厦门大学：《现代生物实验学》课程教学资源（教案讲义）5.7_遗传转化

遗传转化实验 一、 仪器设备：高压蒸汽灭菌锅、洁净工作台、循环水式真空泵、电子天平、 恒温培养摇床、离心机、光照培养箱等。 二、 器具：搪瓷杯、搪瓷盘、100ml 三角烧瓶、250ml 三角瓶、试剂瓶、烧 杯、培养皿、移液管、解剖刀柄、刀片、长镊子、滤纸、pH 试纸（5.4-7.0）、 标签纸、药勺、封口薄膜、牛皮纸、线绳、牛皮筋、脱脂棉、1.5ml 的塑料 离心管、加液枪（100ul－1ml），枪头、枪头盒、细菌过滤器、0.22-0.45um 的虑膜、注射器等。 三、 实验材料：胡萝卜和水稻的愈伤组织 细菌菌株：根癌农杆菌菌株 EHA105 ， 携 带 表 达 载 体 PCAMBIA1301-Sag12-IPT-Nos. 四、 剂及其配制： LB 培养基的配制： 将下列组分溶解在 0.9L 蒸馏水中： 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 如果需要用 1N NaOH（10～15ml）调整 pH 至 7.0，再补足水至 1L 10ml 的 10mmol/l 的 AS（乙酰丁香酮）母液（100x）配制：称 19.6mg 的 AS， 先溶于少量甲醇中，然后慢慢加蒸馏水定容至 10ml，过滤除菌，分装成 200ul/ 管（每组 1 管），使用时将 200ul 的 AS 母液加入 20ml 的 MS 液体培养基中

遗传转化实验 一、 仪器设备：高压蒸汽灭菌锅、洁净工作台、循环水式真空泵、电子天平、 恒温培养摇床、离心机、光照培养箱等。 二、 器具：搪瓷杯、搪瓷盘、100ml 三角烧瓶、250ml 三角瓶、试剂瓶、烧 杯、培养皿、移液管、解剖刀柄、刀片、长镊子、滤纸、pH 试纸（5.4-7.0）、 标签纸、药勺、封口薄膜、牛皮纸、线绳、牛皮筋、脱脂棉、1.5ml 的塑料 离心管、加液枪（100ul－1ml），枪头、枪头盒、细菌过滤器、0.22-0.45um 的虑膜、注射器等。 三、 实验材料：胡萝卜和水稻的愈伤组织 细菌菌株：根癌农杆菌菌株 EHA105 ， 携 带 表 达 载 体 PCAMBIA1301-Sag12-IPT-Nos. 四、 剂及其配制： LB 培养基的配制： 将下列组分溶解在 0.9L 蒸馏水中： 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 如果需要用 1N NaOH（10～15ml）调整 pH 至 7.0，再补足水至 1L 10ml 的 10mmol/l 的 AS（乙酰丁香酮）母液（100x）配制：称 19.6mg 的 AS， 先溶于少量甲醇中，然后慢慢加蒸馏水定容至 10ml，过滤除菌，分装成 200ul/ 管（每组 1 管），使用时将 200ul 的 AS 母液加入 20ml 的 MS 液体培养基中