厦门大学：《现代生物实验学》课程教学资源（教案讲义）5.1_GUS基因检测

GUS 基因检测 一、 仪器设备：恒温箱、超净工作台 二、 器具：1.5ml 的塑料管、镊子、解剖刀等 三、 材料：转化的愈伤组织 四、 试剂及其配制： 50mmol/l 的磷酸钠缓冲液（pH 7.0）：A 液：取 NaH2PO4.2H2O 3.12g 溶于蒸馏水， 定溶至 100ml。 B 液：取 Na2HPO4.12H2O 7.17g 溶于蒸馏水，定溶 100ml。取 A 液 39ml 与 B 液 61ml 混合，定容至 400ml，调 PH 至 7.0。 50mmol/L 铁氰化钾母液：称 3.295g，用蒸馏水定容至 200ml 50mmol/l 亚铁氰化钾母液：称 4.224g ，用蒸馏水定容至 200ml。 0.5mol/l EDTA 母液（pH8.0）： 药品 分子量 100ml 500ml EDTA Na2 2H2O 372.24 18.6g 93.06g 双蒸 H2O 80ml 400ml 用 NaOH 调 PH 至 8.0 6g 10g DdH2O 定容至 100ml 500ml GUS 检测液的配制：甲醇、Gluc、DMF 100mgGluc，先溶于 1ml 的 DMF。取 80ml 50mmol/l 的磷酸钠缓冲液（pH 7.0）， 加入 1ml 50mmol/L 铁氰化钾、1ml 50mmol/L 亚铁氰化钾和 2ml 0.5mol/l EDTA （PH 8.0），再加入已溶解的 Gluc，再加 20ml 的甲醇，混匀。（配制方法参考《现 代植物生理学实验指南》p348） 将配好的 GUS 检测液分装于 1.5ml 的塑料管中（1ml/管，1 组 1 管），－20°C 保存备用

GUS 基因检测 一、 仪器设备：恒温箱、超净工作台 二、 器具：1.5ml 的塑料管、镊子、解剖刀等 三、 材料：转化的愈伤组织 四、 试剂及其配制： 50mmol/l 的磷酸钠缓冲液（pH 7.0）：A 液：取 NaH2PO4.2H2O 3.12g 溶于蒸馏水， 定溶至 100ml。 B 液：取 Na2HPO4.12H2O 7.17g 溶于蒸馏水，定溶 100ml。取 A 液 39ml 与 B 液 61ml 混合，定容至 400ml，调 PH 至 7.0。 50mmol/L 铁氰化钾母液：称 3.295g，用蒸馏水定容至 200ml 50mmol/l 亚铁氰化钾母液：称 4.224g ，用蒸馏水定容至 200ml。 0.5mol/l EDTA 母液（pH8.0）： 药品 分子量 100ml 500ml EDTA Na2 2H2O 372.24 18.6g 93.06g 双蒸 H2O 80ml 400ml 用 NaOH 调 PH 至 8.0 6g 10g DdH2O 定容至 100ml 500ml GUS 检测液的配制：甲醇、Gluc、DMF 100mgGluc，先溶于 1ml 的 DMF。取 80ml 50mmol/l 的磷酸钠缓冲液（pH 7.0）， 加入 1ml 50mmol/L 铁氰化钾、1ml 50mmol/L 亚铁氰化钾和 2ml 0.5mol/l EDTA （PH 8.0），再加入已溶解的 Gluc，再加 20ml 的甲醇，混匀。（配制方法参考《现 代植物生理学实验指南》p348） 将配好的 GUS 检测液分装于 1.5ml 的塑料管中（1ml/管，1 组 1 管），－20°C 保存备用