《中药化学》课程教学课件（PPT讲稿）色谱分离法 Chromatography

色谱分离法Chromatography1906年俄国植物学家米哈伊尔·茨维特用碳酸钙填充坚立的玻璃管，以石油醚洗脱植物色素的提取液，经过一段时间洗脱之后，植物色素在碳酸钙柱中实现分离，由一条色带分散为数条平行色带由于这一实验将混合的植物色素分离为不同的色带，称为色谱法瑞典Uppsala大学对生化分离方法贡献色谱100年回顾1

1 色谱分离法 Chromatography 1906年俄国植物学家米哈伊尔·茨维特用碳酸钙 填充竖立的玻璃管，以石油醚洗脱植物色素的提取液， 经过一段时间洗脱之后，植物色素在碳酸钙柱中实现 分离，由一条色带分散为数条平行色带 由于这一实验将混合的植物色素分离为不同的色带， 称为色谱法 色谱100年回顾 瑞典Uppsala大学对生化 分离方法贡献

色谱分离法Chromatography分离不同色谱材料不同操作方式精制将各种色谱组合应用鉴定思考问题：1.常用的分离材料有哪些？2.每种分离材料的结构与性质？3.分离原理？02

2 不同色谱材料 不同操作方式 将各种色谱组合应用 分离 精制 鉴定 色谱分离法 Chromatography 思考问题：1.常用的分离材料有哪些？ 2.每种分离材料的结构与性质？ 3.分离原理？

色谱分离法Chromatography不同操作方式薄层色谱（ThinLayer Chromatography)柱色谱（columnChromatography)纸色谱((PaperChromatography)掌握各种色谱方式的缩写常用分离材料性质及分离原理总结对比(硅胶、大孔吸附树脂、反相硅胶、聚酰胺、葡聚糖凝胶、阳离子交换树脂、阴离子交换树脂）3

3 不同操作方式 薄层色谱（Thin Layer Chromatography） 柱色谱（column Chromatography) 纸色谱 (Paper Chromatography) 掌握各种色谱方式的缩写 色谱分离法 Chromatography 常用分离材料性质及分离原理总结对比 （硅胶、大孔吸附树脂、反相硅胶、聚酰胺、 葡聚糖凝胶、阳离子交换树脂、阴离子交换树脂）

吸附色谱、排阻色谱不同分离原理分配色谱、离子交换色谱吸附色谱利用吸附剂对被分离混合物中各成分的吸附能力不同进行分离排阻色谱（分子筛色谱）根据混合物中各成分分子大小进行分离分配色谱利用被分离成分在固定相和流动相之间的分配系数不同进行分离离子交换色谱利用混合物中各成分解离度的差异进行分离.4

4 不同分离原理 吸附色谱、排阻色谱 分配色谱、离子交换色谱 吸附色谱 利用吸附剂对被分离混合物中各成分的吸附能力不同进行分离 排阻色谱（分子筛色谱） 根据混合物中各成分分子大小进行分离 分配色谱 利用被分离成分在固定相和流动相之间的分配系数不同进行分离 离子交换色谱 利用混合物中各成分解离度的差异进行分离

thinlayerbromatographysilica gel吸附色谱columratogrpah1silica gel硅胶/氧化铝/聚酰胺/活性炭↑不同色谱葡聚糖凝胶离子交换树脂材料离子交换排阻色谱大孔吸附树脂分子筛分子筛/吸附色谱5

5 硅胶/氧化铝/聚酰胺/活性炭 不同色谱 材料 离子交换树脂 葡聚糖凝胶 大孔吸附树脂 吸附色谱 排阻色谱 分子筛 离子交换 分子筛/吸附色谱

吸附色谱利用吸附剂对被分离混合物中各成分的吸附能力不同进行分离常用吸附剂硅胶（应用广泛）化合物结构氧化铝（碱性氧化铝）R-COOH聚酰胺 (酚类/醌类/黄酮类)Ar-OHR-OH活性炭（水溶性、氨基酸、糖类、苷类）R-NH2, R-NH-R'展开剂（洗脱剂）：常用亲脂性或中等极性展开剂R-CHOR-CO-R'R-COO-R'检视：用显色剂或紫外光灯R-O-R'R-X化合物极性与Rf值一般规律：R-H化合物极性越大，Rf值越小

