复旦大学：《医学微生物学 Medical Microbiology》实验教学课件_实验2 细菌的人工培养

次实验中出现的问题 试管的拿取方法 X shutterstock

第一次实验中出现的问题 x • 试管的拿取方法

无菌操作 注意! 注意试管口消 毒,开、塞管 盖均需火焰消 Inoculating loop is heated until it is red.ho 2 Cap is removed from slant cul- re and tube mouth is heated 3 Organism is picked up from 操作应在火焰 周围进行(无 菌区) 试管塞(盖 不能随便放置 (以右手小指 及无名指捏 住)。 Mouth of tube is flamed, Inocula- ting loop is not flamed 5 Slant culture is re-capped and 6 p is flamed red-hot and re- etruned to test tube rack. turned to receptacle

• 无菌操作 注意 ! • 注意试管口消 毒，开、塞管 盖均需火焰消 毒。 • 操作应在火焰 周围进行（无 菌区）。 • 试管塞（盖） 不能随便放置 （以右手小指 及无名指捏 住）

·显微镜使用注意事项 脱手套拿显微镜(防止污染显微镜) 由侧面观察,调节镜头浸入油中 ■使用完毕后用擦镜纸蘸取乙醚将油镜上 的油擦干净,并将载物台降至最低、灯 光调至最暗后关机

• 显微镜使用注意事项  脱手套拿显微镜（防止污染显微镜）  由侧面观察，调节镜头浸入油中  使用完毕后用擦镜纸蘸取乙醚将油镜上 的油擦干净，并将载物台降至最低、灯 光调至最暗后关机

■实验结束后必须关闭煤气(包括每行的 总闸以及桌上的两个开关)

 实验结束后必须关闭煤气（包括每行的 总闸以及桌上的两个开关）

实验二细菌的人工培养 内容 1、小讲课:消毒与灭菌 培养基与细菌生长状况示教 2、学生操作 细菌接种一平板分区划线法 消毒灭菌效果验证

实验二 细菌的人工培养 内容： 1、小讲课：消毒与灭菌 培养基与细菌生长状况示教 2、学生操作： 细菌接种－平板分区划线法 消毒灭菌效果验证

消毒与灭菌 基本概念: 灭菌基本概念相关性 消毒(抑菌防腐一消毒一灭菌一无菌 防腐( 繁殖抑制 繁殖体死亡芽孢死亡 处理条件强度(温度、压 力、浓度、射线强度等以 及处理时间) 无菌 生物载量( Bioburden)

消毒与灭菌 一、基本概念： 灭菌（sterilization） 消毒（disinfection） 防腐（antisepsis） 无菌（asepsis）

灭菌( sterilization):指杀灭物体上的所有 微生物,包括病原与非病原微生物以及细菌芽孢。 肖毒( disinfection):指只杀灭物体上病原微 生物,不包括非病原微生物与细菌芽孢。 防腐( antisepsis):指抑制微生物的生长繁殖, 以防止物品发生腐败变质。 无菌( asepsis):不含活菌的意思 无菌操作:是防止微生物进入机体或其他物品的操 作技术.(如进行外科手术需防止细菌进入创口, 微生物实验的无菌操作,防止微生物的污染

灭菌（sterilization）：指杀灭物体上的所有 微生物，包括病原与非病原微生物以及细菌芽孢。 消毒（disinfection）：指只杀灭物体上病原微 生物，不包括非病原微生物与细菌芽孢。 防腐（antisepsis）：指抑制微生物的生长繁殖， 以防止物品发生腐败变质。 无菌（asepsis）： 不含活菌的意思。 无菌操作：是防止微生物进入机体或其他物品的操 作技术.(如进行外科手术需防止细菌进入创口， 微生物实验的无菌操作，防止微生物的污染。)

二、消毒灭菌的方法 物理方法:温度、光线与射线 超声与声波、滤过除菌 化学方法:各种消毒剂 生物方法:抗生素、噬菌体、细菌素

二、消毒灭菌的方法 物理方法：温度、光线与射线、 超声与声波、滤过除菌 化学方法：各种消毒剂 生物方法: 抗生素、噬菌体、细菌素

物理方法—温度 1、湿热消毒灭菌法 煮沸法:可用于饮水、杯盘、碗筷消毒 ■流通蒸汽灭菌法:可杀灭细菌繁殖体 间歇蒸汽灭菌法:连续三次可杀灭细菌芽胞, 适用于不耐高温的培养基灭菌 ■巴氏消毒法 ■高压蒸汽灭菌法

物理方法——温度 1、湿热消毒灭菌法  煮沸法：可用于饮水、杯盘、碗筷消毒。  流通蒸汽灭菌法：可杀灭细菌繁殖体。  间歇蒸汽灭菌法：连续三次可杀灭细菌芽胞， 适用于不耐高温的培养基灭菌。  巴氏消毒法  高压蒸汽灭菌法

巴氏消毒法( Pasteurization):加热61162.8℃30mn 或717℃15305 灭液体中的病原微生物:主要用于牛奶、酒类消毒 冷却器 预冷 加热器 消毒牛奶 温度控制器 预热 待消毒牛奶 高温瞬间巴氏消毒法的操作流程图

巴氏消毒法（Pasteurization): 加热61.1-62.8℃ 30min 或71.7℃ 15-30s 杀灭液体中的病原微生物；主要用于牛奶、酒类消毒