《临床生物化学》课程教学资源（实验指导）第18章 临床化学实验室基础

附录一临床化学实验室基础第一节常用玻璃器血及量器的使用一、玻璃器血的使用与校正临床化学检验是临床检验的一个重要组成部分，临床化学检验须借助一些基本分析仪器和基本器材，对标本进行化学分析。一个临床化学实验室，要保证检验结果有较好准确性和较高灵敏度，除检验人员应具备较好的基础理论知识和扎实的业务素质外，仪器和设备的完好状态、容量器皿的准确度和玻璃器材的清洁度都要达到一定的要求。（一）玻璃器血的清洗1．新玻璃器皿的清洗新玻璃器皿均在不同程度上含有游离碱，应先放入2%盐酸中浸泡数小时，取出后，用自来水反复冲洗，再用温肥皂水(或洗衣粉溶液，洗涤剂溶液)浸泡、洗刷，用自来水冲干净。最后经蒸馏水冲洗3次，晾干或烘干备用。2.污染玻璃器皿的清洗清洗污染过血、尿等标本的试管或吸管时，应先将其中所含试样倒入盛有2%次氯酸溶液的容器中，先用水冲洗后，浸泡在重铬酸清洁液中过夜，再用自来水和蒸馏水冲洗。一般的试管、量瓶、烧杯等，先倒掉试样后，水冲洗2~3次，再用洗涤剂洗刷或浸泡，自来水冲洗干净后，再用蒸馏水冲洗1~2次，干燥后备用。吸管、滴管类器血用后应立即放在内盛有消毒液(如过氧乙酸)的玻璃筒内浸泡，次日取出流水冲洗，沥干后，浸泡在重铬酸清洁液中过夜，再用自来水和蒸馏水冲洗后干燥。3.无污染玻璃量器及处理方法用过的玻璃量器，凡确定无病原体或检验标本污染，流水冲洗后浸泡于重铬酸清洁液内数小时，然后用自来水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗2~3次。4．玻璃量器的特殊处理方法（1）被石蜡、凡士林或其他油脂类污染的玻璃量器要单独洗涤，洗涤前，首先去油脂（将量器倒放于具有强吸水力的几层厚纸上，置100℃烤箱中烘烤半小时，使油脂熔化由厚纸吸收，再置碱性溶液中煮沸趁热洗刷，即可去除油脂)，然后再按一般洗涤要求进行。（2）染料污染的玻璃量器，先用清水初步清洗，再置重铬酸清洁液或稀盐酸中浸泡可以除去；如使用3%盐酸乙醇溶液，清洗效果更好。（3）盛过强酸、强碱及高浓度试剂的玻璃量器，倾去液体后，应先用自来水冲洗数次

附录一 临床化学实验室基础 第一节 常用玻璃器皿及量器的使用 一、玻璃器皿的使用与校正 临床化学检验是临床检验的一个重要组成部分，临床化学检验须借助一些基本分析仪器 和基本器材，对标本进行化学分析。一个临床化学实验室，要保证检验结果有较好准确性和 较高灵敏度，除检验人员应具备较好的基础理论知识和扎实的业务素质外，仪器和设备的完 好状态、容量器皿的准确度和玻璃器材的清洁度都要达到一定的要求。 (一) 玻璃器皿的清洗 1．新玻璃器皿的清洗 新玻璃器皿均在不同程度上含有游离碱，应先放入 2%盐酸中浸泡数小时，取出后，用自 来水反复冲洗，再用温肥皂水(或洗衣粉溶液,洗涤剂溶液)浸泡、洗刷，用自来水冲干净。最 后经蒸馏水冲洗 3 次，晾干或烘干备用。 2．污染玻璃器皿的清洗 清洗污染过血、尿等标本的试管或吸管时，应先将其中所含试样倒入盛有 2%次氯酸溶液 的容器中，先用水冲洗后，浸泡在重铬酸清洁液中过夜，再用自来水和蒸馏水冲洗。一般的 试管、量瓶、烧杯等，先倒掉试样后，水冲洗 2~3 次，再用洗涤剂洗刷或浸泡，自来水冲洗 干净后，再用蒸馏水冲洗 1~2 次，干燥后备用。吸管、滴管类器皿用后应立即放在内盛有消 毒液(如过氧乙酸)的玻璃筒内浸泡，次日取出流水冲洗，沥干后，浸泡在重铬酸清洁液中过 夜，再用自来水和蒸馏水冲洗后干燥。 3．无污染玻璃量器及处理方法 用过的玻璃量器，凡确定无病原体或检验标本污染，流水冲洗后浸泡于重铬酸清洁液内 数小时，然后用自来水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗 2～3 次。 4．玻璃量器的特殊处理方法 (1) 被石蜡、凡士林或其他油脂类污染的玻璃量器要单独洗涤，洗涤前，首先去油脂(将 量器倒放于具有强吸水力的几层厚纸上，置 100℃烤箱中烘烤半小时，使油脂熔化由厚纸吸 收，再置碱性溶液中煮沸趁热洗刷，即可去除油脂)，然后再按一般洗涤要求进行。 (2) 染料污染的玻璃量器，先用清水初步清洗，再置重铬酸清洁液或稀盐酸中浸泡可以 除去；如使用 3%盐酸乙醇溶液，清洗效果更好。 (3) 盛过强酸、强碱及高浓度试剂的玻璃量器，倾去液体后，应先用自来水冲洗数次

