南方医科大学：《抗体工程》课程教学资源（讲稿）高通量单细胞测序的抗体基因筛选

高通量单细胞测序的 抗体基因筛选 检验与生物技术学院陈瑶

高通量单细胞测序的 抗体基因筛选 检验与生物技术学院 陈瑶

中和抗体是传染性疾病治疗的重要方向 中和抗体是B淋巴细胞产生的 某些抗体，能够与病原微生物 CoV Neutralizing antibody 表面的抗原结合，从而阻止该 病原微生物黏附靶细胞受体， 防止侵入细胞。中和抗体是治 ACE2 疗和预防感染性疾病的一个重 要方向。但是如何获得特异性 Host cell membrane 好的强效中和抗体是困难的， 且时间较长

中和抗体是传染性疾病治疗的重要方向 中和抗体是B淋巴细胞产生的 某些抗体，能够与病原微生物 表面的抗原结合，从而阻止该 病原微生物黏附靶细胞受体， 防止侵入细胞。中和抗体是治 疗和预防感染性疾病的一个重 要方向。但是如何获得特异性 好的强效中和抗体是困难的， 且时间较长

中和抗体的主 免技动物 要筛选方法 痛细起 B淋巴妞彩 聚乙二醇(PEG) 一.单克隆抗体的建立 诱导细图触合 HAT进 二.噬菌体文库 杂交细抱克 接种 制备水 单克瑞抗体

中和抗体的主 要筛选方法 一．单克隆抗体的建立 二．噬菌体文库

基于单细胞测序的抗体基因的筛选 Cell Biotin AAAAAA 百家号/指尖科技说

基于单细胞测序的抗体基因的筛选

单细胞测序 抗体的亲和力鉴定 流式分离出 Public antibody 抗原筛选 单细胞 clonotypes ScRNA-seq YYYY 9000 FACS sort Antigen-labeled Cell Oil ScVDJ-seq antibodies 细胞表面标记筛选 收集免疫B细胞 LIBRA-seq Functional characterization 抗体的功能鉴定

Cell CellPress Article Potent Neutralizing Antibodies against SARS-CoV-2 Identified by High-Throughput Single-Cell Sequencing of Convalescent Patients'B Cells Yunlong Cao,1.10 Bin Su,2.10 Xianghua Guo,2.10 Wenjie Sun,1.10 Yongqiang Deng,3.10 Linlin Bao,.10 Qinyu Zhu,5.6.10 Xu Zhang,7 Yinghui Zheng,1 Chenyang Geng,1 Xiaoran Chai,1 Runsheng He,1 Xiaofeng Li,3 Qi Lv,4 Hua Zhu,4 Wei Deng, Yanfeng Xu,4 Yanjun Wang,2 Luxin Qiao,2 Yafang Tan,3 Liyang Song,1.5 Guopeng Wang,5 Xiaoxia Du,1.5 Ning Gao,6.8 Jiangning Liu,4 Junyu Xiao,5.6 Xiao-dong Su,1.5 Zongmin Du,3 Yingmei Feng,2 Chuan Qin,4.*Chengfeng Qin,3. Ronghua Jin,2.*and X.Sunney Xie1.6.9.11. ed Innovation Center for Genomics(ICG)&Biomedical Pioneering Innovation Center(BIOPIC),Peking Universit. 通过恢复期患者B细胞的高通量单细胞测序鉴定出针对 SARS-CoV-2的强效中和抗体

通过恢复期患者 B 细胞的高通量单细胞测序鉴定出针对 SARS-CoV-2 的强效中和抗体

如何获得针对新冠病毒的记忆性B细胞 1.样本来源 来自新冠康复病人的外周血单个核细胞 (PMBCs) #1#2#3 PBMCs isolation

如何获得针对新冠病毒的记忆性B细胞 来自新冠康复病人的外周血单个核细胞 （PMBCs) 1.样本来源

如何获得针对新冠病 毒的记忆性B细胞 抗原筛选单个核细胞 S蛋白 受体结合域 RBD) Spike/RBD protein 5蛋白 pulldown 病毒RNA

如何获得针对新冠病 毒的记忆性B细胞 抗原筛选单个核细胞

如何获得针对新冠病毒的记忆性B细胞 进一步根据B细胞表面分子标记对分离获得的林巴 CD27+pulldown 细胞进行荧光标记(CD19high/CD20 low to negative/CD3negative/CD27high/CD38hig h),其中CD27是记忆性B细胞的重要标记。 最后通过流式细胞术获得既针对新冠病毒$蛋白又具 有记忆性B细胞标记的单B细胞 Flow CytoMetry 表面分子标记技术获得记忆性B细胞

如何获得针对新冠病毒的记忆性B细胞 进一步根据B细胞表面分子标记对分离获得的淋巴 细胞进行荧光标记（CD19high/CD20low to negative/CD3negative/CD27high/CD38hig h）,其中CD27是记忆性B细胞的重要标记。 最后通过流式细胞术获得既针对新冠病毒S蛋白又具 有记忆性B细胞标记的单B细胞 表面分子标记技术获得记忆性B细胞

单个B细胞的分离和测序 Single cell suspension 单细胞测序分析 RNA 一.单细胞的标记； 二.单细胞裂解液提 High-throughput 取RNA; Squencing Amplification Reverse transcription RNA 三.逆转录后建库进 行测序

单个B细胞的分离和测序 单细胞测序分析 一．单细胞的标记； 二．单细胞裂解液提 取RNA; 三．逆转录后建库进 行测序