南京农业大学：《兽医微生物学》实验课程教学课件（PPT讲稿）实验六 细菌的生化试验

实验六细菌的生化试验 刘广锦

刘广锦

一、目的要求1、了解细菌生化试验在细菌学诊断上的重要意义，2、掌握几种生化试验的方法·二、实验材料·细菌微量发酵管试剂等

 一 、目的要求 • 1、了解细菌生化试验在细菌学诊断上的重要意义 • 2、掌握几种生化试验的方法 二、实验材料 • 细菌 • 微量发酵管 • 试剂等

细菌生化试验在细菌学诊断上的重要意义各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物或多或少地各有区别，可供鉴别细菌之用BergeysManunloSystematicBacteriologySECONN LITIONVolume Two伯杰氏系统细菌学手册

• 细菌生化试验在细菌学诊断上的重要意义 各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力 也不一样，因而代谢产物或多或少地各有区别，可供鉴别细菌之 用 伯杰氏系统细菌学手册

标准菌株结果阅读例子肺炎肺炎克雷伯氏菌ATCC35657WPOAPHLDCODCLCITHEOURFAPI菌种鉴定系统阴沟肠杆喘ATCC73047由法国生物-梅里埃公司生产的细菌数CES值分类分析鉴定系奇异变形杆菌ATCC35659统。可鉴定的细菌大于请麦牙黄单服菌A7CC51331800种。大肠埃希氏菌ATCC25922反应结果可能随时间改变

API菌种鉴定系统 由法国生物-梅里埃 公司生产的细菌数 值分类分析鉴定系 统。 可鉴定的细菌大于 800种

实验内容及操作糖或醇发酵试验1枸橡酸盐利用实验2、硫化氢实验：3、在尿素实验4以上均在微量发酵管中进行反应

三、实验内容及操作 • 1、 糖或醇发酵试验 • 2、 枸椽酸盐利用实验 • 3、 硫化氢实验 • 4、 尿素实验 • 以上均在微量发酵管中进行反应

5、靛基质（吲哚）试验：将细菌接种于蛋白陈水的试管中→置温箱中，37℃培养24-48h→取出试管→加乙醚1m1，振荡→沿壁加4一5滴对一二甲基氨基苯甲醛，观察结果。6、甲基红 （M一R） 试验:将细菌接种于葡萄糖蛋白水的试管中→置温箱中，37℃培养24-48h→取出试管→加甲基红4一5滴，摇匀。7、V-P试验:将细菌接种于葡萄糖蛋白陈水的试管中→置温箱中，37℃培养24-48h→取出试管→加V－P甲液0.6m1摇匀→加V一P乙液0.2ml，5min 之内看结果

5、靛基质（吲哚）试验： 将细菌接种于蛋白胨水的试管中→置温箱中，37℃培养 24-48h→取出试管→加乙醚1ml，振荡→沿壁加4－5滴对 二甲基氨基苯甲醛，观察结果。 6、 甲基红（M－R）试验： 将细菌接种于葡萄糖蛋白胨水的试管中→置温箱中，37℃ 培养24-48h→取出试管→加甲基红4－5滴，摇匀。 7、V－P试验： 将细菌接种于葡萄糖蛋白胨水的试管中→置温箱中，37℃ 培养24-48h→取出试管→加V－P甲液0.6ml摇匀→加V－P 乙液0.2ml，5min 之内看结果

8、运动性试验取直的接种针，火焰灭菌，沾取菌液，沿轴心穿刺接种于半固体培养基中，深入3-4cm，37℃培养24h后观察结果。作空白对照

8、运动性试验 取直的接种针，火焰灭菌，沾取菌液，沿轴心穿刺 接种于半固体培养基中，深入3-4cm， 37℃培养24h后 观察结果

糖发酵试验原理多糖一→单糖一→丙酮酸一→酸性产物(或产酸产气)一→pH ↓ －→指示剂呈酸性变色(若产气者有气泡出现)培养基：微量发酵管试剂：溴甲酚紫(pH7.o紫色-pH5.4黄色)结果:培养基是否有酸性变色(变黄)1应用：观察细菌对糖度的分解情况，常用于肠道杆菌的鉴定

糖发酵试验  原理 多糖－→单糖－→丙酮酸－→酸性产物(或产酸产 气)－→pH↓ －→指示剂呈酸性变色(若产气者有 气泡出现)  培养基：微量发酵管  试剂：溴甲酚紫(pH7.0紫色-pH5.4黄色）  结果:培养基是否有酸性变色(变黄)  应用：观察细菌对糖度的分解情况，常用于肠道杆 菌的鉴定

糖发酵试验结果判断结果描述反应现象分解X糖产酸、产气酸性变色、有气泡用“④”表示分解×糖产酸、不产气用“+"表示酸性变色、无气泡不分解XX糖培养基不变色用“-"表示

反应现象 结果描述 酸性变色、有气泡 分解××糖产酸、产气 用“⊕”表示 酸性变色、无气泡 分解××糖产酸、不产气 用“+”表示 培养基不变色 不分解××糖 用“-”表示 糖发酵试验结果判断

X糖发酵试验

糖发酵试验 ⊕ + -