再放一起洗涤。（4）微量元素测定的一整套玻璃器皿应单独清洗，先以稀硝酸浸泡，再用去离子水冲洗经过清洗之后的玻璃量器，其清洁与否的标志是当水面下降或上升时与器壁接触处形成正常的弯月面，水流出时器壁上无水珠附着。5.干燥玻璃量器经洗涤清洁后，一般多在晾架上倒挂自然干燥，也可置烤箱中80℃以下烤干洗净以后的滴定管、吸管等量出式量器对干燥要求并不十分严格，但对容量瓶等量入式量器必须予以干燥，否则会带来一定误差。6．几种洗涤液的配制和应用（1）清洁液（重铬酸清洁液)：清洁液配方较多，常用配方有：重铬酸钾1000g，加热水2L，搅拌使其溶解，待冷后，缓缓加入浓硫酸10L，加入硫酸时，速度不能过快，以免产生高热而使容器破裂。更不能把重铬酸钾水溶液加入硫酸中。以耐酸陶瓷缸为最佳容器。清洗时，将吸管、试管等玻璃器皿用耐酸塑料带扎紧后浸入，务必使管腔内注满清洁液。上述器血浸泡时间应在12h以上，然后取出，用流水冲洗干净，务必不让酸液有残留。比色器血不能刷洗，放在清洁液中浸泡6h以上，清洁效果较好。清洁液的吸湿性极强，可吸收空气中的水分而变稀，平时使用后，应及时加盖。清洁液的颜色由棕黄色变为绿色，表示效力已低应重新配制。（2）乙二胺四乙酸二钠洗液：使用50~100g/L乙二胺四乙酸二钠溶液，加热煮沸可洗脱玻璃仪器内壁之白色沉淀物(钙、镁盐类)和不易溶解的重金属盐类。（3）草酸洗液：可洗脱高锰酸钾之痕迹，如在草酸溶液中加入少量硫酸，则效果更佳。（4）硫代硫酸钠洗液：可除去碘液污染，稀酸性硫代硫酸钠溶液还可除去高锰酸钾污渍应根据玻璃器血污染源的不同而选择合适的洗涤液。（二）常用量器的校正临床化学实验用实验器血，品种虽多，但可分为量器和容器两大类。用于计量液体体积者称为量器。而用于贮存和运输各种液体者则称为容器，它们大多数由玻璃制成，故人们习惯上统称为玻璃仪器。量器和容器的正确使用都与实验结果的准确性有着直接联系，在实践中都是不可忽视的。一般的玻璃仪器虽然有标明“一等”和“二等”，但通常均未经个别鉴定。因此，用作定量的刻度吸管、容量瓶、滴定管及微量吸管等均需进行成批或个别校正检定。国家计量局对于容量仪器有“量入式”（或以“E”标记)和“量出式”（或以“A”标记)之称。量入式用于测定注入量器中的液体，而量出式则用于测定从量器中倾出液体。对吸量管而言量入式为包含量吸量管，用TC(tocontain)表示，量出式为泻出量吸量管，用TD(todeliver)

再放一起洗涤。 (4) 微量元素测定的一整套玻璃器皿应单独清洗，先以稀硝酸浸泡，再用去离子水冲洗。 经过清洗之后的玻璃量器，其清洁与否的标志是当水面下降或上升时与器壁接触处形成正常 的弯月面，水流出时器壁上无水珠附着。 5．干燥 玻璃量器经洗涤清洁后，一般多在晾架上倒挂自然干燥，也可置烤箱中 80℃以下烤干。 洗净以后的滴定管、吸管等量出式量器对干燥要求并不十分严格，但对容量瓶等量入式量器 必须予以干燥，否则会带来一定误差。 6．几种洗涤液的配制和应用 (1) 清洁液(重铬酸清洁液)：清洁液配方较多，常用配方有：重铬酸钾 1000g，加热水 2L，搅拌使其溶解，待冷后，缓缓加入浓硫酸 10L，加入硫酸时，速度不能过快，以免产生 高热而使容器破裂。更不能把重铬酸钾水溶液加入硫酸中。以耐酸陶瓷缸为最佳容器。清洗 时，将吸管、试管等玻璃器皿用耐酸塑料带扎紧后浸入，务必使管腔内注满清洁液。上述器 皿浸泡时间应在 12h 以上，然后取出，用流水冲洗干净，务必不让酸液有残留。比色器皿不 能刷洗，放在清洁液中浸泡 6h 以上，清洁效果较好。清洁液的吸湿性极强，可吸收空气中的 水分而变稀，平时使用后，应及时加盖。清洁液的颜色由棕黄色变为绿色，表示效力已低， 应重新配制。 (2) 乙二胺四乙酸二钠洗液：使用 50~100g/L 乙二胺四乙酸二钠溶液，加热煮沸可洗脱 玻璃仪器内壁之白色沉淀物(钙、镁盐类)和不易溶解的重金属盐类。 (3) 草酸洗液：可洗脱高锰酸钾之痕迹，如在草酸溶液中加入少量硫酸，则效果更佳。 (4) 硫代硫酸钠洗液：可除去碘液污染，稀酸性硫代硫酸钠溶液还可除去高锰酸钾污渍。 应根据玻璃器皿污染源的不同而选择合适的洗涤液。 (二) 常用量器的校正 临床化学实验用实验器皿，品种虽多，但可分为量器和容器两大类。用于计量液体体积 者称为量器。而用于贮存和运输各种液体者则称为容器，它们大多数由玻璃制成，故人们习 惯上统称为玻璃仪器。量器和容器的正确使用都与实验结果的准确性有着直接联系，在实践 中都是不可忽视的。一般的玻璃仪器虽然有标明“一等”和“二等”，但通常均未经个别鉴定。 因此，用作定量的刻度吸管、容量瓶、滴定管及微量吸管等均需进行成批或个别校正检定。 国家计量局对于容量仪器有“量入式”(或以“E”标记)和“量出式”(或以“A”标记)之称。 量入式用于测定注入量器中的液体，而量出式则用于测定从量器中倾出液体。对吸量管而言， 量入式为包含量吸量管，用 TC(to contain)表示，量出式为泻出量吸量管，用 TD(to deliver)

