四川大学华西医院：《临床免疫学与检验技术》课程教学资源（PPT课件讲稿）第四章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备

第四章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备

第四章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备

第一节杂交瘤技术的基本原理

第一节 杂交瘤技术的基本原理

抗体种类 第一代抗体多克隆抗体( polyclonal antibody) 第二代抗体单克隆抗体( monoclonal antibody) 第三代抗体基因工程抗体( genetic engineering antibody)

第一代抗体 多克隆抗体（polyclonal antibody) 第二代抗体 单克隆抗体（monoclonal antibody) 第三代抗体 基因工程抗体（genetic engineering antibody) 抗体种类

淋巴细胞 B lympho

。 淋巴细胞

淋巴细胞发育 B-cell differentiation: class diversity immature B cell nature Bcell plasma cell class SIT n b class switch antigen antigen inde pendent dependent

。 淋巴细胞发育

浆细胞

。 浆细胞

抗原接种 Primary response Secondary respons Antibody ug mr-1 serum) phase 10 10t 102 10 antigen A

。 抗原接种

动物 BALB/c小鼠 7~12周龄 20~25g体重

BALB/c小鼠 7~12周龄 20~25g体重 动 物

单克隆抗体 B淋巴细胞:寿命短分泌特异系性抗体 骨髓瘤细胞:寿命长 杂交瘤细胞:寿命长,单克隆抗体

B淋巴细胞:寿命短,分泌特异系性抗体 骨髓瘤细胞：寿命长 杂交瘤细胞：寿命长，单克隆抗体 单克隆抗体

杂交瘤技术原理 >聚乙二醇(PEG):细胞融合剂,使免疫的小鼠脾细胞 与小鼠骨髓瘤细胞融合 HAT培养基的选择培养:反复的免疫学检测筛选克隆化増 殖的杂交瘤细胞系 >单克隆抗体生成:接种杂交瘤细胞于小鼠腹腔,腹水中 即可得到高效价的单克隆抗体

➢ 聚乙二醇（PEG）：细胞融合剂，使免疫的小鼠脾细 胞 与小鼠骨髓瘤细胞融合 ➢ HAT培养基的选择培养：反复的免疫学检测筛选克隆化增 殖的杂交瘤 细胞系 ➢ 单克隆抗体生成：接种杂交瘤 细胞于小鼠腹腔，腹水中 即可得到高效价的单克隆抗体 杂交瘤技术原理