南方医科大学：《抗体工程》课程教学资源（讲稿）抗体库技术概论

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1 抗体库技术概论 2024 2024

01基因工程抗体的概述 02 鼠抗体的人源化改造 目录 03 抗体库技术 04小型化及功能改造

目录 01 基因工程抗体的概述 02 鼠抗体的人源化改造 03 抗体库技术 04 小型化及功能改造

抗体人源化与抗体的特异性和亲和力 高亲和力鼠抗体进行人源化改造 嵌合抗体 CDR移植与部分CDR 2 移植 镶面抗体 SDR移植 基于造模的人源性FR 区重构 3

抗体人源化与抗体的特异性和亲和力 高亲和力鼠抗体进行人源化改造 2 CDR移植与部分CDR 移植 3 SDR移植 1 嵌合抗体 镶面抗体 5 4 基于造模的人源性FR 区重构 3

抗体的人源化 鼠抗体人源化 人源性抗体 小鼠免疫获得抗体的亲和力 以人的1g基因作为研究原料 体外人源化改造去除 免疫原性 通过体外的亲和力成熟 来获得亲和力 4

鼠抗体人源化 人源性抗体 小鼠免疫获得抗体的亲和力 体外人源化改造去除 免疫原性 以人的Ig基因作为研究原料 通过体外的亲和力成熟 来获得亲和力 抗体的人源化 4

抗体人源化改造的策略 获取目的基因的两个思路： 1.用RT-PCR方法从杂交瘤细胞的mRNA中扩增VH及VL基因。 ①已经通过动物的免疫系统完成了亲和力成熟 2.用探针或者PCR从基因文库中钓取； ①通过人工建立基因文库，涵盖尽可能多的抗体基因用于筛选

抗体人源化改造的策略 获取目的基因的两个思路： 1. 用RT-PCR方法从杂交瘤细胞的mRNA中扩增VH及VL基因。 ① 已经通过动物的免疫系统完成了亲和力成熟 2. 用探针或者PCR从基因文库中钓取； ① 通过人工建立基因文库，涵盖尽可能多的抗体基因用于筛选

抗体库技术是人源性抗体的主要方向 治疗性抗体的发展经历了异源抗体、人源化抗体和人源性 抗体几个阶段。目前，人源性抗体是治疗性抗体发展的主要 方向。 抗体库技术的出现为人源性抗体的制备提供了良好 的技术平台，并且逐渐成为目前获得人源性抗体的主要手段 之一。 6

抗体库技术是人源性抗体的主要方向 治疗性抗体的发展经历了异源抗体、人源化抗体和人源性 抗体几个阶段。目前，人源性抗体是治疗性抗体发展的主要 方向。 抗体库技术的出现为人源性抗体的制备提供了良好 的技术平台，并且逐渐成为目前获得人源性抗体的主要手段 之一。 6

抗体库的设计原则 在体外模拟体内抗体生成的生物学过程 3 建立抗体基因文库 淘选 亲和力成熟 模拟人体内抗体基因天然的存在情况 模拟天然情况下 模拟抗原诱导的高频突变和链的 抗原对B细胞克 重新组合 隆的激活

在体外模拟体内抗体生成的生物学过程 1 2 3 建立抗体基因文库 模拟人体内抗体基因天然的存在情况 淘选 模拟天然情况下 抗原对B细胞克 隆的激活 亲和力成熟 模拟抗原诱导的高频突变和链的 重新组合 7

抗体库技术的使用策略 钓取抗体基因 01 02 建立文库 以B细胞为模板，钓取所有的 将g基因克隆入载体，将随机 Ig基因 克隆的集合建立Ig基因文库 抗体库 对抗体基因的鉴定和 淘选获取特异性抗体 亲和力成熟 基因 通过体外亲和力成熟让特异性 通过抗原淘选技术，从文库中 抗体的属性得以提升 04 03 钓取针对某抗原的特异性抗体 基因 8

04 01 02 03 抗体库 建立文库 将Ig基因克隆入载体，将随机 克隆的集合建立Ig基因文库 淘选获取特异性抗体 基因 通过抗原淘选技术，从文库中 钓取针对某抗原的特异性抗体 基因 钓取抗体基因 以B细胞为模板，钓取所有的 Ig基因 对抗体基因的鉴定和 亲和力成熟 通过体外亲和力成熟让特异性 抗体的属性得以提升 抗体库技术的使用策略 8

库技术简介 9

一 、库技术简介 9

1.库技术 ◆基因库(gene pool): 一个群体中所有个体的全部基因的总和。 ◆基因克隆(gene clone): 将某一目的基因导入寄主细胞，在宿主 细胞内目的基因被大量的复制，并保存在宿主细 胞。 基因文库(（gene library).: 含有某种生物全部遗传信息的重组DNM分子的克隆总和 10

u 基因库(gene pool)： u 一个群体中所有个体的全部基因的总和。 基因文库（gene library）： 含有某种生物全部遗传信息的重组DNA分子的 克隆总和 u 基因克隆（gene clone）： 将某一目的基因导入寄主细胞，在宿主 细胞内目的基因被大量的复制，并保存在宿主细 胞。 10