表示。TD吸量管使用时液体自然泻出后不吹，仅在管壁上停留数秒钟，使管内液体不再流出为止。TC吸量管使用时则需吹出最后的余滴。吸量管还有完全流出式与不完全流出式之分，完全流出式吸量管是指吸量管的容量包括了吸量管尖端不能自然流出的液体，使用时，要把最后不能自然流出的液体吹出。通常管壁上注有“吹”字。这种吸量管的分度线一直刻到下尖，数字排列自上而下递增或者递减，可以看到最上方标称容积的数字，但看不到最下方的“0”点。不完全流出式吸量管的标称容量不包括尖端最后不能自然流出的液体。它的刻度不到管尖，可以看到最上方的“0”点，也能看到最下方标称容积的数字。使用时待液体流到最下标线即应停止，此时流出的液体容积即为标称容积。在校正量器之前，必须先熟悉玻璃容量仪器的正确使用方法，校正时的使用方法必须和实际工作中的使用方法一致。校正量器的方法是从量器在某温度时所容纳的水重量，来推算真体积。由于量器的容积随温度而变化，所以，必须确定温度，量器才有其意义。温度的选择以接近实验室全年平均温度为佳，一般采用20~℃。例如，20℃1000ml的容量瓶，是指在20℃时，它的容积为1000ml；如果温度超过20℃，显然它的容积大于1000ml；低于20℃，它的容积就不足1000ml。因此，校正时必须考虑三个因素：①温度对容量仪器的影响；②温度对水(或水银）比密的影响；③空气浮力对所称水的重量的影响。其中影响最大的是温度对水比密的影响，校正时的温度应尽可能选择靠近20℃。进行容量校正时，先称量出量器某温度下某一容量标线内容纳或放出的水重，然后根据下式将该温度下水的重量换算为20℃时的体积。Va= W式中Wt为某一温度下所称得的水重；r表示在20℃时充满容量为1L的玻璃量器的水在空气中不同温度下用黄铜法码所称得的重量。水在10-40℃间的r值列于附表1。附表1 水在 10-40℃间的r 值t,cr, gt, ℃r, gt, ℃r, g10 998.1421996.99994. 313211998.34996. 79994. 01223312998. 2623996.5934993.7113996.37998. 172435993.4014 998. 0625996.1436993. 072615 997.94995.9137992.74

表示。TD 吸量管使用时液体自然泻出后不吹，仅在管壁上停留数秒钟，使管内液体不再流出 为止。TC 吸量管使用时则需吹出最后的余滴。吸量管还有完全流出式与不完全流出式之分， 完全流出式吸量管是指吸量管的容量包括了吸量管尖端不能自然流出的液体，使用时，要把 最后不能自然流出的液体吹出。通常管壁上注有“吹”字。这种吸量管的分度线一直刻到下 尖，数字排列自上而下递增或者递减，可以看到最上方标称容积的数字，但看不到最下方的 “0”点。不完全流出式吸量管的标称容量不包括尖端最后不能自然流出的液体。它的刻度不 到管尖，可以看到最上方的“0”点，也能看到最下方标称容积的数字。使用时待液体流到最 下标线即应停止，此时流出的液体容积即为标称容积。 在校正量器之前，必须先熟悉玻璃容量仪器的正确使用方法，校正时的使用方法必须和 实际工作中的使用方法一致。校正量器的方法是从量器在某温度时所容纳的水重量，来推算 真体积。由于量器的容积随温度而变化，所以，必须确定温度，量器才有其意义。温度的选 择以接近实验室全年平均温度为佳，一般采用 20℃。例如，20℃1000ml 的容量瓶，是指在 20℃时，它的容积为 1000ml；如果温度超过 20℃，显然它的容积大于 1000ml；低于 20℃， 它的容积就不足 1000ml。因此，校正时必须考虑三个因素：①温度对容量仪器的影响；②温 度对水(或水银)比密的影响；③空气浮力对所称水的重量的影响。其中影响最大的是温度对 水比密的影响，校正时的温度应尽可能选择靠近 20℃。 进行容量校正时，先称量出量器某温度下某一容量标线内容纳或放出的水重，然后根据 下式将该温度下水的重量换算为 20℃时的体积。 V20= r Wt 式中 Wt 为某一温度下所称得的水重；r 表示在 20℃时充满容量为 1L 的玻璃量器的水， 在空气中不同温度下用黄铜法码所称得的重量。水在 10-40℃间的 r 值列于附表 1。 附表 1 水在 10-40℃间的 r 值 t，℃ r，g t，℃ r，g t，℃ r，g 10 998.14 21 996.99 32 994.31 11 998.34 22 996.79 33 994.01 12 998.26 23 996.59 34 993.71 13 998.17 24 996.37 35 993.40 14 998.06 25 996.14 36 993.07 15 997.94 26 995.91 37 992.74

16997. 8127995.6638992. 4117997.67995.41992 · 06283918 997. 5129995. 1540991.7119997.35884.8820994. 60997.1531例如容器为1L的量瓶在21℃校正时，称得水重为998.06g，从表1查得21℃时r值为996.99g，则该量瓶在20℃时的真实容量为：V=- 98.0g 100 100. 07m)996.99校正值为1001.07-1000=+1.07m1这种校正方法考虑了影响玻璃量器容量的三个因素，校正结果精密准确，适用于准确度较高的分析工作。1．吸量管的校正校正吸量管时首先应分清TD型还是TC型吸量管，且事先洗净、干燥。一般0.2m1以上吸量管均可用水称量法校正。取25ml或50ml具塞锥形瓶一只，于分析天平上精确称重。用待校吸量管吸取蒸馏水至刻度，按正规操作将蒸馏水放入锥形瓶。再于天平上准确称重。加水后的重量减去原瓶重即得Wt，代入公式求得V值。如果在允许误差范围内即为合格，超出允许误差范围者则弃去不用或重新刻度。2．容量瓶的校正容量瓶为量入式量器。校正时将已清洗干燥的容量瓶置天平上称重，然后向容量瓶中注入蒸馏水至刻度，用滤纸吸去瓶颈内壁上沾附的水珠再称量，此重量减去空瓶重即为Wt，代入公式即可求出V203.滴定管的校正滴定管需分段校正，一般将滴定管分为5个区段，如25ml的滴定管可分为0-5ml、5-10ml，10-15ml、15-20ml、20-25ml，校正时按顺序测出每个区段放出水的重量，分别代入公式计算出各段的校正值。以后使用该滴定管时，应根据各段校正值对滴定量进行修正。（三）常用量器的正确使用1.容量瓶容量瓶是准确度很高的容量仪器，用于配制浓度准确度要求高的溶液，如标准溶液、物质的量浓度表示的溶液等。用容量瓶配制溶液时，须先将称量好的固体物质在烧杯中用少量