6 吸附色谱 常用吸附剂 硅胶（应用广泛） 氧化铝（碱性氧化铝） 聚酰胺（酚类/醌类/黄酮类) 活性炭（水溶性、氨基酸、糖类、苷类） 化合物结构 R-COOH Ar-OH R-OH R-NH2 , R-NH-R' R-CHO R-CO-R' R-COO-R' R-O-R' R-X R-H 利用吸附剂对被分离混合物中各成分的吸附能力不同进行分离 化合物极性与Rf值一般规律： 化合物极性越大，Rf值越小 展开剂（洗脱剂）：常用亲脂性或中等极性展开剂 检视：用显色剂或紫外光灯

吸附原理解读吸附剂固液吸附三要素组成溶质溶剂吸附一解吸附过程影响因素溶剂吸附剂的极性溶质1吸附剂溶剂的极性不溶质2化合物极性溶质3极性大小是影响吸附主要因素7

7 吸附原理解读 固液吸附三要素组成 吸附剂 溶质 溶剂 吸附剂 溶质1 溶质2 溶质3 溶剂 吸附-解吸附过程 影响因素 吸附剂的极性 溶剂的极性 化合物极性 极性大小是影响吸附主要因素

C.H硅胶C.H无机硅胶是一种高活性吸附材料，用硅酸钠和硫酸反应，并经老化、酸泡等一系列后处理过程而制得，硅胶属非晶态物质，其化学分子式为mSi02．nH20；难溶于水常用于分离的种类：硅胶G；硅胶GF254；硅胶Hthin layerchromatographysilica gel粒度：具有不同粒度（200~300目或100目）columnchromatogrpahysilica gel应用范围广泛，但分离生物碱易产生拖尾现象

硅胶 无机硅胶是一种高活性吸附材料，用硅酸钠和硫酸反应，并经老化、酸泡 等一系列后处理过程而制得，硅胶属非晶态物质，其化学分子式为 mSiO2 ．nH2O；难溶于水 常用于分离的种类：硅胶G；硅胶GF254 ；硅胶H 粒度：具有不同粒度（200~300目或100目） 应用范围广泛，但分离生物碱易产生拖尾现象

白色晶状粉末氧化铝AlO3分类：中性氧化铝和碱性氧化铝常用碱性氧化铝：适于分离生物碱或中性亲脂性成分（笛、类）不适用于酸性成分（含酚羟基或羧基）(为什么)吸附剂与被吸附成分发生死吸附而难以解吸附

氧化铝 Al2O3 白色晶状粉末 分类：中性氧化铝和碱性氧化铝 常用碱性氧化铝： 适于分离生物碱或中性亲脂性成分（甾、萜类） 不适用于酸性成分（含酚羟基或羧基）（为什么） 吸附剂与被吸附成分发生死吸附而难以解吸附

硅胶与氧化铝吸附特点·均为极性吸附剂·对极性物质具有较强的亲和能力。故同为溶质，极性强者将被优先吸附·溶剂极性越弱，则吸附剂对溶质将表现出超强的吸附能力溶剂极性增强则吸附剂对溶质的吸附能力即随之减弱、溶质即使被硅胶、氧化铝吸附但一旦加入极性较强的溶剂时以可被后者置换洗脱下来

◆ 均为极性吸附剂 硅胶与氧化铝吸附特点 ◆对极性物质具有较强的亲和能力。 故同为溶质，极性强者将被优先吸附 ◆溶剂极性越弱，则吸附剂对溶质将表现出超强的吸附能力 溶剂极性增强则吸附剂对溶质的吸附能力即随之减弱 ◆ 溶质即使被硅胶、氧化铝吸附 但一旦加入极性较强的溶剂时以可被后者置换洗脱下来