《实验诊断学》课程实验指导书 laboatoty diagnosis（共九章，含练习及答案）

前言 实验诊断学(laboatoty diagnosis)是诊断学的一部分，是基础医学向临 床医学过渡的一门桥梁学科。实验诊断学教材是高等医药院校教材体系中 一门重要课程，是五年制和七年制学生的必修课。全国高等医学院教材建 设研究会组织全国有关专家和教授，于2000年编写出并出版了以五年制学 生为对象的第五版诊断学（其中含实验诊断学）及七年制学生为对象的实 验诊断学。这两部教材的编写适应了我国高等医（药）教育的改革和发展， 以培养面向21世纪高级医学人才为着眼点，内容上做了大量的除陈推新， 做到继承性与先进性、现代性相结合。 实验诊断学实习指导由七制实验诊断学教材的编委所编写，其编写原 则和指导思想同2001年版实验诊断学。本实习指导是实验诊断学规划教材 的配套教材，可供高等医药院五年制和七年制学生实习时使用。编写中强 调了理论与实践结合，实验与临床结合，并注重培养学生实践能力和思维 能力。因而本实验指导中突出了实践性、实用性、启发性和先进性。在内 容上分为上篇与下篇两部分，上篇为实验部分，分为九章，即“血液一般 检查”、“骨髓细胞学检查”、“血栓与止血检查”、“尿液与肾功能检查”、“体 液、分泌物和排泄物检查”、“临床化学检查”、“临床免疫学检查”、“临床 细胞遗传学检查”、“临床病原学检查”；下篇为练习部分，包括：选择题、 简答题、病例及病例分析等。 因为目前我国各高等医药院校实验诊断学尚没有统一的教学大纲，总 授课时数、理论课与实习课时数也很不一致，故对实验诊断学实习指导的 应用，可以根据各院校的实际情况，自行组织，灵活安排，对其内容可做 适当取舍和组合。 编者 2002.6

前言 实验诊断学（laboatoty diagnosis）是诊断学的一部分，是基础医学向临 床医学过渡的一门桥梁学科。实验诊断学教材是高等医药院校教材体系中 一门重要课程，是五年制和七年制学生的必修课。全国高等医学院教材建 设研究会组织全国有关专家和教授，于 2000 年编写出并出版了以五年制学 生为对象的第五版诊断学（其中含实验诊断学）及七年制学生为对象的实 验诊断学。这两部教材的编写适应了我国高等医（药）教育的改革和发展， 以培养面向 21 世纪高级医学人才为着眼点，内容上做了大量的除陈推新， 做到继承性与先进性、现代性相结合。 实验诊断学实习指导由七制实验诊断学教材的编委所编写，其编写原 则和指导思想同 2001 年版实验诊断学。本实习指导是实验诊断学规划教材 的配套教材，可供高等医药院五年制和七年制学生实习时使用。编写中强 调了理论与实践结合，实验与临床结合，并注重培养学生实践能力和思维 能力。因而本实验指导中突出了实践性、实用性、启发性和先进性。在内 容上分为上篇与下篇两部分，上篇为实验部分，分为九章，即“血液一般 检查”、“骨髓细胞学检查”、“血栓与止血检查”、“尿液与肾功能检查”、“体 液、分泌物和排泄物检查”、“临床化学检查”、“临床免疫学检查”、“临床 细胞遗传学检查”、“临床病原学检查”；下篇为练习部分，包括：选择题、 简答题、病例及病例分析等。 因为目前我国各高等医药院校实验诊断学尚没有统一的教学大纲，总 授课时数、理论课与实习课时数也很不一致，故对实验诊断学实习指导的 应用，可以根据各院校的实际情况，自行组织，灵活安排，对其内容可做 适当取舍和组合。 编者 2002.6

