南京农业大学：《兽医微生物学》实验课程教学课件（PPT讲稿）实验五 药敏试验

南京发业大学·动物医学院College ofVeterinary Medicine,Nanjing Agricultural University兽医微生物学实验马家乐jialema@njau.edu.cn教学楼OIE实验室B421

兽医微生物学实验 马家乐 jialema@njau.edu.cn 教学楼OIE实验室 B421

南京農业大学·动物医学院College ofVeterinary Medicine,Nanjing Agricultural University实验五药敏试验

实验五 ◆ 药敏试验

南京農业大学。动物医学院College ofVeterinary Medicine, NanjingAgricultural University实验目的1、掌握药敏试验的操作方法2、掌握药敏试验的原理及意义

1、掌握药敏试验的操作方法 2、掌握药敏试验的原理及意义 实验目的

南京農业大学。动物医学院Collegeof VeterinaryMedicine,NanjingAgriculturalUniversity药敏试验的意义：可预测抗菌治疗的效果，指导临床用药，避免由于用药不当，导致耐药菌株产生或造成人体伤害；“敏感”治疗可能有效；“耐药”肯定失败；发现或提示细菌耐药机制的存在，帮助临床医生选择合适的药物，避免产生或加重细菌的耐药；监测细菌耐药性，了解细菌的耐药变迁情况，掌握耐药菌感染的流行病学，以控制和预防耐药菌感染的发生和流行；

➢ 药敏试验的意义： ◼ 可预测抗菌治疗的效果，指导临床用药，避免由于用药不当，导致耐药菌 株产生或造成人体伤害； “敏感”治疗可能有效； “耐药” 肯定失败； ◼ 发现或提示细菌耐药机制的存在，帮助临床医生选择合适的药物，避免产 生或加重细菌的耐药； ◼ 监测细菌耐药性，了解细菌的耐药变迁情况，掌握耐药菌感染的流行病学 ，以控制和预防耐药菌感染的发生和流行；

南京農业大学。动物医学院CollegeofVeterinary Medicine,Nanjing Agricultural University药敏试验的原理：将含药纸片贴于已接种待检菌的平板上，药物即向琼脂周围扩散，敏感菌株在含药纸片周围的生长受到抑制，在含药纸片周围可出现抑菌环，环的大小与细菌对药物的敏感程度成正比关系。志盛证20172

➢ 药敏试验的原理： ◼ 将含药纸片贴于已接种待检菌的平板上，药物即向琼脂周围扩散，敏感菌 株在含药纸片周围的生长受到抑制，在含药纸片周围可出现抑菌环，环的 大小与细菌对药物的敏感程度成正比关系

南京農业大学·动物医学院College ofVeterinary Medicine, NanjingAgricultural University药敏试验参照标准行业标准：美国临床和实验室标准协会标准CLSl:TheClinicalandLaboratoryStandardsInstitute培养基：MHA培养基质控菌株：ATCC25922或ATCC35218接种物制备的浊度标准：0.5麦氏浓度标准或OD600=0.08~0.13

➢ 药敏试验参照标准 ◼ 行业标准：美国临床和实验室标准协会标准 CLSI：The Clinical and Laboratory Standards Institute ◼ 培养基： MHA培养基 ◼ 质控菌株：ATCC25922或ATCC35218 ◼ 接种物制备的浊度标准： 0.5麦氏浓度标准或OD600=0.08~0.13

南京農大学动物医学院CollegeofVeterinaryMedicine,NanjingAgricultural University药敏试验判定标准试验服告抑菌圈直径折点（mm）纸片含抗菌药物分组药量SR氟诺酮类(31）注：正在对氟诺酮类进行重新评估）见注释（2）B环丙沙星5ug>2116~20≤15B左氧氟沙星5uR≥1714~16≤13U>22洛美沙星10μg19~21≤18成U氧氟沙星5ug≥1613~15≤12U诺氯沙星10μg≥1713~16≤12010μg≥1815~17依诺沙基≤140加替沙星5ug≥1815~17≤14o吉米沙星5ug≥2016~19≤150≥1815~17≤14格耗沙星SugInv氟罗沙星5μg≥1916~18≤15唑诺酮类0西诺沙星100μg≥1915~18≤14O恭啶酸30μg≥1914~18≤13叶酸代谢途径抑制剂复方新诺明125/≥1611~15≤1023.75μgU磺胺药250或≥1713~16≤12300gU甲氧卡啶Sug≥1611~15≤10

➢ 药敏试验判定标准

南京广业大学爱。动物医学院College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University实验材料1、菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌2、培养基：普通琼脂平板3、药敏片：阿米卡星、链霉素、庆大霉素、卡那霉素、呋喃妥因、红霉素、复方新诺明...4、其他：镊子、酒精灯、接种环

1、菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌 2、培养基：普通琼脂平板 3、药敏片：阿米卡星、链霉素、庆大霉素、卡那霉素、 呋喃妥因、红霉素、复方新诺明. 4、其他：镊子、酒精灯、接种环 实验材料

南京農大学动物医学院Collegeof VeterinaryMedicine,NanjingAgriculturalUniversity实验内容I、每人取两块平板，接种对应的细菌，致密划线；2、用小镊子取药敏纸片贴于培养基上；3、做好标记，置37℃倒置培养，24小时后观察结果。C

实验内容 1、每人取两块平板，接种对应的细菌，致密划线； 2、用小镊子取药敏纸片贴于培养基上； 3、做好标记，置37℃倒置培养，24小时后观察结果

南京農业大学·动物医学院College ofVeterinary Medicine,Nanjing Agricultural University结果观察根据抑菌圈大小判断该菌对药物的敏感度。庆大霉素抑菌环含药纸片细菌菌苔氨芊青氟哌酸雪霉素以抑菌环直径之将药物纸片置于大小表示敏感度涂布菌液的平板上药敏试验（纸片扩散法）

结果观察  根据抑菌圈大小判断该菌对药物的敏感度