华南师范大学：《遗传学》课程教学资源（实验指导）实验二 果蝇的单因子杂交

果蝇的单因子杂交根据孟德尔的颗粒遗传学理论，基因是一个独立的结构与功能单位，在杂合状态时不发生混淆，完整地从一代传递到下一代，由该基因的显隐性决定其在下一代的性状表现。单因子杂交是指对等位基因间的杂交。孟德尔第一定律指出，一对杂合状态的等位基因保持相对的独立性，其自交后代中表型分离比为3：1。本实验将观察果蝇单因子杂交后代的表型及其分离情况实验目的1.通过实验深刻理解孟德尔分离定律。2.学习遗传学实验结果记录及统计处理方法。二、实验材料黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster）的两个品系：野生型：长翅果蝇（+/+)突变型：残翅果蝇(vg/vg)野生型果蝇的双翅为长翅（+／+），翅长超过尾部。残翅果蝇（vg/，g）的双翅几乎没有，只留少量残痕，无飞翔能力。三、仪器设备立体解剖镜，恒温培养箱，天平，培养瓶及麻醉瓶，毛笔及白瓷板。四、药品试剂乙醚，玉米粉，琼脂，红糖，酵母粉，丙酸。五、实验步骤1，交配方式：用纯系残翅果蝇（雌）与长翅果蝇（雄）交配，此为正交实验；反交实验以长翅果蝇为母本，残翅果蝇为父本，由此得P1代。孔代雌雄个体相互交配，F2代出现性状分离，如下图所示。残翅（）×长翅（P+ / + vg/vg工F1长翅（早、3）+/vg1F2长翅、惨翅上图为正交实验果，同学们可自己列出反交实验过程

果蝇的单因子杂交 根据孟德尔的颗粒遗传学理论，基因是一个独立的结构与功能单 位，在杂合状态时不 发生混淆，完整地从一代传递到下一代，由 该基因的显隐性决定其在下一代的性状表现。单因子杂交是指一 对等位基因间的杂交。孟德尔第一定律指出，一对杂合状态的等 位基因保持相对的独立性，其自交后代中表型分离比为 3 ： l 。本 实验将观察果蝇单因子杂交后代的表型及其分离情况。 一、实验目的 1 ．通过实验深刻理解孟德尔分离定律。 2 ．学习遗传学实验结果记录及统计处理方法。 二、实验材料 黑腹果蝇 ( Drosophila melanogaster ) 的两个品系： 野生型：长翅果蝇 (+ ／ +) 突变型：残翅果蝇 (vg ／ vg) 野生型果蝇的双翅为长翅 (+ ／ +) ，翅长超过尾部。残翅果蝇 (vg ／， g) 的双翅几乎没有，只留少量残痕，无飞翔能力。 三、 仪器设备 立体解剖镜，恒温培养箱，天平，培养瓶及麻醉瓶，毛笔及白瓷 板。 四、药品试剂 乙醚，玉米粉，琼脂，红糖，酵母粉，丙酸。 五、实验步骤 1 ．交配方式：用纯系残翅果蝇 ( 雌 ) 与长翅果蝇 ( 雄 ) 交配，此 为正交实验；反交实验以长翅果蝇为母本，残翅果蝇为父本，由 此得 P1 代。孔代雌雄个体相互交配， F2 代出现性状分离，如下 图所示。 P 残翅 ( ♀ ) ×长翅 ( ♂ ) ＋ / ＋ vg/vg ↓ F1 长翅（♀、 ♂ ） ＋ /vg ↓ F2 长翅、惨翅 上图为正交实验果，同学们可自己列出反交实验过程

2，选野生型和残翅果蝇为亲本。雌蝇一定要选处女蝇，可在实验前2~3d陆续收集，雌雄个体分开培养，数目多少根据需要而定。3：首先把残翅处女蝇倒出麻醉，挑5只移到水平放置的杂交瓶中，再把长翅倒出麻醉，挑选5只雄蝇，移到上述杂交瓶中。等杂交亲本在杂交瓶中全部苏醒后，将杂交瓶直立，并移人25℃温箱中培养。同刚，按上述操作进行反交实验接种培养。注意贴好标签：4：7d后，释放杂交亲本。5：再过4一5d，F1成蝇开始出现，观察F1翅膀，连续检查2：3d，或在释放亲本7d后集中观察6选取正、反交各5对FI雌雄果蝇，分别移如一新培养瓶（这里不需用处女蝇），置25℃温箱中培养。77d后，释放FI亲本。8，再过4一5d，F2成蝇出现，开始观察。可连续统汁7-8d。被统计过的果蝇倒入水槽冲掉。六、实验结果1：观察并统计正、反交F1代的表型及个体数，比较正，反交实验结果，分析基因间的显隐性关系2观察并统计正、反交F2代的表型及各种表型的个体数，计算不同表型个体数的比例，比较正、反交实验结果3：根据你的结果，对该实验F2代的统计结果作X2测验。数据填入下表野生型（正、反交合突变型（正、反交合并）总计并)实验观察数（O）预期数(E)偏差（O—E）(O-E)2/E自由度：n—1X2:Z(O-E)2/E=交X2表，进行差异显著水平检验，确定假说的有效性。七、思考题1：杂交实验中为什么亲本雌蝇要选用处女蝇？2：在进行杂交和F1自交后一定时间为什么要释放杂交亲本？3，分析你的实验结果是否符合孟得尔分离定律？

2 ．选野生型和残翅果蝇为亲本。雌蝇一定要选处女蝇，可在实验 前 2 ～ 3d 陆续收集，雌雄个体分开培养，数目多少根据需要而 定。 3 ．首先把残翅处女蝇倒出麻醉，挑 5 只移到水平放置的杂交瓶 中，再把长翅倒出麻醉，挑选 5 只雄蝇，移到上述杂交瓶中。等 杂交亲本在杂交瓶中全部苏醒后，将杂交瓶直立，并移人 25 ℃ 温 箱中培养。同刚，按上述操作进行反交实验接种培养。注意贴好 标签： 4 ． 7d 后，释放杂交亲本。 5 ．再过 4 — 5d ， F1 成蝇开始出现，观察 F1 翅膀，连续检查 2 － 3d ，或在释放亲本 7d 后集中观察。 6 ．选取正、反交各 5 对 Fl 雌雄果蝇，分别移如一新培养瓶 ( 这里 不需用处女蝇 ) ，置 2 5 ℃ 温箱中培养。 7 ． 7d 后，释放 Fl 亲本。 8 ，再过 4 — 5d ， F2 成蝇出现，开始观察。可连续统汁 7 － 8d 。被统计过的果蝇倒入水槽冲掉。 六、实验结果 1 ．观察并统计正、反交 F1 代的表型及个体数，比较正，反交实 验结果，分析基因间的显隐性关系。 2 观察并统计正、反交 F2 代的表型及各种表型的个体数，计算不 同表型个体数的比例，比较正、反交实验结果。 3 ．根据你的结果，对该实验 F2 代的统计结果作 X 2 测验。数据 填入下表： 野生型 ( 正、反交合 并） 突变型 ( 正、反交合并 ) 总计 实验观察数 (O) 预期数 (E) 偏差 (O — E) (O — E) 2 /E 自由度： n — 1 X 2 ：∑ (O — E) 2 /E= 交 X 2 表，进行差异显著水平检验，确定假说的有效性。 七、思考题 1 ．杂交实验中为什么亲本雌蝇要选用处女蝇 ? 2 ．在进行杂交和 F1 自交后一定时间为什么要释放杂交亲本 ? 3 ．分析你的实验结果是否符合孟得尔分离定律 ?