迁均为此类型，吸收波长在200m 左右，一般不讨论此跃迁。 四种类型跃迁所需能量大小顺序为：→>n→。>π→π‘>n→π。 对于无机化合物（主要是配合物）虽没有以上跃迁，但他们分子内会产生电荷迁移跃迁和 配位场跃迁 二、常用术语 1、吸收光谱（吸收曲线）：2、吸收峰：3、谷：4、肩峰：5、生色团（重点）：6、助色团 (重点)：7、红移（重点）：8、蓝（紫）移（重点）9、增色效应和减色效应：10、强带和 弱带。 第二节基本原理 当一束白光通过某一有色溶液时，一些波长的光被溶液吸收，另一些波长的光则透过， 透射光刺滋人眼而使人感觉到颜色的存在。人眼能感觉到的光称为可见光，不同波长的光 呈现颜色个同，因此溶液的颜色山投射光的波长所决定。物质对光的吸收具有选择性 一、透光率(T)和吸光度(A) 1、透光率：透射光的强度(【)与入射光强度(1)之比称为透光奉（透射比），用T表示 T=以 上、吸光度：进光米商负对质用人表示。4=一-7=经子 二、Lambert-Beer定律 当一束平行单色北通过均匀的非散射试样时，试样对光的吸光度与试样的浓度及厚度成 正比。用公式表示为：A=k上gT(单组份定量的依据) k:吸光系数，只与溶液的性质、入射光的波长和温度有关，其单位与浓度单位有关：©： 溶液浓度，其单位可以是molL或gL::溶液厚度，其单位是cm 1、(摩尔吸光系数)：L·mol·cm1,A=Ed 6-0.IME%

@泰山医学院 省级精品课程申报 讲授内溶纲要、要求及时间分配（可加附页） 3、A=A,+A,+…A。(吸光度具有加和性，多组分定量的依据) 4、Lambert.Beer定律一般溶液浓度小于0.01mol/L才成立. 三、偏离Lambert-Ber定律因素（自学内容）：化学因素、光学因素、透光率测量误差 第二节紫外可见分光光度计：1、主要部件及功能：2、仪器类型及特点：3、校正方法 第四节分析条件选择（主要是无机物分析） 一、仪器测量条件：投射率70%-10%：吸光度0.15-1.0：最大吸收波长 二、显色反应条件（主要是通过配位反应和氧化还原反应） 1、反应生成物必须在紫外可见光区有强吸收能力，即摩尔吸光系数较大，反应有较高的选 择性。 2、反应生成物组成恒定、稳定，显色条件易控制，测量结果有良好的重现性 对照性要好，显色剂与有色物的最大吸收波长差别要在60以上。 学生练习：P210:4、6、10、12(注意讲评解题要点)

④泰山医学院 省级精品课程申报 教案 姓名 学年第一学期 时al 特次 课程名称 分析化学Ⅱ 授课专业及层次 2010级药学、临床药学 本科 授课内容 第十章紫外可见分光光度法2 学时数 2 教学日的 熟悉紫外可见分光度法分析原理，掌握紫外可见分光度法常规分析方法，了解分 折条件的选择和数据处甲 点 紫外可见分光度法常规定量分析方法应用 难点 多组分的定量分析方法 自学内容 定性鉴别、纯度检查 使用数且 多媒体 相关学科知识 物理化学、无机化学 教学法 讲授、启发 讲授内容纲要，要求及时间分配（可加附页） 第章紫外可见分光光度法2 第五节紫外可见分光光度常规分析方法 一，定性鉴别 利用紫外可见分光光度法主要对有机物进行定性鉴别，定性鉴别的依据是对有紫外可见 吸收的有机化合物，根据吸收光谱的形状、吸收峰数目、最大吸收波长位臀和强度、相应 的吸光系数值。 自学解决的问题：吸收光谱相同的化合物是不是同一化合物？ 二、纯度检查（自学内容） 自学解决的问题：杂质如何通过紫外可见分光光度法。 、单组分的定量方法 根据Ber定律，物质在一定波长处的吸光度与浓度之间有线性关系。因此，只要选择 定的波长测定溶液的吸光度，即可求出浓度。通常应选被测物质吸收光清中的吸收峰处， 以提高灵敏度并诚少测量误差。 1、吸光系数法 根据Beer定律A=Ee,若l和吸光系数己知，即可根据测得的A求出被测物的浓度。 C=1 E●1 通常吸光系数可以从手册或文献中查到。该法只适用于单色光比较纯的情况下 2、标准曲线法 先配置一系列浓度不同的标准溶液（对照品溶液），在测定条件相同的情况下，分别测定 其吸光度，然后以标准溶液的浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标，绘制A-C曲线

泰山医学院 Taishan Medical University 省级精品课程申报 讲授内容纲要、要求及时间分配（可加附页） 若符合Beer定律，可得到一条通过原点直线，该直线称标准曲线。 在相同条件下测出试样溶液的吸光度，在标准曲线上查出试样溶液的浓度。 3、对照法 在同样条件下配置标准溶液和试样溶液，在选定波长出，分别测量吸光度，根据朗伯-比尔 定律： A,=8C,1 因同种物质、同台仪器及同一波长测定故1e相等，所以C,= A,=8C1 A 四、多组分定量方法 有两种或多种组分共存时，可根据各组分吸收光谱相互重叠的程度分别考虑测定方法。 1、组分a和b互不干扰 分别在各自最大吸收波长处测得溶液吸光度。即按单组分处理方法测量。 2、a对b有干扰，b对a无干扰 根据吸光度加和性原则处理。在a组分的吸收峰入处b组分没有吸收，而在.b的吸收 峰元，a组分也有吸收，山A,+h=A,°+A,=6,·C。·1+62”C1 5(4,-6,°C,0,C,= A 6”1 3、a对b有干扰，b对a有干扰，根据吸光度加和性原则处理。 4h=A+A=6,”Cn1+G.C1 A,=A,+A,=62.C。1+62C61 C,=4“-4" 4、两组分吸收光谱相互重叠，月其中一种组分存在等波长吸收 利用双波长法。若要消除b的干扰以测定a,可从b的吸收光谱上选择两个吸光度相 等的波长入，和九，，测定混合物的吸光度差值，然后根据△A值来计算a的含量。 4=A°+A，A=A,°+A2月4=A2”,△M=A,-A1=(e2”-e,”)C1 五、应用实例 1、弱酸碱解离常数的测定2、配合物稳定常数和配合彼得测定 学生练习：P210:13、14、15(注意讲评解题要点)