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《生物化学》课程教学课件(PPT讲稿)第八章 核酸(nucleic acid)第五节 核酸的性质

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《生物化学》课程教学课件(PPT讲稿)第八章 核酸(nucleic acid)第五节 核酸的性质
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第五节 核酸的性质 一、核酸的水解

第五节 核酸的性质 一、核酸的水解

(一)酸水解 对酸敏感性: 糖苷键>磷酸酯键 嘌呤碱糖苷键>嘧啶碱糖苷键

(一)酸水解 对酸敏感性: 糖苷键  磷酸酯键 嘌呤碱糖苷键 嘧啶碱糖苷键

(二)碱水解 DNA一般对碱稳定。 RNA的磷酸酯键易被碱水解,产生核苷酸混 合物

(二)碱水解 DNA一般对碱稳定。 RNA 的磷酸酯键易被碱水解,产生核苷酸混 合物

Pyrimidine HOCH20 HOCH20 OH 0=P一0 0 0 OH 0= 0=P一0 CH2 0 0 Base 2',3'-Cycllc 0 phosphate Nucleoside 3'-phosphate OH OH Dinucleotlde HOCH2 0 Base OH OH Nucleoside

(三)酶水解 (1)底物专一性 ribonuclease, RNase deoxyribonuclease,DNase (2)作用方式 核酸内切酶(endonuclease) 核酸外切酶(exonuclease) (3)断裂位点 3’-OH与磷酸基之间 5’-OH与磷酸基之间

(三)酶水解 (1)底物专一性 ribonuclease, RNase deoxyribonuclease,DNase (2)作用方式 核酸内切酶(endonuclease) 核酸外切酶(exonuclease) (3)断裂位点 3’-OH与磷酸基之间 5’-OH与磷酸基之间

限制性内切酶(restriction endonuclease》 Most restriction site sequences are palindromes. 1111lllI0等 Backbone cut here 5' 5' Backbone cut here 幻Il川l川 EcoRI restriction site

限制性内切酶(restriction endonuclease)

限制性内切酶的作用特点 极高专一性; DNA两条链都被切断,形成粘末端(cohesive end)或平末端(blunt end); 只降解外源DNA,不降解自身细胞中的DNA; 性质比较稳定,需要Mg2+及一定盐离子

限制性内切酶的作用特点 极高专一性; DNA两条链都被切断,形成粘末端(cohesive end)或平末端(blunt end); 只降解外源DNA,不降解自身细胞中的DNA; 性质比较稳定,需要Mg2+及一定盐离子

DNA的限制酶图谱 为在DNA分子上指出限制酶切片段的排列 所制作的图谱。 B D A Hpa I 5300bp SV40 DNA

DNA的限制酶图谱 为在DNA分子上指出限制酶切片段的排列 所制作的图谱。 A C B D A 0 5300bp Hpa I SV40 DNA

二、核酸的酸碱性质 磷酸、碱基的解离(两性解离) 核苷酸pl RNA pI=2-2.8 生理状态下,磷酸基团全部解离,呈 多阴离子状态

二、核酸的酸碱性质 磷酸、碱基的解离(两性解离) 核苷酸pI RNA pI=2-2.8 生理状态下,磷酸基团全部解离,呈 多阴离子状态

三、核酸的紫外吸收 Single- stranded Double- helical 220 260 300 Wavelength (nm)

三、核酸的紫外吸收

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