南方医科大学：《抗体工程》课程教学资源（PPT课件）单克隆抗体 Monoclonal antibody（2/2）

单克隆抗体 郝文波 生物技术学院抗体工程研宪所

单克隆抗体 郝文波 生物技术学院抗体工程研究所

第四章 单克隆抗体 。小鼠单克隆抗体 。大鼠单克隆抗体 。兔单克隆抗体

第四章 单克隆抗体  小鼠单克隆抗体  大鼠单克隆抗体  兔单克隆抗体

杂交瘤的制备 。融合前的准备工作 。细胞融合 。杂交瘤细胞的筛选 。杂交瘤细胞的扩增、冻存和克隆化 。单克隆抗体的大量制备

杂交瘤的制备  融合前的准备工作  细胞融合  杂交瘤细胞的筛选  杂交瘤细胞的扩增、冻存和克隆化  单克隆抗体的大量制备

杂交瘤细胞的克隆化 。克隆化 使单个细胞无性繁殖而获得该细胞团体的整个 培养过程。 。目的 将抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞、特异性抗 体分泌细胞和无关抗体分泌细胞分开

杂交瘤细胞的克隆化  克隆化 使单个细胞无性繁殖而获得该细胞团体的整个 培养过程。  目的 将抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞、特异性抗 体分泌细胞和无关抗体分泌细胞分开

有限稀释法 2

有限稀释法 3)99 g260 限數稀釋法 Limiting dilution 有限稀释法 ⊙ 锅 8题開肥 八观八八

有限稀释法 有限稀释法

杂交瘤细胞的克隆化 。原则 尽早进行，反复2-3次 。克隆建立的标准 连续两次以上100%阳性孔 。克隆化方法 有限稀释法、欽琼脂平板法、显微克隆法、荧 光激活分离法

杂交瘤细胞的克隆化  原则 尽早进行，反复2-3次  克隆建立的标准 连续两次以上100%阳性孔  克隆化方法 有限稀释法、软琼脂平板法、显微克隆法、荧 光激活分离法

有限稀释法的原理 亚克隆 88 扩大培养 0品0 有限稀释法 Limiting dilution 100cells/ml 3 克隆化 由单一细胞长成 锡 88開開 儿八观 ELISA

有限稀释法的原理 亚克隆 扩大培养 100cells/ml 克隆化 由单一细胞长成 ELISA 有限稀释法

有限稀释法一材料 。96孔细胞培养板等 oHT培养基 。活力强的杂交瘤细胞 。小鼠腹腔细胞（饲养细胞）

有限稀释法—材料  96孔细胞培养板等  HT培养基 活力强的杂交瘤细胞 小鼠腹腔细胞（饲养细胞）

有限稀释法一方法1 含饲养细胞培养基 1-1i日 10 31 计数 50/ml 15/ml 5/ml 200μl/孔

计数 50/ml 15/ml 5/ml 200μl/孔 有限稀释法—方法1 含饲养细胞培养基 10 3 1