目录 上篇实验部分 第一章血液一般检查. 一、红细胞检查.】 (一)红细胞计数（目视计数法）.1 (二)血红蛋白测定（氰化高铁血红蛋白测定法）.4 (三)血细胞比容测定（温氏法）5 (四)红细胞三种平均值参数计算.6 (五)网织红细胞计数.7 (六)红细胞沉降率（魏氏法）.8 二、白细胞检查.9 (一)白细胞计数.9 (二)白细胞分类计数.10 三、血小板计数. .12 第二章骨髓细胞学检查. .l3 第三章血栓与止血检查.20 一、出血时间测定(TBT).20 二、束臂试验（毛细血管抵抗力试验）.21 三、血块收缩试验.21 四、血浆凝血酶原时间测定(PT,一期法).21 五、活化部分凝血酶原时间测定(APTT)测定.23 六、血浆D二聚体测定（胶乳凝集法）.24 七、FDP胶乳凝集试验.25 第四章尿液和肾功能检查.26

目录 上篇 实验部分 第一章 血液一般检查.1 一、红细胞检查.1 （一）红细胞计数（目视计数法）.1 （二）血红蛋白测定（氰化高铁血红蛋白测定法）.4 （三）血细胞比容测定（温氏法）.5 （四）红细胞三种平均值参数计算.6 （五）网织红细胞计数.7 （六）红细胞沉降率（魏氏法）.8 二、白细胞检查.9 （一）白细胞计数.9 （二）白细胞分类计数.1 0 三、血小板计数.12 第二章 骨髓细胞学检查.13 第三章 血栓与止血检查.20 一、出血时间测定（TBT）.20 二、束臂试验（毛细血管抵抗力试验）.21 三、血块收缩试验.21 四、血浆凝血酶原时间测定（PT，一期法）.21 五、活化部分凝血酶原时间测定（APTT）测定.23 六、血浆 D-二聚体测定（胶乳凝集法）.24 七、FDP 胶乳凝集试验.25 第四章 尿液和肾功能检查.26

一、一般性状检查.26 二、尿液化学检查.28 (一)尿蛋白定性试验.28 (二)本-周蛋白定性试验.29 (三)尿葡萄糖定性试验.30 (四)尿酮体定性试验.32 (五)尿胆红素定性试验.32 (六)尿胆原定性试验.33 (七)尿液亚硝酸盐定性试验.34 三、尿沉渣显微镜检查.35 (一)非染争法离心尿沉渣显微镜检查.35 (二)尿沉渣定量分析板法.35 (三)尿沉渣染色镜检法. .36 四、尿液干化学自动分析仪的应用.36 五、尿人绒毛膜促性腺激素检查.37 (一)尿HCG单克隆抗体免疫胶体金法.37 (二)双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)38 六、血清肌酐测定.38 第五章体液、分泌物及排泄物检查.39 一、脑脊液检查.39 (一)一般性状检查.39 (二)潘迪蛋白定性试验. .39 (三)显微镜检查.40 二、浆膜腔积液检查.4

一、一般性状检查.26 二、尿液化学检查.28 （一）尿蛋白定性试验.28 (二)本-周蛋白定性试验.29 （三）尿葡萄糖定性试验.30 （四）尿酮体定性试验.32 （五）尿胆红素定性试验.32 （六）尿胆原定性试验.33 （七）尿液亚硝酸盐定性试验.34 三、尿沉渣显微镜检查.35 （一）非染争法离心尿沉渣显微镜检查.35 （二）尿沉渣定量分析板法.35 （三）尿沉渣染色镜检法.36 四、尿液干化学自动分析仪的应用.36 五、尿人绒毛膜促性腺激素检查.37 （一）尿 HCG 单克隆抗体免疫胶体金法.37 （二）双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）.38 六、血清肌酐测定.38 第五章 体液、分泌物及排泄物检查.39 一、脑脊液检查.39 （一）一般性状检查.39 （二）潘迪蛋白定性试验.39 （三）显微镜检查.4 0 二、浆膜腔积液检查.41