16 997.81 27 995.66 38 992.41 17 997.67 28 995.41 39 992·06 18 997.51 29 995.15 40 991.71 19 997.35 30 884.88 20 997.15 31 994.60 例如容器为 1L 的量瓶在 21℃校正时，称得水重为 998.06g，从表 1 查得 21℃时 r 值为 996.99g，则该量瓶在 20℃时的真实容量为： V20 = r Wt = 996.99 998.06 ×1000 = 1001.07(ml) 校正值为 1001.07-1000 = + 1.07m l 这种校正方法考虑了影响玻璃量器容量的三个因素，校正结果精密准确，适用于准确度较高 的分析工作。 1．吸量管的校正 校正吸量管时首先应分清 TD 型还是 TC 型吸量管，且事先洗净、干燥。一般 0.2ml 以上 吸量管均可用水称量法校正。取 25ml 或 50ml 具塞锥形瓶一只，于分析天平上精确称重。用 待校吸量管吸取蒸馏水至刻度，按正规操作将蒸馏水放入锥形瓶。再于天平上准确称重。加 水后的重量减去原瓶重即得 Wt，代入公式求得 V20值。如果在允许误差范围内即为合格，超出 允许误差范围者则弃去不用或重新刻度。 2．容量瓶的校正 容量瓶为量入式量器。校正时将已清洗干燥的容量瓶置天平上称重，然后向容量瓶中注 入蒸馏水至刻度，用滤纸吸去瓶颈内壁上沾附的水珠再称量，此重量减去空瓶重即为 Wt，代 入公式即可求出 V20。 3．滴定管的校正 滴定管需分段校正，一般将滴定管分为 5 个区段，如 25ml 的滴定管可分为 0-5ml、5-10ml、 10-15ml、15-20ml、20-25ml，校正时按顺序测出每个区段放出水的重量，分别代入公式计算 出各段的校正值。以后使用该滴定管时，应根据各段校正值对滴定量进行修正。 (三) 常用量器的正确使用 1．容量瓶 容量瓶是准确度很高的容量仪器，用于配制浓度准确度要求高的溶液，如标准溶液、物 质的量浓度表示的溶液等。用容量瓶配制溶液时，须先将称量好的固体物质在烧杯中用少量

溶剂溶解后，再转入容量瓶中，烧杯用溶剂涮洗3次一并转入，然后加溶剂至刻度(凹面与标线相切），加塞后反复摇动，使溶液充分混匀。使用容量瓶时应注意：容量瓶不能直接加热，洗净的量瓶也不能置烘箱中烘烤。定容时瓶内液体温度应和室温一致强碱溶液不能用容量瓶贮存。当配制需避光的溶液时，宜选用棕色容量瓶。2.量筒量筒的精度低于量瓶，用于配制和测量要求不太精确的液体。量筒具有分度，使用方便是其优点。量筒不能加热，也不能将过热的液体倒入，以防破裂。量筒有容量大小不等的各种规格，使用时应选用大小适宜的量筒，以减小误差。3.有分度吸量管要正确选择吸量管的容量规格。根据需要吸取溶液的多少选择适当容量的吸量管是十分重要的，例如用2ml吸量管取用0.1ml溶液；或者需要1ml溶液用0.5ml吸量管吸取2次，均可扩大误差范围，影响实验结果。分清吸量管的类型，如前所述，吸量管有TC和TD之分前者最后管尖残液不能吹出，而后者则必须吹出。在读数或放液时，吸量管则必须保持垂直。读数时管内液面的凹月面的最低点应恰与所需量标线相切，并与视线保持水平。吸液时管尖不宜插入太深，通常1cm左右，以免外壁粘附太多的液体。当液体吸至所需量时，只要稍过标线，不宜过线太多，以免内壁粘附太多液体。吸量标准液或样品等容量要求十分准确的液体时，吸液后用纱布或滤纸先擦去管壁外粘附的液体，再放至所需刻度。放液时不可用吹气的方法加快流速，应沿容器内壁缓缓放入。4.奥氏吸管奥氏吸管在其下段有一球形或橄榄形的膨大部，没有分度线，总量标线位于膨大部的上方。在同容量的各类吸管中，它的容积的表面积最小，因而溶液的粘附作用也小，所以准确度高，最适用于量取粘度较大的液体。这种吸量管有0.5ml、1ml、2ml、5ml、10ml等几种规格，都属于完全流出式的，应吹出尖端存留的液体。二、加样器的使用和校正加样器也叫微量移液管，它是利用活塞的定程运动形成的负压来完成整个吸液过程的，活塞移动的距离由调节轮控制螺杆机构实现，即活塞移动的距离就是设定的样品液量。近年来得到普遍使用，特别是在吸取微量的血清(血浆)标本中，具有使用方便，重复性好，残留液少等优点。（一）操作方法1.正式使用前，要连续按动多次（不吸液体），使管内空气同工作环境空气交换，保持管

