厦门大学：《现代生物实验学》课程教学课件（PPT讲稿）实验十四、石蜡切片法（三）切片、贴片.ppt_大学文库

实验十四石蜡切片法（三）切片、贴片一、实验原理切片是把包埋好的材料块用切片机切成所需厚度的切片带。贴片是用粘贴剂把切片平铺贴在载玻片上，以便于染色

二、试剂与器材 1.试剂：Haupt’s明胶粘片剂。 2.器材：切片机、切片刀、单面刀片、酒精灯、蜡铲、台木、毛笔、蜡带盘、载玻片、镊子、滴瓶、展片台

三、实验程序（一）切片 1. 切片前的准备工作（1）石蜡块的固着：先将蜡块用刀片切成方形或长方形，组织四周留下2—3mm宽的石蜡。点燃酒精灯，然后用烤热的蜡铲放在台木和蜡块之间，利用蜡铲的温度熔化两者的蜡，把蜡块粘附在台木上。（2 ）整修：用单面刀片将蜡块四周修整平行

2.切片机切片机的式样很多，一般常用的为轮转式切片机，这种切片机的夹物部分是上下移动，前后推进的，而夹刀部分则固定不动。通过调整控制刀片厚度的微动装置就可以切出不同厚度的连续切片

3．切片的方法（1）将已固定和修好的石蜡块台木装在切片机的夹物台上。（2）将护刀盖推至打开位置。（3）摇动快速进退手轮，使石蜡块与刀口贴近，但不超过刀口。（注意：在转动手轮时，应保证机头在红、绿线之间移动。）（4）调整石蜡块与刀口之间的角度与位置，刀片与石蜡切片约成15-30度。（5）调整厚度调节器到所需的切片厚度，一般4-10微米。（6）一切调整好后就可以切片。此时右手摇动大手轮，左手持毛笔将蜡带提起，摇转速度以每分钟40-50转为宜。（7）切成的蜡带到20-30厘米时，右手用另一支毛笔将蜡带挑起，平放在蜡带盘上（注意：靠刀面的一面较光滑朝下）

（二）贴片 1．取一清洁的载玻片，滴一小滴粘片剂于玻片中央，用手指涂抹均匀。 2．滴1-2滴蒸馏水于已涂粘片剂的载玻片上。 3．用刀片割一小段蜡带，放在水面上。注意蜡片光面贴于玻片上。并使之偏玻片的一端，另一端贴标签。 4．把玻片标本置于展片台上（温度保持在40-45ºC），直到蜡片伸展摊平。 5．展片后把玻片标本编好记号，放在平盘上

四、注意事项 1.要严格按照操作程序进行切片。 2.切片刀刀口锋利，应用时切忌手指触及刀口,并且防止切片刀跌落桌上或地面，以免发生刀伤事故。 3 .切片机工作完毕，应将大手轮处于锁紧状态，此时机头在最上端，将护刀盖推至合并位置。 4. 及时清除废蜡，保持设备清洁

五、思考题 1. 为什么切片分离不能形成蜡带？ 2 .为什么切出的蜡带弯曲？ 3. 哪些原因会引起蜡带上卷，切过刀口即破裂？应如何解决？