(一）一般性状检查.4 (二)粘蛋白定性试验.41 (三)显微镜检查.42 三、类便检查.43 (一）粪便隐血试验.43 (二)粪便显微镜检查.44 第六章临床化学检查.45 一、血清葡萄糖测定.45 (一)葡萄糖氧化酶(G0D)法.45 （二)已糖激酶(HK)法.46 二、血清蛋白电泳.48 (一)血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳.48 (二)血清蛋白聚丙烯胺凝胶血状电泳.50 三、血气分析. .52 第七章临床免疫学检查.53 一、甲胎蛋白测定(ELISA).53 二、抗核抗体检查（间接免疫荧光法）.55 三、ENA检测（免疫印迹法）.5G 四、抗心磷脂抗体检测(ELISA).58 五、乙型肝炎病毒DNA检测(PCR法).59 六、HLA分型(PCR-SS0)法.61 第八章临床细胞遗传学检查.64 人类染色体标本的制备和分析.64 (一)人类外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备.64

（一）一般性状检查.41 （二）粘蛋白定性试验.41 （三）显微镜检查.42 三、粪便检查.43 （一）粪便隐血试验.43 （二）粪便显微镜检查.44 第六章 临床化学检查.45 一、血清葡萄糖测定.45 （一）葡萄糖氧化酶（GOD）法.45 （二）已糖激酶（HK）法.46 二、血清蛋白电泳.48 （一）血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳.48 （二）血清蛋白聚丙烯胺凝胶血状电泳.50 三、血气分析.52 第七章 临床免疫学检查.53 一、甲胎蛋白测定（ELISA）.53 二、抗核抗体检查（间接免疫荧光法）.55 三、ENA 检测（免疫印迹法）.56 四、抗心磷脂抗体检测（ELISA）.58 五、乙型肝炎病毒 DNA 检测（PCR 法）.59 六、HLA 分型（PCR-SSO）法.61 第八章 临床细胞遗传学检查.64 人类染色体标本的制备和分析.64 （ 一 ） 人 类 外 周 血 淋 巴 细 胞 培 养 及 染 色 体 标 本 制 备 . 6 4

(二)人类非显带染色体分析.65 (三)人类染色体G显带技术.66 (四)人类染色体G显带核型分析.67 第九章临床病原学检验.70 临床标本的病原学检查及药物敏感试验.70 附：仪器简介.72 一、血细胞自动分析仪.72 二、自动血液凝固分析仪.76 三、尿沉渣分析仪.77 四、自动生化分析仪.78 五、化学发光自动化免疫分析仪.79 六、自动细菌培养和鉴定仪.80 下篇练习部分 一、选择题.83 (一)A型题83 (二)B型题.92 (三)X型题93 二、简答题.95 三、病例分析题.96 四、答案. l09

（二）人类非显带染色体分析.65 （三）人类染色体 G 显带技术.66 （四）人类染色体 G 显带核型分析.67 第九章 临床病原学检验.70 临床标本的病原学检查及药物敏感试验.70 附：仪器简介.72 一、血细胞自动分析仪.72 二、自动血液凝固分析仪.76 三、尿沉渣分析仪.77 四、自动生化分析仪.78 五、化学发光自动化免疫分析仪.79 六、自动细菌培养和鉴定仪.80 下 篇 练 习 部 分 一、选择题.83 （一）A 型题.83 （二）B 型题.92 （三）X 型题.93 二、简答题.95 三、病例分析题.96 四、答案.109