溶剂溶解后，再转入容量瓶中，烧杯用溶剂涮洗 3 次一并转入，然后加溶剂至刻度(凹面与标 线相切)，加塞后反复摇动，使溶液充分混匀。使用容量瓶时应注意：容量瓶不能直接加热， 洗净的量瓶也不能置烘箱中烘烤。定容时瓶内液体温度应和室温一致。强碱溶液不能用容量 瓶贮存。当配制需避光的溶液时，宜选用棕色容量瓶。 2．量筒 量筒的精度低于量瓶，用于配制和测量要求不太精确的液体。量筒具有分度，使用方便 是其优点。量筒不能加热，也不能将过热的液体倒入，以防破裂。量筒有容量大小不等的各 种规格，使用时应选用大小适宜的量筒，以减小误差。 3．有分度吸量管 要正确选择吸量管的容量规格。根据需要吸取溶液的多少选择适当容量的吸量管是十分 重要的，例如用 2ml 吸量管取用 0.1ml 溶液；或者需要 1ml 溶液用 0.5ml 吸量管吸取 2 次， 均可扩大误差范围，影响实验结果。分清吸量管的类型，如前所述，吸量管有 TC 和 TD 之分， 前者最后管尖残液不能吹出，而后者则必须吹出。在读数或放液时，吸量管则必须保持垂直。 读数时管内液面的凹月面的最低点应恰与所需量标线相切，并与视线保持水平。吸液时管尖 不宜插入太深，通常 1cm 左右，以免外壁粘附太多的液体。当液体吸至所需量时，只要稍过 标线，不宜过线太多，以免内壁粘附太多液体。吸量标准液或样品等容量要求十分准确的液 体时，吸液后用纱布或滤纸先擦去管壁外粘附的液体，再放至所需刻度。放液时不可用吹气 的方法加快流速，应沿容器内壁缓缓放入。 4．奥氏吸管 奥氏吸管在其下段有一球形或橄榄形的膨大部，没有分度线，总量标线位于膨大部的上 方。在同容量的各类吸管中，它的容积的表面积最小，因而溶液的粘附作用也小，所以准确 度高，最适用于量取粘度较大的液体。这种吸量管有 0.5ml、1ml、2ml、5ml、10ml 等几种规 格，都属于完全流出式的，应吹出尖端存留的液体。 二、加样器的使用和校正 加样器也叫微量移液管，它是利用活塞的定程运动形成的负压来完成整个吸液过程的， 活塞移动的距离由调节轮控制螺杆机构实现，即活塞移动的距离就是设定的样品液量。近年 来得到普遍使用，特别是在吸取微量的血清(血浆)标本中，具有使用方便，重复性好，残留 液少等优点。 (一) 操作方法 1．正式使用前，要连续按动多次(不吸液体)，使管内空气同工作环境空气交换，保持管

内空气工作负压恒定。2.在加样器下端吸液杆上插上塑料吸液嘴，轻轻扭转以保证气密。3.轻轻按下按手，将按手由原位置推到第一档位置，将吸液嘴垂直地浸入所需取样液内，深度为2~3mm。缓慢地松动按手，使之返回原来位置。4，停留1~2秒钟，平缓地将加样器取出，同时应避免塑料嘴与任何东西碰撞5.将吸液嘴移至加样容器壁上，缓慢按动按手至第一档位置，将液体排出。停留1秒钟粘性较高的溶液停留时间可长些。紧接着再将按手按至第二档位置，排出塑料吸液嘴里的全部液体。以上动作需连贯一致，千万不可在排液时，将按手按至第一档就放松按手，以避免加液不准。6.完全排除液体后，加样器连同吸液嘴沿着容器壁向上滑动取出，再放松按手，使之返回原来位置，即完成一次操作过程。（二）注意事项1.加样器是精密量器，不允许将加样器直接与液体接触，不使用时，也应插上塑料吸液嘴，以免流体或杂质吸入管内，导致阻塞。吸液嘴与吸液杆的连接必须密合2.吸液嘴在使用前须经湿化，即在正式吸液前将所吸溶液吸放2-3次。湿化前后实际容量和排出量均有显著差异。湿化可减少吸液嘴相对于所吸液体的面张力，使吸入量和排出量相等。因此为获得较好的准确度和精密度，湿化是不可省略的步骤。另外，有些新购的吸液嘴是经硅化过的，这有利于减少液体的吸附，但有实验表明，经加样一浸泡一消毒一冲洗烘干备用连续使用一周后，其泄出量即显著降低，有条件进应予以重新硅化，对外观有明显“花纹”或透明度降低者应弃掉不用。3．当加样器中有溶液时，不得倒放，必须垂直放置，否则久后失准。4.如使用中感到不顺畅，可将上壳旋开，用酒精洗活塞和活塞环，待擦干后装上即可使用。注意不能加任何润滑剂。凡有液体吸不进，吸不足，容量不准，排液不畅等现象，则须送厂方修理，不得继续使用。（三）加样器的校正目前，许多实验室都已经使用国产或进口的加样器，尽管进口加样器在准确度、精密度、性能和使用寿命等方面优于国产，但在这类量器的使用中，每年至少也应检验校正23次，其校正方法如下：校正时要求室温20℃，按正规操作吸取蒸馏水，并称其蒸馏水重量，同样记下蒸留水重量及水温。计算出容积及校正值，若相对百分误差大于土2%时，应进行调整调整后，必须再进行检测，直至加样器能正确给出调整的容积

