厦门大学:《现代生物实验学》课程教学课件(PPT讲稿)实验十四、石蜡切片法(三)切片、贴片

实验十四 石蜡切片法(三) 切片、贴片 一、实验原理 切 片 是把包埋好的材料块用切片机切成所需厚度的 切片带。 贴 片 是用粘贴剂把切片平铺贴在载玻片上,以便 于染色
实验十四 石蜡切片法(三) 切片、贴片 一、实验原理 切 片 是把包埋好的材料块用切片机切成所需厚度的 切片带。 贴 片 是用粘贴剂把切片平铺贴在载玻片上,以便 于染色

二、试剂与器材 1.试 剂:Haupt’s明胶粘片剂。 2.器 材:切片机、 切片刀、 单面刀片、 酒精灯、 蜡铲、台木、 毛笔、 蜡带盘、 载玻片、 镊子、 滴瓶、展片台
二、试剂与器材 1.试 剂:Haupt’s明胶粘片剂。 2.器 材:切片机、 切片刀、 单面刀片、 酒精灯、 蜡铲、台木、 毛笔、 蜡带盘、 载玻片、 镊子、 滴瓶、展片台

三、实验程序 (一)切片 1. 切片前的准备工作 (1)石蜡块的固着:先将蜡块用刀片切成方形或 长方形,组织四周留下2—3mm宽的石蜡。点燃酒精 灯,然后用烤热的蜡铲放在台木和蜡块之间,利用蜡 铲的温度熔化两者的蜡,把蜡块粘附在台木上。 (2 )整修:用单面刀片将蜡块四周修整平行
三、实验程序 (一)切片 1. 切片前的准备工作 (1)石蜡块的固着:先将蜡块用刀片切成方形或 长方形,组织四周留下2—3mm宽的石蜡。点燃酒精 灯,然后用烤热的蜡铲放在台木和蜡块之间,利用蜡 铲的温度熔化两者的蜡,把蜡块粘附在台木上。 (2 )整修:用单面刀片将蜡块四周修整平行

2.切片机 切片机的式样很多,一般常用的为轮转式切片机,这 种切片机的夹物部分是上下移动,前后推进的,而夹刀 部分则固定不动。通过调整控制刀片厚度的微动装置就 可以切出不同厚度的连续切片
2.切片机 切片机的式样很多,一般常用的为轮转式切片机,这 种切片机的夹物部分是上下移动,前后推进的,而夹刀 部分则固定不动。通过调整控制刀片厚度的微动装置就 可以切出不同厚度的连续切片

3.切片的方法 (1) 将已固定和修好的石蜡块台木装在切片机的夹物台上。 (2) 将护刀盖推至打开位置。 (3) 摇动快速进退手轮,使石蜡块与刀口贴近,但不超过刀口。 (注意:在转动手轮时,应保证机头在红、绿线之间移动。) (4) 调整石蜡块与刀口之间的角度与位置,刀片与石蜡切片约 成15-30度。 (5) 调整厚度调节器到所需的切片厚度,一般4-10微米。 (6) 一切调整好后就可以切片。此时右手摇动大手轮,左手持毛 笔将蜡带提起,摇转速度以每分钟40-50转为宜。 (7)切成的蜡带到20-30厘米时,右手用另一支毛笔将蜡带挑 起,平放在蜡带盘上(注意:靠刀面的一面较光滑朝下)
3.切片的方法 (1) 将已固定和修好的石蜡块台木装在切片机的夹物台上。 (2) 将护刀盖推至打开位置。 (3) 摇动快速进退手轮,使石蜡块与刀口贴近,但不超过刀口。 (注意:在转动手轮时,应保证机头在红、绿线之间移动。) (4) 调整石蜡块与刀口之间的角度与位置,刀片与石蜡切片约 成15-30度。 (5) 调整厚度调节器到所需的切片厚度,一般4-10微米。 (6) 一切调整好后就可以切片。此时右手摇动大手轮,左手持毛 笔将蜡带提起,摇转速度以每分钟40-50转为宜。 (7)切成的蜡带到20-30厘米时,右手用另一支毛笔将蜡带挑 起,平放在蜡带盘上(注意:靠刀面的一面较光滑朝下)

(二)贴片 1.取一清洁的载玻片,滴一小滴粘片剂于玻片中央, 用手指涂抹均匀。 2.滴1-2滴蒸馏水于已涂粘片剂的载玻片上。 3.用刀片割一小段蜡带,放在水面上。注意蜡片光面 贴于玻片上。并使之偏玻片的一端,另一端贴标签。 4.把玻片标本置于展片台上(温度保持在40-45ºC), 直到蜡片伸展摊平。 5.展片后把玻片标本编好记号,放在平盘上
(二)贴片 1.取一清洁的载玻片,滴一小滴粘片剂于玻片中央, 用手指涂抹均匀。 2.滴1-2滴蒸馏水于已涂粘片剂的载玻片上。 3.用刀片割一小段蜡带,放在水面上。注意蜡片光面 贴于玻片上。并使之偏玻片的一端,另一端贴标签。 4.把玻片标本置于展片台上(温度保持在40-45ºC), 直到蜡片伸展摊平。 5.展片后把玻片标本编好记号,放在平盘上

四、注意事项 1.要严格按照操作程序进行切片。 2.切片刀刀口锋利,应用时切忌手指触及刀口,并 且防止切片刀跌落桌上或地面,以免发生刀伤事 故。 3 .切片机工作完毕,应将大手轮处于锁紧状态, 此时机头在最 上端,将护刀盖推至合并位置。 4. 及时清除废蜡,保持设备清洁
四、注意事项 1.要严格按照操作程序进行切片。 2.切片刀刀口锋利,应用时切忌手指触及刀口,并 且防止切片刀跌落桌上或地面,以免发生刀伤事 故。 3 .切片机工作完毕,应将大手轮处于锁紧状态, 此时机头在最 上端,将护刀盖推至合并位置。 4. 及时清除废蜡,保持设备清洁

五、思考题 1. 为什么切片分离不能形成蜡带? 2 .为什么切出的蜡带弯曲? 3. 哪些原因会引起蜡带上卷,切过刀口即破裂?应 如何解决?
五、思考题 1. 为什么切片分离不能形成蜡带? 2 .为什么切出的蜡带弯曲? 3. 哪些原因会引起蜡带上卷,切过刀口即破裂?应 如何解决?
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