上篇实验部分 第一章血液一般检查 一、红细胞检查 (一)红细胞计数（目视计数法） 【要求】熟悉红细胞计数方法，掌握红细胞计数参考值及临床意义。 【原理】用红细胞稀释液将血液稀释一定倍数，置于血细胞计数板内， 于显微镜下计数一定容积内的红细胞数，然后再计算出每升血液内的红细 胞数。 【试剂】 红细胞稀释液[赫姆(ayem)稀释液] 氯化钠 1.0g 硫酸钠(NaS010H0) 5.0g(或无水硫酸钠2.5g) 氯化高汞 0.5g 蒸馏水加至 200.0ml(过滤后备用) 【器材与仪器】 1.试管、玻棒、2ml玻璃吸管、显微镜。 2.一次性微量吸管：上有10如l的刻度线。 3.血细胞计数板（改良牛鲍计数板）：见图1-1，血细胞计数板中央有 两个刻度平台（即血细胞计数池），每个平台划分为9个大方格，每个大方 格长宽各为1m,其面积为lm2,加盖玻片后的深度为0.lmm,故每一大方 格的容积为0.1mm(0.1μl)。四角的四个大方格等分为16个中方格，作为

上篇 实验部分 第一章 血液一般检查 一、红细胞检查 （一）红细胞计数（目视计数法） 【要求】熟悉红细胞计数方法，掌握红细胞计数参考值及临床意义。 【原理】用红细胞稀释液将血液稀释一定倍数，置于血细胞计数板内， 于显微镜下计数一定容积内的红细胞数，然后再计算出每升血液内的红细 胞数。 【试剂】 红细胞稀释液[赫姆(Hayem)稀释液] 氯化钠 1.0g 硫酸钠（Na2SO410H2O） 5.0g（或无水硫酸钠 2.5g） 氯化高汞 0.5g 蒸馏水加至 200.0ml（过滤后备用） 【器材与仪器】 1.试管、玻棒、2ml 玻璃吸管、显微镜。 2.一次性微量吸管：上有 10l 的刻度线。 3.血细胞计数板（改良牛鲍计数板）：见图 1-1，血细胞计数板中央有 两个刻度平台（即血细胞计数池），每个平台划分为 9 个大方格，每个大方 格长宽各为 1mm，其面积为 1mm 2，加盖玻片后的深度为 0.1mm，故每一大方 格的容积为 0.1mm3（0.1l）。四角的四个大方格等分为 16 个中方格，作为

白细胞计数用（图1-2）：中央一大方格用双线等分为25个中方格，每个中 方格又等分为16个小方格，作为红细胞计数之用（图1-2、图1-3）。 【操作】 1.取试管一支，准确加入红细胞稀释液2ml。 2.消毒皮肤，用采血针刺破皮肤，使血液自动流出，拭去第一滴血，用 ~次性微量吸管准确取血10μl。 3.擦去管尖外面多余的血液，将吸管插入稀释液底部，轻轻将血全部排 出，然后吸取其上稀释液清洗吸管内残余血液2~3次。 4.混匀后用玻棒蘸取红细胞悬液，充入血细胞计数池内，注意充池的液 量要适宜，使之恰好充满，无气泡及多余液体溢出。静置2~3mim,待红细 胞下沉后进行计数。 计数 盖玻片 团1一1血细胞计数板（改良牛鲍计数板 国1-之红自时区示意国

白细胞计数用（图 1-2）；中央一大方格用双线等分为 25 个中方格，每个中 方格又等分为 16 个小方格，作为红细胞计数之用（图 1-2、图 1-3）。 【操作】 1.取试管一支，准确加入红细胞稀释液 2ml。 2.消毒皮肤，用采血针刺破皮肤，使血液自动流出，拭去第一滴血，用 一次性微量吸管准确取血 10l。 3.擦去管尖外面多余的血液，将吸管插入稀释液底部，轻轻将血全部排 出，然后吸取其上稀释液清洗吸管内残余血液 2～3 次。 4.混匀后用玻棒蘸取红细胞悬液，充入血细胞计数池内，注意充池的液 量要适宜，使之恰好充满，无气泡及多余液体溢出。静置 2～3min，待红细 胞下沉后进行计数