内空气工作负压恒定。 2．在加样器下端吸液杆上插上塑料吸液嘴，轻轻扭转以保证气密。 3．轻轻按下按手，将按手由原位置推到第一档位置，将吸液嘴垂直地浸入所需取样液内， 深度为 2~3mm。缓慢地松动按手，使之返回原来位置。 4．停留 1~2 秒钟，平缓地将加样器取出，同时应避免塑料嘴与任何东西碰撞。 5．将吸液嘴移至加样容器壁上，缓慢按动按手至第一档位置，将液体排出。停留 1 秒钟， 粘性较高的溶液停留时间可长些。紧接着再将按手按至第二档位置，排出塑料吸液嘴里的全 部液体。以上动作需连贯一致，千万不可在排液时，将按手按至第一档就放松按手，以避免 加液不准。 6．完全排除液体后，加样器连同吸液嘴沿着容器壁向上滑动取出，再放松按手，使之返 回原来位置，即完成一次操作过程。 (二) 注意事项 1．加样器是精密量器，不允许将加样器直接与液体接触，不使用时，也应插上塑料吸液 嘴，以免流体或杂质吸入管内，导致阻塞。吸液嘴与吸液杆的连接必须密合。 2．吸液嘴在使用前须经湿化，即在正式吸液前将所吸溶液吸放 2-3 次。湿化前后实际容 量和排出量均有显著差异。湿化可减少吸液嘴相对于所吸液体的面张力，使吸入量和排出量 相等。因此为获得较好的准确度和精密度，湿化是不可省略的步骤。另外，有些新购的吸液 嘴是经硅化过的，这有利于减少液体的吸附，但有实验表明，经加样—浸泡—消毒—冲洗— 烘干备用连续使用一周后，其泄出量即显著降低，有条件进应予以重新硅化，对外观有明显 “花纹”或透明度降低者应弃掉不用。 3．当加样器中有溶液时，不得倒放，必须垂直放置，否则久后失准。 4．如使用中感到不顺畅，可将上壳旋开，用酒精洗活塞和活塞环，待擦干后装上即可使 用。注意不能加任何润滑剂。凡有液体吸不进，吸不足，容量不准，排液不畅等现象，则须 送厂方修理，不得继续使用。 (三) 加样器的校正 目前，许多实验室都已经使用国产或进口的加样器，尽管进口加样器在准确度、精密度、 性能和使用寿命等方面优于国产，但在这类量器的使用中，每年至少也应检验校正 2~3 次， 其校正方法如下：校正时要求室温 20℃，按正规操作吸取蒸馏水，并称其蒸馏水重量，同样 记下蒸馏水重量及水温。计算出容积及校正值，若相对百分误差大于±2%时，应进行调整。 调整后，必须再进行检测，直至加样器能正确给出调整的容积

第二节试剂及试剂的配制化学试剂及配制是临床化学实验必不可少的环节，合理选用化学试剂和正确进行试剂配制是保证实验结果准确的关键之一，也是检验工作者的重要任务之一。了解试剂性质，正确地选用、配制和贮存试剂是控制检验质量的重要环节。一、化学试剂化学试剂有不同的品级规格，如果在实验中选用了低品级的试剂，一般而言会引入一个恒定的系统误差，有时会导致误差太大甚至实验失败。但盲目地选择高品级试剂，则导致不必要的浪费。临床化学实验中，使用目的不同对化学试剂的质量要求也不同，检验工作者应熟悉化学试剂的品级规格及其用途，以便根据不同的使用目的正确选用。市场供应的化学试剂有国产和进口两类，使用中应加以区别（一）化学试剂的规格我国化学试剂纯度标准有国家标准(GB)、化学工业部部颁标准(HG)、部颁暂行标准(HGB)。此外尚有地方企业和厂订标准，这些标准对产品质量起到了监督保证作用。自50年代起，我国参照进口化学试剂的质量标准，对通用试剂制定四种常用规格。即一级G.R（Guaranteedreagent）保证试剂：二级A.R.（Analyticalreagent）分析纯试剂；三级C.P.（Chemicalpure)化学纯；四级L.R.（Laboratoryreagent)实验试剂。进口试剂规格种类繁多，各国的等级规定与我国的不尽相同，名词术语也不一致，使用时应加以区别。化学试剂的品级、纯度和用途见附表2

第二节 试剂及试剂的配制 化学试剂及配制是临床化学实验必不可少的环节，合理选用化学试剂和正确进行试剂配 制是保证实验结果准确的关键之一，也是检验工作者的重要任务之一。了解试剂性质，正确 地选用、配制和贮存试剂是控制检验质量的重要环节。 一、化学试剂 化学试剂有不同的品级规格，如果在实验中选用了低品级的试剂，一般而言会引入一个 恒定的系统误差，有时会导致误差太大甚至实验失败。但盲目地选择高品级试剂，则导致不 必要的浪费。临床化学实验中，使用目的不同对化学试剂的质量要求也不同，检验工作者应 熟悉化学试剂的品级规格及其用途，以便根据不同的使用目的正确选用。市场供应的化学试 剂有国产和进口两类，使用中应加以区别。 (一) 化学试剂的规格 我国化学试剂纯度标准有国家标准(GB)、化学工业部部颁标准(HG)、部颁暂行标准(HGB)。 此外尚有地方企业和厂订标准，这些标准对产品质量起到了监督保证作用。自 50 年代起，我 国参照进口化学试剂的质量标准，对通用试剂制定四种常用规格。即一级 G.R.(Guaranteed reagent)保证试剂；二级 A.R.(Analytical reagent)分析纯试剂；三级 C.P.(Chemical pure) 化学纯；四级 L.R.(Laboratory reagent)实验试剂。进口试剂规格种类繁多，各国的等级规 定与我国的不尽相同，名词术语也不一致，使用时应加以区别。化学试剂的品级、纯度和用 途见附表 2

附表2一般化学试剂的品级、纯度和用途品W一级试剂二级试剂三级试剂四级试剂优级纯（保证试剂）分析纯（分析试剂）化学纯实验试剂国内标准CPLRGRAR绿色标签红色标签蓝色标签黄色标签LAP国外标准ARCPEPxGRPUSSACSPURISSPA纯度高、杂质含量纯度较高、杂质含质量略低于二级纯度较低，用于低，适用于研究和量较低，适于定性试剂，用途近二一般定性试验级试剂配制标准液和定量分析随着科学的发展，市场上出现尚有许多特殊规格的试剂。这类试剂属专用试剂，不分等级。生物试剂(BR)瓶签黄褐色；生物染色剂(BS)，瓶签褐色；指示剂(IND)，瓶签红色；光谱纯(SSS，SP)；超纯（UP)；层析纯(FCR)；微量分析试剂(MAR)；特殊试剂(RS)；光学分析试剂(US )等。(二)化学试剂的选用1.选用原则选用化学试剂的原则应根据检验方法的要求及样品含量来决定。干扰因素较多、含微量物质的样品测定时，必须选用品级、纯度较高试剂，如微量元素测定必须用优级纯，其标准物须用光谱纯试剂；作标准物的试剂须选用品级高的试剂；一般的定性检验可选用实验试剂。一般来说，试剂纯度越高，试剂引起的误差就越小。但也不要过分强求这一点，否则会造成经济上不必要的损失或影响工作。总之，应把试剂的选用标准和要求同方法的精密度和灵敏度结合起来加以选用。2．核对瓶签所用试剂须有瓶签，应核对品级、纯度、含有成分的百分率和不纯物（杂质)的最高数据及化学分子式。3.观察试剂性状有无变质有些化合物本身不稳定，经过长期贮存亦能逐渐发生分解

