厦门大学：《现代生物实验学》课程教学资源（教案讲义）5.11_组织培养实验

组织培养实验 一、器设备： 高压蒸汽灭菌锅、洁净工作台、循环水式真空泵、电子天平、酸度测定仪、 光照培养箱 二、器具： 搪瓷杯、搪瓷盘、100ml 三角烧瓶（12 个/组）、250ml 三角瓶（2 个/组）、 试剂瓶、解剖刀柄与刀片、单面刀片、剪刀、长镊子、培养皿、移液管、漏斗、 量筒、烧杯（50、100、500、1000m1），酒精灯、火柴、玻璃棒、洗尔球、封口 薄膜、牛皮纸、线绳、牛皮筋、脱脂棉、滤纸、pH 试纸（5.4-7.0）、标签纸、称 量纸、药勺等。 三、实验材料：胡萝卜贮藏根、水稻幼胚 四、试剂及其配制： MS 培养基储备液的配制 成分 1 升储备液用量 （mg） 每 升 培 养 基 取 用 量 （ml） 20*储备液 1（大量元素） NH4NO3 KNO3 CaCl2.2H2O MgSO4.7H2O KH2PO4 33000 38000 8800 7400 3400 50 200*储备液 2（微量元素） KI H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 166 1240 4460 1720 50 5 5 5 200*储备液 3（铁盐） FeSO4.7H2O Na2.EDTA.2H2O 5560 7460 5 200*储备液 4（有机成分） 肌醇 烟酸 盐酸吡哆醇 盐酸硫胺素 甘氨酸 20000 100 100 20 400 5

组织培养实验 一、器设备： 高压蒸汽灭菌锅、洁净工作台、循环水式真空泵、电子天平、酸度测定仪、 光照培养箱 二、器具： 搪瓷杯、搪瓷盘、100ml 三角烧瓶（12 个/组）、250ml 三角瓶（2 个/组）、 试剂瓶、解剖刀柄与刀片、单面刀片、剪刀、长镊子、培养皿、移液管、漏斗、 量筒、烧杯（50、100、500、1000m1），酒精灯、火柴、玻璃棒、洗尔球、封口 薄膜、牛皮纸、线绳、牛皮筋、脱脂棉、滤纸、pH 试纸（5.4-7.0）、标签纸、称 量纸、药勺等。 三、实验材料：胡萝卜贮藏根、水稻幼胚 四、试剂及其配制： MS 培养基储备液的配制 成分 1 升储备液用量 （mg） 每 升 培 养 基 取 用 量 （ml） 20*储备液 1（大量元素） NH4NO3 KNO3 CaCl2.2H2O MgSO4.7H2O KH2PO4 33000 38000 8800 7400 3400 50 200*储备液 2（微量元素） KI H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 166 1240 4460 1720 50 5 5 5 200*储备液 3（铁盐） FeSO4.7H2O Na2.EDTA.2H2O 5560 7460 5 200*储备液 4（有机成分） 肌醇 烟酸 盐酸吡哆醇 盐酸硫胺素 甘氨酸 20000 100 100 20 400 5

次氯酸纳消毒液：取 30ml 次氯酸纳溶液，用蒸馏水定容至 100ml。现配现用。 75%的酒精：75ml 的 95%的酒精加水定容至 95ml。 0.2％的升汞溶液：称取 HgCl2 20 克，加蒸馏水至 4000ml。 1N 盐酸：取 8.25ml 的浓盐酸，加蒸馏水定容至 100ml。 1N NaOH：称 8g NaOH，用蒸馏水定容至 200ml。 0.8%的琼脂： 3%的蔗糖： 0.1mg/ml 的 2,4-D 溶液：取 25mg 的 2,4-D，加入少量 95%的酒精和 1N 的 NaOH 溶解，再加蒸馏水定容至 250ml。 0.1mg/ml 的 6-BA 溶液：取 25mg 的 6-BA，用少量 1N 的盐酸溶解，再加蒸馏 水定容至 250ml

次氯酸纳消毒液：取 30ml 次氯酸纳溶液，用蒸馏水定容至 100ml。现配现用。 75%的酒精：75ml 的 95%的酒精加水定容至 95ml。 0.2％的升汞溶液：称取 HgCl2 20 克，加蒸馏水至 4000ml。 1N 盐酸：取 8.25ml 的浓盐酸，加蒸馏水定容至 100ml。 1N NaOH：称 8g NaOH，用蒸馏水定容至 200ml。 0.8%的琼脂： 3%的蔗糖： 0.1mg/ml 的 2,4-D 溶液：取 25mg 的 2,4-D，加入少量 95%的酒精和 1N 的 NaOH 溶解，再加蒸馏水定容至 250ml。 0.1mg/ml 的 6-BA 溶液：取 25mg 的 6-BA，用少量 1N 的盐酸溶解，再加蒸馏 水定容至 250ml