5.将血细胞计数板置于显微镜下，用低 倍镜观察计数池内红细胞分布状况是否 均匀，如红细胞颁均匀，即可用高倍镜进 行计数。计数中央大方格中的四个角上和 中心的中方格（共5个方格）的红细胞。 为准确计数，对于压在线上的细胞计数可 采用压在想邻的两侧线者计入（如左侧及上侧），压在另相邻的两侧线（如 左侧及下侧)者不计数的原则进行计数（即数上不数下，数左不数右）见 图1-4。 6.计算将5个中方格所得的红细胞数的总和(N)乘以10,000即为每 微升()血液内的红细胞数，再乘106换算为每升(L)血液内的红细胞 数。 计算公式为： 红细L=N×号x10x20x10=N=10°-高×1021L 式中：N为5个中方格内数得的红细胞数。 ×背是将5个中方格红细胞数换算成一个大方（即01）的红细 胞数。 ×10是将一个大方格和容积(0.1μ)换算成1l血液布什的红细 胞数。 ×200为血液稀释倍数。 ×106将ul换算成L。 7.计数完毕后，用清水将计数盘和盖玻片冲洗干净，待干后备用

5.将血细胞计数板置于显微镜下，用低 倍镜观察计数池内红细胞分布状况是否 均匀，如红细胞颁均匀，即可用高倍镜进 行计数。计数中央大方格中的四个角上和 中心的中方格（共 5 个方格）的红细胞。 为准确计数，对于压在线上的细胞计数可 采用压在想邻的两侧线者计入（如左侧及上侧），压在另相邻的两侧线（如 左侧及下侧）者不计数的原则进行计数（即数上不数下，数左不数右）见 图 1-4。 6.计算 将 5 个中方格所得的红细胞数的总和（N）乘以 10,000 即为每 微升（l）血液内的红细胞数，再乘 106 换算为每升（L）血液内的红细胞 数。 计算公式为： L N L N N 10 / 100 10 200 10 10 5 25 / 6 1 0 1 2 红细胞 =     = = =  式中：N 为 5 个中方格内数得的红细胞数。 5 25  是将 5 个中方格红细胞数换算成一个大方（即 0.1l）的红细 胞数。  10 是将一个大方格和容积（0.1l）换算成 1l 血液布什的红细 胞数。  200 为血液稀释倍数。  106 将l 换算成 L。 7.计数完毕后，用清水将计数盘和盖玻片冲洗干净，待干后备用

【注意事项】 1.显微镜物镜接近计数板时应注意，勿损坏计数板及镜头。 2.计数时进入显微镜的光线要适中，否则不易找到方格。计数池内的细 胞分布要均匀，各中方格的细胞相差不应超过士10%，否则重新计数。 3.计数不准确的常见原因。 (1)采血不符合要求，如局部皮肤水肿、炎症、穿刺过浅、过度挤压 等。 (2)稀释液量不准，特别在夏季，稀释液放置过久，水分蒸发。 (3)操作太慢，血液凝固。 (4)如微量吸管内壁沾有白细胞和稀液，会使红细胞破坏，故应先做 红细胞计数。 (5)红细胞悬液混匀不充分。 (6)计数池充池不均匀，或充池后移动玻片。 (7)计数时对压在线上的红细胞，未按压线红细胞计灵敏原则进行计 数，造成计数遗漏或重复。 (8)当白细胞极度增多时，将使红细胞计数结果假性偏高，故应对红 细胞计数结果进行校正。校正方法：校正后红细胞计数结果=校正前红细胞 计数结果-白细胞计数结果。 【参考值】成年男性(4.05.5)×10L 成年女性(3.5~5.0)×102/几 新生儿(6.0~7.0)×102/几 【临床意义】