附表 2 一般化学试剂的品级、纯度和用途 品 级 一级试剂 二级试剂 三级试剂 四级试剂 国内标准 优级纯(保证试剂) 分析纯(分析试剂) 化学纯 实验试剂 GR AR CP LR 绿色标签 红色标签 蓝色标签 黄色标签 国外标准 AR CP LAP GR PUSS EP X ACS PURISS PA 纯度高、杂质含量 低，适用于研究和 配制标准液 纯度较高、杂质含 量较低，适于定性 和定量分析 质量略低于二级 试剂，用途近二 级试剂 纯度较低，用于 一般定性试验 随着科学的发展，市场上出现尚有许多特殊规格的试剂。这类试剂属专用试剂，不分等 级。生物试剂(BR)瓶签黄褐色；生物染色剂(BS)，瓶签褐色；指示剂(IND)，瓶签红色；光谱 纯(SSS，SP)；超纯(UP)；层析纯(FCR)；微量分析试剂(MAR)；特殊试剂(RS)；光学分析试剂 (US )等。 (二)化学试剂的选用 1．选用原则 选用化学试剂的原则应根据检验方法的要求及样品含量来决定。干扰因素 较多、含微量物质的样品测定时，必须选用品级、纯度较高试剂，如微量元素测定必须用优 级纯，其标准物须用光谱纯试剂；作标准物的试剂须选用品级高的试剂；一般的定性检验可 选用实验试剂。一般来说，试剂纯度越高，试剂引起的误差就越小。但也不要过分强求这一 点，否则会造成经济上不必要的损失或影响工作。总之，应把试剂的选用标准和要求同方法 的精密度和灵敏度结合起来加以选用。 2．核对瓶签 所用试剂须有瓶签，应核对品级、纯度、含有成分的百分率和不纯物(杂 质)的最高数据及化学分子式。 3．观察试剂性状有无变质 有些化合物本身不稳定，经过长期贮存亦能逐渐发生分解

氧化、还原、聚合、升华、蒸发、沉淀析出等变化。一旦出现混浊、沉淀、颜色改变等一般不再使用，应弃之。但有的可重新蒸馏纯化后再用二、试剂配制与使用原则试剂的配制，根据情况及实际需要不同分为两大类：一是直接配制法，适用于标准溶液和一般溶液配制；二是间接配制法，适用于不易恒重的固体试剂和含量不准的液体试剂，即先配出大约浓度的溶液，再用标准溶液标定出准确的浓度，如酸碱溶液、KMnO.溶液、NaS.0.溶液的配制，即用间接法。试剂配制在医学检验工作中是非常重要的工作之一，一切检验结果的准确性，必须有试剂的质量保证。因此，对实验室工作中的试剂配制与管理，应有一定的要求和使用原则。(一）登记建立试剂登记与双查双签制度，配制者应在试剂登记薄上登记配制试剂处方，处方应体现原试剂级别、浓度、pH、加入先后顺序，配制方法及配制总量等，要求计算准确，固体试剂和液体试剂应以瓶签所注明的化学式、比重和百分数作为计算组成量的依据。配制总量应根据其工作量与试剂保存期限来确定。最后由另一人核对并双人签名。（二）试剂恒重部分化学试剂在存放过程中会吸收空气中的水份，如果直接称量配制，显然是不准确的。用适当的方法除去吸收的水份，使试剂恢复到吸潮前的状态，这一过程称为恒重。需要恒重的试剂在使用前必须进行恒重，但各种试剂的恒重方法不尽相同，常用试剂恒重的方法见附表3。附表3常用试剂的恒重方法试剂名称恒重方法邻苯二甲酸氢钾105℃干燥3小时酒石酸氢钾105℃~110℃干燥3小时磷酸氢二钠将市售NaHPO4·2H:O在研钵内研成细末，置浅血中在室温下置空气(Na2HPO. · 2H20)流通过处2周或更多时间，再置37℃温箱1~2天即成。磷酸二氢钾(无水)在研钵内研成细末后，105℃下干燥12小时。硼砂（Na,B,0·10H,0）将其放在含NaC1及蔗糖的饱和溶液干燥器中干燥到恒重（此时玻璃棒搅拌时不再粘附）硼酸(H:BO.H.O)置含CaCl.干燥器中干燥至恒重草酸钠(Na.C.0.)105℃~110℃干燥3小时

