复旦大学：《医学微生物学 Medical Microbiology》实验教学课件_实验7 接合试验

实验七 实验内容 1.录像:细菌耐药性 学生操作:接合实验(实验报告) 实验目的 二、实验原理 三、实验材料与方法 四、实验结果与讨论

实验七 实验内容： 1.录像：细菌耐药性 2.学生操作：接合实验（实验报告） 一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料与方法 四、实验结果与讨论

细菌性菌毛与接合过程 chromosomal dna F Plasmid Chromosomal dNA Milius Donor Recipient 2.( DNA Polymerase Relaxasome transfersome F Plasmid F Plasmid Pili old donor New donor

细菌性菌毛与接合过程

F质粒与染色体 在特异位点重组 F质粒插入染色体 整合的F质粒 F菌 b.F质粒与染色体整合变为高频重组株(Hf) 部分染色体 Hf染色体片段与 复制并转移 F菌染色体重组 质粒 HfF菌 Hf重组的F菌 c.Hf将其部分染色体转入F菌,产生重组的F菌

细菌接合奥验原理 通过性菌毛使供菌与受菌接触,将供菌的遗传物 质转移到受菌内,使受菌得供菌某些遠传性状 的基因转移方式称接合( conjugation) 只有带有接合性质粒的细菌才能通过接合转移遗 传物质。接合性质粒包括F质粒、R质粒、Co1质 粒等。接合配对是由致育因子(F质粒)的存在所 决定的,因为F质粒基因编码性菌毛

通过性菌毛使供菌与受菌接触，将供菌的遗传物 质转移到受菌内，使受菌获得供菌某些遗传性状 的基因转移方式称接合(conjugation)。 只有带有接合性质粒的细菌才能通过接合转移遗 传物质。接合性质粒包括F质粒、R质粒、Col质 粒等。接合配对是由致育因子(F质粒)的存在所 决定的 ，因为F质粒基因编码性菌毛。 细菌接合实验原理

实验材料:(二人一组) 菌株 供菌(A)鼠伤寒沙门菌氯霉素耐药祩 受菌(B)大肠杄菌氯零素敏感株 培养基1m1肉汤管3文、含氯霉素麦康凯平板 3块、不含氨霉素麦康凯平板1块 其它器村:1001加样器无菌加样器枪头

实验材料：（二人一组） 菌株: 供菌（A） 鼠伤寒沙门菌氯霉素耐药株 受菌（B） 大肠杆菌氯霉素敏感株 培养基 1ml 肉汤管3支、含氯霉素麦康凯平板 3块、不含氯霉素麦康凯平板1块 其它器材: 100μl 加样器 无菌加样器枪头

操作步骤 1.分别吸取0.1m1供体菌和受体菌于2支1m1肉 汤管中,另吸取0.1m1供体菌和受体菌于1m1 肉汤管中混合,量37℃温箱1小时培养。 2.接种麦康凯平板,培养16-18hr,观寨结果

操作步骤 1.分别吸取0.1ml供体菌和受体菌于2支1ml肉 汤管中，另吸取0.1ml供体菌和受体菌于1ml 肉汤管中混合，置37℃温箱1小时培养。 2.接种麦康凯平板，培养16-18hr，观察结果

供体菌 受体菌 0.1m1 0.1m1 1m肉汤 lml肉汤 1m1肉汤 37℃温箱培养1hr,分区划线接种 含氯霉素麦康凯培养基含氯霉素麦康凯培养基含氯霉素麦康凯培养基 不含氯霉素麦康凯培养基

 供体菌 受体菌 1ml肉汤 1ml肉汤 1ml肉汤 0.1ml 0.1ml 37℃温箱培养1hr，分区划线接种 含氯霉素麦康凯培养基 含氯霉素麦康凯培养基 含氯霉素麦康凯培养基 不含氯霉素麦康凯培养基

麦康凯平板上的两种菌落 沙门菌 大肠埃希

麦康凯平板上的两种菌落 沙门菌 大肠埃希菌

经37℃过夜培养后 无色透明菌落 无色透明菌落和粉无菌落生长 红色不透明菌落

无色透明菌落 无色透明菌落和粉 红色不透明菌落 无菌落生长 经37℃过夜培养后

细菌接合奥验过程 Vash cells Wash cells Wash cells Plate 10 cells Plate -10 cells Plate 10 cells MN MM MM

细菌接合实验过程