【注意事项】 1.显微镜物镜接近计数板时应注意，勿损坏计数板及镜头。 2.计数时进入显微镜的光线要适中，否则不易找到方格。计数池内的细 胞分布要均匀，各中方格的细胞相差不应超过±10%，否则重新计数。 3.计数不准确的常见原因。 （1）采血不符合要求，如局部皮肤水肿、炎症、穿刺过浅、过度挤压 等。 （2）稀释液量不准，特别在夏季，稀释液放置过久，水分蒸发。 （3）操作太慢，血液凝固。 （4）如微量吸管内壁沾有白细胞和稀液，会使红细胞破坏，故应先做 红细胞计数。 （5）红细胞悬液混匀不充分。 （6）计数池充池不均匀，或充池后移动玻片。 （7）计数时对压在线上的红细胞，未按压线红细胞计灵敏原则进行计 数，造成计数遗漏或重复。 （8）当白细胞极度增多时，将使红细胞计数结果假性偏高，故应对红 细胞计数结果进行校正。校正方法：校正后红细胞计数结果=校正前红细胞 计数结果-白细胞计数结果。 【参考值】成年男性（4.0～5.5）×1012/L 成年女性（3.5～5.0）×1012/L 新 生 儿（6.0～7.0）×1012/L 【临床意义】

1.红细胞增多 (1)相对性增多：如剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、在汗、多尿 等，使体内水分丧失过多，导致血液浓缩。 (2)绝对性增多：多由于缺氧而致红细胞代偿增多，红细胞增多的程 度与缺氧程度成正比。少数病便是由造血系统疾病所致。 1)生理性增多：见于胎儿、新生儿、高原居民等。剧烈的体育运动、 体力劳动、情绪激动等红细胞也可一过性增多。 2)病理性增多：见于慢性心肺功能不全疾患，如肺气肿、肺源性心脏 病及某些发绀型先天性心脏病等。此外真性红细胞增多症时，红细胞增多 可达(7.0~10.0)×10/L/ 2.红细胞增少 (1)生理性减少：见于妊娠中、晚期，血容量增加使血液稀释，红细 胞相对减少。 (2)病理性减少：是指血液中红细胞数量绝对减少。见于造血功能障 碍、造血原料供应不足，红细胞丢失和破坏过多等原因引起的各种贫血。 (二)血红蛋白测定（氰化高铁血红蛋白测定法） 【要求】熟悉氰化高铁血红蛋白测定方法，掌握血红蛋白测定的参考值 和临床意义。 【原理】高铁氰化钾能使血红蛋白中的二价铁氧化成三价铁，形成高铁 血红蛋白()。后者再与氰离子结合，形成稳定的氰化高铁血红蛋白 (HiCN)。氰化高铁血红蛋白的最大吸收峰在波长540nm处，可用标准的高 精度的分光光度计定量测定，其吸光度与血红蛋白浓度成正比

1.红细胞增多 （1）相对性增多：如剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、在汗、多尿 等，使体内水分丧失过多，导致血液浓缩。 （2）绝对性增多：多由于缺氧而致红细胞代偿增多，红细胞增多的程 度与缺氧程度成正比。少数病便是由造血系统疾病所致。 1）生理性增多：见于胎儿、新生儿、高原居民等。剧烈的体育运动、 体力劳动、情绪激动等红细胞也可一过性增多。 2）病理性增多：见于慢性心肺功能不全疾患，如肺气肿、肺源性心脏 病及某些发绀型先天性心脏病等。此外真性红细胞增多症时，红细胞增多 可达（7.0～10.0）×1012/L/ 2.红细胞增少 （1）生理性减少：见于妊娠中、晚期，血容量增加使血液稀释，红细 胞相对减少。 （2）病理性减少：是指血液中红细胞数量绝对减少。见于造血功能障 碍、造血原料供应不足，红细胞丢失和破坏过多等原因引起的各种贫血。 （二）血红蛋白测定（氰化高铁血红蛋白测定法） 【要求】熟悉氰化高铁血红蛋白测定方法，掌握血红蛋白测定的参考值 和临床意义。 【原理】高铁氰化钾能使血红蛋白中的二价铁氧化成三价铁，形成高铁 血红蛋白（Hi）。后者再与氰离子结合，形成稳定的氰化高铁血红蛋白 （HiCN）。氰化高铁血红蛋白的最大吸收峰在波长 540nm 处，可用标准的高 精度的分光光度计定量测定，其吸光度与血红蛋白浓度成正比