氧化、还原、聚合、升华、蒸发、沉淀析出等变化。一旦出现混浊、沉淀、颜色改变等一般 不再使用，应弃之。但有的可重新蒸馏纯化后再用。 二、试剂配制与使用原则 试剂的配制，根据情况及实际需要不同分为两大类：一是直接配制法，适用于标准溶液 和一般溶液配制；二是间接配制法，适用于不易恒重的固体试剂和含量不准的液体试剂，即 先配出大约浓度的溶液，再用标准溶液标定出准确的浓度，如酸碱溶液、KMnO4 溶液、Na2S2O3 溶液的配制，即用间接法。试剂配制在医学检验工作中是非常重要的工作之一，一切检验结 果的准确性，必须有试剂的质量保证。因此，对实验室工作中的试剂配制与管理，应有一定 的要求和使用原则。 (一) 登记 建立试剂登记与双查双签制度，配制者应在试剂登记薄上登记配制试剂处方，处方应体 现原试剂级别、浓度、pH、加入先后顺序，配制方法及配制总量等，要求计算准确，固体试 剂和液体试剂应以瓶签所注明的化学式、比重和百分数作为计算组成量的依据。配制总量应 根据其工作量与试剂保存期限来确定。最后由另一人核对并双人签名。 (二) 试剂恒重 部分化学试剂在存放过程中会吸收空气中的水份，如果直接称量配制，显然是不准确的。 用适当的方法除去吸收的水份，使试剂恢复到吸潮前的状态，这一过程称为恒重。需要恒重 的试剂在使用前必须进行恒重，但各种试剂的恒重方法不尽相同，常用试剂恒重的方法见附 表 3。 附表 3 常用试剂的恒重方法 试 剂 名 称 恒 重 方 法 邻苯二甲酸氢钾 105℃干燥 3 小时 酒石酸氢钾 105℃~110℃干燥 3 小时 磷酸氢二钠 (Na2HPO4·2H2O) 将市售 Na2HPO4·2H2O 在研钵内研成细末，置浅皿中在室温下置空气 流通过处 2 周或更多时间，再置 37℃温箱 1~2 天即成。 磷酸二氢钾(无水) 在研钵内研成细末后，105℃下干燥 12 小时。 硼砂(Na2B4O7·l0H2O) 将其放在含 NaCl 及蔗糖的饱和溶液干燥器中干燥到恒重(此时玻璃 棒搅拌时不再粘附)。 硼酸(H3BO3H2O) 置含 CaCl2干燥器中干燥至恒重 草酸钠(Na2C2O4) 105℃~110℃干燥 3 小时

草酸(H.C.0)放在CaC1,干燥器中干燥至恒重草酸（H.C.04.2HO）置空气中干燥或放在含有固体溴化钠及其饱和溶液的干燥器中（相对湿度为60%）干燥到恒重。碳酸钠(NaCO.)180℃~200℃千燥3小时氯化钠110℃~120℃干燥24小时氯化钾120℃干燥48小时碳酸钙110℃干燥12小时重铬酸钾150℃干燥3小时EDTA150℃千燥到恒重EDTA二钠盐150℃干燥到恒重硝酸银放在干净有色称量瓶中100℃下干燥1小时后再放入H:S0干燥器中。亚砷酸酐置HSO.干燥到恒重硫酸胺110℃~150℃干燥到恒重氧化汞置H2SO4干燥器中避光干燥到恒重尿素65℃~70℃干燥到恒重葡萄糖40℃~50℃干燥到恒重尿酸避光在CaCl2干燥器中干燥到恒重肌酐105℃干燥到恒重丙酮酸钠避光在CaC12干燥器中干燥到恒重胆固醇避光在CaC1,干燥器中干燥到恒重维生素 C避光在CaCl.干燥器中干燥到恒重(三）试剂的纯化与称重部分试剂在贮存过程中会发生氧化(如邻甲苯胺、胆红素等)、分解(如丙烯酰胺等)、聚合（如甲叉双丙烯酰胺)等反应，使其变得不符合使用要求，另有些则因本身纯度不够，因而在使用前需对这些试剂进行一定的处理，使其纯度满足需要，此过程称为纯化。试剂的称重是决定所配试剂浓度准确与否的关键一环，称重必须准确。一般固体试剂称取，应有称量瓶、玻璃纸等盛试剂，以便冲洗。一般不用纸盛试剂，尤其是粗糙的纸。对易潮解、易挥发的试剂称量应迅速。标准物须用万分之一天平称取。(四）溶剂试剂配制中的溶剂一般为蒸馏水，特殊试剂或非水为溶剂的试剂应注明清楚。蒸馏水的

草酸(H2C2O4) 放在 CaCl2干燥器中干燥至恒重 草酸(H2C2O4·2H2O ) 置空气中干燥或放在含有固体溴化钠及其饱和溶液的干燥器中(相 对湿度为 60%)干燥到恒重。 碳酸钠(Na2CO3) 180℃~200℃干燥 3 小时 氯化钠 110℃~120℃干燥 24 小时 氯化钾 120℃干燥 48 小时 碳酸钙 110℃干燥 12 小时 重铬酸钾 150℃干燥 3 小时 EDTA 150℃干燥到恒重 EDTA 二钠盐 150℃干燥到恒重 硝酸银 放在干净有色称量瓶中100℃下干燥 1小时后再放入H2SO4干燥器中。 亚砷酸酐 置 H2SO4干燥到恒重 硫酸胺 110℃~150℃干燥到恒重 氧化汞 置 H2SO4干燥器中避光干燥到恒重 尿素 65℃~70℃干燥到恒重 葡萄糖 40℃~50℃干燥到恒重 尿酸 避光在 CaCl2干燥器中干燥到恒重 肌酐 105℃干燥到恒重 丙酮酸钠 避光在 CaCl2干燥器中干燥到恒重 胆固醇 避光在 CaCl2干燥器中干燥到恒重 维生素 C 避光在 CaCl2干燥器中干燥到恒重 (三) 试剂的纯化与称重 部分试剂在贮存过程中会发生氧化(如邻甲苯胺、胆红素等)、分解(如丙烯酰胺等)、聚 合(如甲叉双丙烯酰胺)等反应，使其变得不符合使用要求，另有些则因本身纯度不够，因而 在使用前需对这些试剂进行一定的处理，使其纯度满足需要，此过程称为纯化。试剂的称重 是决定所配试剂浓度准确与否的关键一环，称重必须准确。一般固体试剂称取，应有称量瓶、 玻璃纸等盛试剂，以便冲洗。一般不用纸盛试剂，尤其是粗糙的纸。对易潮解、易挥发的试 剂称量应迅速。标准物须用万分之一天平称取。 (四) 溶剂 试剂配制中的溶剂一般为蒸馏水，特殊试剂或非水为溶剂的试剂应注明清楚。蒸馏水的